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双宝: 作品数：26 被引量：185H指数：7; 供职机构：东北农业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>

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马铃薯优化再生系统的建立被引量：31: 1995年; 本试验研究了六种培养基系统对马铃薯东农３０３，Ｆａｖｏｒｉｔａ和极早三个品种来源的不同外植体的愈伤组织诱导和植株再生的影响，筛选出了适合植株再生的最佳外植体、最佳外植体大小及最佳培养基系统。适合植株再生的最佳外植体为叶片；最佳外植体大小为叶片０．５ｃｍ２、茎０．５ｃｍ、块茎０．２５ｃｍ２×０．３ｃｍ，适合于茎、块茎及叶的有效培养基系统分别为：①ＭＳ＋３ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．０１ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐｈ５．６）４周ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３（ｏＨ５．６）；②ＭＳ＋１．７５ｍｇ·Ｌ-１ＺＴ＋０．８７ｍｇ·Ｌ-１ＩＡＡ（ｐＨ５．８）；③ＭＳ＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．１８６ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐＨ５．８）２周ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ（ｐｈ５．８）。; 双宝李文芙李文滨陈伊里田兴亚吕文河王凤义朱祥春秦昕; 关键词：马铃薯再生率; 全文增补中

一种用于吸附四环素的改性炭黑吸附剂及其制备方法和应用: 本发明公开了一种用于吸附四环素的改性炭黑吸附剂及其制备方法和应用，属于功能材料及其制备技术领域。本发明采用草酸和柠檬酸对炭黑进行处理，有效增加炭黑孔径和空隙率的同时，有效增加炭黑表面含氧官能团，使炭黑对四环素的吸附能力得...; 双宝刘昌宇代英杰李想赵家伟牛禄李智心王馨瑶

一株产碱性磷酸酶的解淀粉芽孢杆菌及其应用: 本发明公开一株产碱性磷酸酶的解淀粉芽孢杆菌及其应用，属于微生物的技术领域。本发明的目的是为了获得产率高和酶活高的碱性磷酸酶。本发明提供一种解淀粉芽孢杆菌和利用解淀粉芽孢杆菌制备酶活高和产量高的碱性磷酸酶。从土壤中分离纯化...; 双宝薄乐代英杰康鑫吴思

重组人碱性磷酸酶表达及其调节人白细胞释放TNF-α活性研究被引量：2: 2020年; 为获得高纯度糖化蛋白人肠碱性磷酸酶(IAP)并研究其新生物活性和药学意义,采用黑曲菌和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达嵌合人肠碱性磷酸酶(recAP),获得稳定表达细胞株和高纯度recAP。recAP呈剂量依赖型灭活内毒素(LPS),使致炎物质ATP脱磷产生终产物腺苷。利用新鲜提取的人类白细胞和脐静脉内皮细胞系(HUVECs)建立抗炎生物活性模型。ELISA结果表明,recAP在LPS存在或不存在情况下均明显抑制TNF-α分泌,ATP脱磷终产物腺苷明显抑制TNF-α分泌。非LPS依赖的recAP抑制人类白细胞TNF-α分泌是一种碱性磷酸酶新活性测定方法。; 惠觅宙秦璐楠高辰哲薄乐刘天奇吴书音韩建春翁晓刚双宝; 关键词：LPS ATP TNF-Α

食品级木聚糖酶黑曲霉工程菌的构建被引量：19: 2013年; 从黑曲霉CICC2462中扩增得到木聚糖酶基因xynB的成熟肽编码序列(746 bp),并针对黑曲霉CICC2462中高表达的糖化酶基因位点,通过重叠延伸PCR将xynB基因片段与糖化酶基因的5'同源臂、3'同源臂进行拼接得到同源重组表达框GBG,将其定向插入表达载体pSZH-CYM中,构建黑曲霉表达载体pSZH-xynB。将载体pSZH-xynB通过冻融法转化农杆菌AGL1,通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462菌丝体。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得47株重组菌株,并从其中12株中筛选出在糖化酶基因位点发生基因置换的同源重组菌株9株。而后通过连续传代、筛选和PCR检测,获得消除潮霉素基因的纯合的同源重组菌株,获得符合食品级生产要求的工程菌。对工程菌进行发酵培养、酶活性检测和SDS-PAGE分析,表明在糖化酶摇瓶发酵条件下,工程菌培养液上清的木聚糖酶活性高达4 495.8975 U·mL-1。研究结果为生产低木糖苷酶活性的内切木聚糖酶提供新途径,为利用黑曲霉表达系统安全高效地生产其他酶制剂和重组蛋白提供参考。; 李杰张会张莹莹双宝王多佳赵宁李勇赫福霞; 关键词：木聚糖酶黑曲霉同源重组根癌农杆菌

一种农业有机物料腐熟剂及其制备方法与应用: 本发明公开了一种农业有机物料腐熟剂及其制备方法与应用，属于秸秆资源利用技术领域。本发明解决了有机肥料制备过程中升温慢、纤维素降解慢、腐熟程度不高和发酵周期长的问题。所述农业有机物料腐熟剂包括黑曲霉菌、白地霉菌、枯草芽孢杆...; 代英杰吴豪天王寒冰李智心闫立龙单德鑫李威双宝

一株产碱性磷酸酶的解淀粉芽孢杆菌及其应用: 本发明公开一株产碱性磷酸酶的解淀粉芽孢杆菌及其应用，属于微生物的技术领域。本发明的目的是为了获得产率高和酶活高的碱性磷酸酶。本发明提供一种解淀粉芽孢杆菌和利用解淀粉芽孢杆菌制备酶活高和产量高的碱性磷酸酶。从土壤中分离纯化...; 双宝薄乐代英杰康鑫吴思; 文献传递

一种组合式移液管: 一种组合式移液管，属于常用实验器材，是在常规移液管下端附设可拆装的移液头，可根据移取液体类型不同，选择不同内径的移液头，使移液操作更方便轻松，杜绝失败重来，且清洗也很方便。; 双宝李杰邓宇; 文献传递

Klac PNP基因密码子优化及在枯草芽胞杆菌中的高效表达被引量：2: 2023年; 嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)是嘌呤补救合成途径中的关键酶,嘌呤降解途径涉及氧化嘌呤环裂解,在人体中形成尿酸作为最终产物,增加患痛风的风险。为提高PNP的发酵水平,将来源于乳酸克鲁维酵母的PNP基因进行密码子优化,分别将优化前后的目的PNP基因连接至分泌表达载体pBSA43,并在枯草芽胞杆菌WB600中重组表达PNP-YP-pBSA43、PNP-YO-pBSA43。结果显示,密码子优化前的酶活力为333.69 U/mL,优化后的酶活力达到351.61 U/mL。为进一步提高重组蛋白表达量,通过响应面分析得出优化后重组菌株产PNP的最佳发酵条件为初始pH为6.67、发酵时间55 h、发酵温度28.7℃。在该条件下,重组PNP活力为372.79 U/mL,相比未优化前提高了12%。来源于乳酸克鲁维酵母的PNP基因经密码子优化后重组表达,酶活力显著提高,对PNP在枯草芽胞杆菌中高效表达奠定了基础。; 赵越王新秀吴思陈作慧张会惠觅宙李杰双宝; 关键词：嘌呤核苷磷酸化酶枯草芽胞杆菌密码子优化异源表达