吴芳
- 作品数:12 被引量:15H指数:2
- 供职机构:浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省科技厅基金浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- Decorin在糖尿病肾病中的作用
- 李红张哲董凤芹姚航平吴芳寿成珉朱峰王慧萍
- 本研究将突破多年来糖尿病肾病只有药物治疗或到晚期只有经透析治疗的局限性。开发出独特的对糖尿病肾病的治疗手段和方法。正准备申请专利,同时进一步完善基础研究,在时机成熟的时候申请进入临床使用,可望成为具有我国自主知识产权的专...
- 关键词:
- 关键词:糖尿病肾病DECORIN
- 核心蛋白聚糖Ⅱ过表达对肾组织细胞基质金属蛋白酶2和9表达的影响被引量:6
- 2008年
- 目的观察高水平表达的核心蛋白聚糖Ⅱ(DCN)对高糖培养的大鼠肾组织细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法用大鼠DCN重组腺病毒载体(Ad/DCN)和抗转化生长因子(TGF)-β1中和抗体分别处理不同糖浓度培养条件下的大鼠肾系膜细胞(RMC)和肾小管细胞(HK-2),用Western印迹法观察转染72h后DCN蛋白水平变化及其对TGF—β1和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)以及MMP-2和MMP-9表达水平的影响。结果在RMC细胞中,TGF-6,和C-Ⅳ的蛋白表达在高糖条件下升高(分别为1.63±0.02和0.52±0.01),经抗TGF—β1中和抗体或用Ad/DCN转染处理72h有明显下降(TGF—β1均下降至0,C-Ⅳ分别为0.29±0.01和0.21±0.01,均P〈0.05);MMP-2和MMP-9在高糖条件下表达下降(分别为0.01±0.00和0.32±0.01),经抗TGF-β1中和抗体或用Ad/DCN转染处理72h有明显上升(MMP-2分别上升至0.65±0.01和0.67±0.01,MMP-9分别上升至0.89±0.01和0.73±0.01,均P〈0.05)。而在HK-2细胞中,TGF-β1和C-IV的蛋白表达在高糖条件下也升高(分别为1.45±0.01和0.41±0.01),且MMP-2的表达升高(0.27±0.01),经抗TGF—β1中和抗体或用Ad/DCN转染处理72h则有明显下降(TGF—β1分别为0.06±0.01和0.08±0.01,C-Ⅳ分别为0.11±0.01和0.01±0.00,MMP-2分别为0.14±0.01和0.06±0.01,均P〈0.05)。结论高糖对肾小球系膜细胞和小管细胞的基质金属蛋白酶表达的影响是不同的,降低TGF—β1活性可使。肾小球系膜细胞和小管细胞基质金属蛋白酶表达转变。
- 董凤芹李红吴芳姚航平
- 关键词:蛋白聚糖类基质金属蛋白酶转化生长因子Β1
- 大鼠蛋白聚糖Ⅱ重组腺病毒载体的构建及生物学功能的鉴定被引量:1
- 2006年
- 目的:构建大鼠蛋白聚糖Ⅱ(DCN)重组腺病毒载体(A d-DCN),鉴定其生物学活性。方法:用RT-PCR技术从大鼠肾脏组织mRNA中扩增获得全长DCN基因;将DCN基因克隆至腺病毒穿梭载体,与腺病毒骨架质粒在B J5183-AD-1细菌中同源重组,并转染至A d293细胞,扩增病毒后,用病毒空斑形成实验检测病毒滴度,并用MTT、RT-PCR、W estern b lot对其活性及表达情况进行鉴定。结果:本实验构建的A d-DCN滴度可达1×109pfu.m-l 1,能在CHO细胞中高效表达具有生物学活性的DCN蛋白;表达产物能拮抗TGFβ1对CCL-64细胞增殖的抑制作用,TGFβ1+表达产物DCN处理组细胞增殖率明显高于TGFβ1单独处理组和TGFβ1+A d-lacz处理组[(0.5252±0.04 vs 0.2826±0.02、0.2918±0.02)OD,P<0.05],但TGFβ1+表达产物DCN处理组细胞增殖率仍低于未处理组[(0.9332±0.08)OD,P<0.05]。结论:本实验构建的DCN重组腺病毒能高效表达具有生物学活性的DCN蛋白。
- 吴芳姚航平董凤芹李红
- 腺病毒介导的decorin在大鼠肾小球系膜细胞中的表达及对系膜细胞TGFβ1表达的影响
- 目的:通过包含decorin的重组腺病毒(Ad-decorin)感染大鼠肾小球系膜细胞(RMCs),观察并评价由腺病毒介导的decorin在RMCs中的表达及对RMCs表达TGFβ1 mRNA及蛋白的影响。方法:Deco...
- 李红吴芳董凤芹姚航平
- 关键词:DECORIN重组腺病毒大鼠肾小球系膜细胞TGF
- 文献传递
- 冠心病合并2型糖尿病冠状动脉造影特点分析被引量:1
- 2006年
- 吴芳李霖周嘉强张芙荣李佳霖李红
- 关键词:冠状动脉造影特点冠状动脉硬化心血管并发症冠脉造影
- 2型糖尿病患者周围神经病变与心率变异关系探讨被引量:1
- 2006年
- 目的检测2型糖尿病患者心率变异(HRV)各指标的变化,探讨HRV与2型糖尿病患者周围神经病变的关系及其临床意义。方法将135例2型糖尿病患者(其中55例无周围神经病变,80例合并周围神经病变)及20例正常对照组作为研究对象,所有研究对象测定了心率变异中总体标准差(SDNN)、均值标准差(SDANN)、标准差平均值(SDNN指数)、差值均方的平方根(RMSSD)、爱丁堡指数(PNN50)、低频与高频比(LF/HF)各指标并进行比较。结果(1)2型糖尿病有/无周围神经病变组各HRV指标均较正常对照组低,差异有统计学意义。(2)2型糖尿病合并周围神经病变患者心率变异指数较无周围神经病变患者有进一步的下降。结论2型糖尿病合并周围神经病变者心率变异指数下降。
- 叶丹赵力张哲吴芳李红
- 关键词:心率变异2型糖尿病
- 2型糖尿病患者周围神经病变与心率变异关系探讨
- 目的:2型糖尿病周围神经病变是其常见的慢性并发症之一,累及70%-90%糖尿病患者。心率变异(HRV)是一项无创、定量评价糖尿病自主神经病变的方法,通过对2型糖尿病有或无周围神经动脉病变的患者进行心率变异分析,了解心率变...
- 叶丹赵力张哲吴芳李红
- 关键词:周围神经病变糖尿病患者心率变异
- 文献传递
- 蛋白聚糖Ⅱ重组腺病毒载体的构建及生物学功能的鉴定
- 目的:应用分子生物学的方法构建大鼠decorin重组腺病毒载体(Ad-decorin),为进一步探讨Ad-decorin在预防和治疗糖尿病肾脏纤维化过程中的作用及其机制研究提供良好的实验平台。方法:用RT-PCR技术从大...
- 吴芳李红姚航平董凤芹
- 关键词:重组腺病毒载体生物学功能
- 文献传递
- 外周血单个核细胞中醛糖还原酶mRNA水平与2型糖尿病患者视网膜病变的关系
- 2003年
- 目的 探讨外周血单个核细胞 (PBMC)中醛糖还原酶 (AR)mRNA水平与2型糖尿病患者发生视网膜病变危险性的关系。方法 运用RT-PCR技术检测54例2型糖尿病患者 (40例无视网膜病变和14例伴视网膜病变 )和35名正常对照者PBMC中ARmRNA水平。结果 2型糖尿病伴视网膜病变组PBMC中ARmRNA水平(1.07±0.94)高于正常对照组 (0.29±0.10,P<0.01)及2型糖尿病无视网膜病变组 (0.64±0.46 ,P<0.01)。糖尿病患者PBMC中ARmRNA水平与血压、血糖、血脂及病程均无显著相关。结论 PBMC中ARmRNA水平与2型糖尿病视网膜病变有密切关系。
- 吴芳丁伟李红何敏慧楼定华
- 关键词:外周血单个核细胞醛糖还原酶MRNA2型糖尿病视网膜病变
- Decorin重组腺病毒载体对高糖环境下肾组织细胞基质金属蛋白酶2和9表达的影响
- 目的在高糖条件下,肾小球系膜细胞和肾小管细胞对细胞外基质(ECM)成分合成和分解代谢的紊乱直接导致了糖尿病肾病(DN)的发生和发展。同时,越来越多的证据表明系膜自分泌的转化生长因子-β1 (TGF-β1)的活性介导了高糖...
- 董凤芹李红吴芳
- 关键词:DECORIN高糖环境基质金属蛋白酶重组腺病毒载体DCN肾组织
- 文献传递