吕永坤
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程理学更多>>
- 甘油替代葡萄糖作为碳源生产丙酮酸
- 2014年
- 光滑球拟酵母是重要的丙酮酸工业生产菌株,主要利用葡萄糖作为碳源生产丙酮酸。该研究以产量大且价格便宜的甘油部分替代葡萄糖并控制碳源组成为80 g/L葡萄糖和20 g/L甘油,摇瓶条件下发酵52 h,丙酮酸产量达到27.6 g/L,在7 L发酵罐上最终丙酮酸产量为61.7 g/L,与碳源为100 g/L葡萄糖的对照条件相比,几乎没有任何变化。由于碳源是培养基的主要成分,用甘油替代葡萄糖可以降低丙酮酸生产的原料成本,减轻由于大量生物柴油合成造成的甘油产能过剩问题。
- 徐沙吕永坤周景文
- 关键词：光滑球拟酵母甘油葡萄糖丙酮酸
- 酿酒酵母转运蛋白Agp1p泛素化对氮源利用的影响
- 2015年
- 【目的】研究酿酒酵母细胞膜关键氮源转运蛋白Agp1p的泛素化对其氮源利用的影响。【方法】构建一个基于双分子荧光互补技术的泛素化检测载体,检测Agp1p是否受到泛素化。采取定点突变的方法对Agp1p中可能的泛素化位点进行突变,研究其泛素化的关键作用位点及其对酿酒酵母氮源利用的影响。【结果】在谷氨酰胺、精氨酸、脯氨酸及铵盐为唯一氮源的培养基中,转运蛋白Agp1p均受到泛素化调控。定点突变实验结果显示,与出发菌株相比,潜在泛素化位点突变后,菌体荧光强度均有一定程度减弱。其中四重突变体Agp1pK11,14,98,112R荧光强度最弱,表明泛素化过程被显著抑制。系列突变菌株在9种氨基酸为复合氮源以及尿素为单一氮源的发酵实验表明,四重突变体菌体氮源利用率提高效果显著。【结论】转运蛋白Agp1p的泛素化受到不同氮源的影响,泛素化位点突变可以显著影响其泛素化过程,从而改变细胞对氮源的利用过程。
- 李应宇吕永坤周景文堵国成陈坚
- 关键词：酿酒酵母泛素化
- 微生物高效合成黄酮木脂素类化合物
- <正>黄酮木脂素类化合物是一类具有多种生理功能、结构较为复杂的植物天然产物。由于主要的黄酮木脂素类化合物在天然植物中的含量较低,目前主要采用的植物提取法,在价格和供应量方面均难以满足市场需求。采用微生物法高效合成黄酮木脂...
- 周景文吕永坤堵国成陈坚
- 文献传递
- 微生物高效合成黄酮木脂素类化合物的合成生物学研究
- 黄酮木脂素类化合物是一类具有多种生理功能、结构较为复杂的植物天然产物。由于主要的黄酮木脂素类化合物在天然植物中的含量较低,目前主要采用的植物提取法,在价格和供应量方面均难以满足市场需求。采用合成生物学技术改造微生物高效合...
- 周景文吴俊俊吕永坤堵国成陈坚
- 文献传递
- 酿酒酵母SPS途径调控因子Stp1的泛素化过程被引量：1
- 2016年
- 研究酿酒酵母SPS途径关键调控因子Stp1p泛素化调控机制。通过构建基于双分子荧光互补技术的泛素化检测载体、泛素化位点定点突变及突变体氨基酸利用这三个层面来研究Stp1p的泛素化过程。通过对Stp1p的潜在的4个泛素化位点突变结果表明,与Stp1p相比,各突变体的荧光强度均有一定程度的减弱,其中三重突变体Stp1K49,129,113R荧光强度明显弱化。表明潜在的泛素化位点突变后,Stp1p的泛素化过程受到阻遏。进一步的氨基酸利用实验表明,泛素化位点突变对于调控菌体氮源利用具有重要的作用。上述结果说明,泛素化位点突变可以调控Stp1p的泛素化过程,进而影响菌体氮源的利用。
- 李应宇吕永坤周景文堵国成陈坚
- 微生物高效积累黄酮类植物天然产物的合成生物学技术
- 周景文吴俊俊朱赛杰王奎吕永坤堵国成陈坚
- 2-酮基-L-古龙酸一步发酵生产菌株发酵过程优化被引量：5
- 2016年
- 对1株可以一步发酵生产维生素C直接前体2-酮基-L-古龙酸（2-keto—L—gulonic acid，2-KLG）的氧化葡萄糖酸杆菌工程菌株（Gluconobacter oxydans—ss）的发酵条件进行优化，以提高其发酵效率。结合Box—Behnken实验和响应面法对其初始发酵培养基进行优化，得到优化的发酵培养基组成：山梨醇158．0g／L，酵母膏18．0g／L，初始pH5．0。采用该优化培养基在3L全自动发酵罐上进行发酵过程控制。在考察不同转速对2-KLG积累过程影响的基础上，进一步提出分阶段转速控制策略：即发酵前期（0～48h）转速控制在600r／min，48h至发酵结束转速控制在500r／min。应用该策略，2-KLG产量达到34．86g／L，生产强度为0．36g／（L·h），其分别比恒定转速发酵时2-KLG的最大产量提高24．01％和24．14％。
- 杨燕花吕永坤陈吉铭周景文
- 关键词：2-酮基-L-古龙酸氧化葡萄糖酸杆菌响应面法
- 氮代谢调控相关蛋白质泛素化修饰筛选被引量：3
- 2014年
- 通过对氮代谢相关透性酶及调控因子泛素化修饰的筛选,为通过改造蛋白质泛素化修饰来解除氮代谢阻遏效应提供参考。对此前建立的一种蛋白质泛素化快速检测方法进行了改造和发展,进一步增强了阳性子的荧光信号,并使得该方法可以用于定量分析,从而使泛素化检测的结果更为可靠。对氮代谢物阻遏效应密切相关的10个蛋白质的检测结果表明,其中5个受到泛素化修饰,4个不能受到泛素化修饰,1个不能确定是否受到泛素化修饰。除建立了一种可靠的蛋白质泛素化检测方法,也为通过蛋白质泛素化调控途径解除氮代谢物阻遏效应提供了思路。
- 吕永坤周景文刘龙
- 关键词：酿酒酵母泛素化
