孙恒娟
- 作品数：11 被引量：29H指数：3
- 供职机构：上海市儿童医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金上海市科学技术委员会资助项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨髓细胞固定液DNA提取与质量评价的实验研究被引量：1
- 2016年
- 目的利用骨髓染色体核型分析后剩余骨髓细胞固定液标本提取基因组DNA并评价DNA质量。方法将60例骨髓细胞固定液标本按保存时间的不同分为3组，同时另取新鲜骨髓标本（冻存于-80℃）20例，利用天根公司DNA提取试剂盒（离心柱型）提取基因组DNA，通过紫外分光光度仪检测DNA浓度与纯度、DNA凝胶电泳观察DNA条带、聚合酶链反应检测有无不同片段大小的目的基因的扩增以评价DNA质量。结果骨髓细胞固定液标本及新鲜骨髓（冻存）标本所提取的基因组DNA的A260／A280比值分别为1．93±0．03、1．92±0．04；两者纯度比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；不同保存时间（〈3年、3～5年、〉5年）的骨髓细胞固定液标本所提取DNA的A260／A280比值分别为1．94±0．03、1．91±0．03、1．93±0．04，其纯度差异无统计学意义（P〉0．05）。上述实验标本均能通过PCR反应扩增出不同片段大小的目的条带。结论利用染色体核型分析后剩余的骨髓细胞固定液标本可以提取出质量合格的基因组DNA，其可作为分子生物学相关研究的标本来源。
- 李洁孙恒娟蒋慧
- 关键词：骨髓细胞固定液基因组DNA
- 重症监护室中以胸腹水首发的儿童非霍奇金淋巴瘤流式诊断及临床特点分析被引量：3
- 2015年
- 目的评估流式细胞术行胸腹水免疫分型在儿童非霍奇金淋巴瘤（non-hodgkin’slym-phoma，NHL）诊断中的应用特点。方法2011年2月_2013年11月上海市儿童医院重症监护室（ICU）中12例诊断NHL患儿，男11例，女1例，年龄1～13岁，对病程中首发出现胸水或腹水的患儿，均应用流式进行免疫分型分析。免疫分型抗体包括CD45、CD10、CD33、CD7、CD1a、MPO、cCD3、CD79a、CD22、CD19、CD20、CD5、CD3、κ、λ、αβ、γδ和CD56等常见的T、B和NK标记，必要时加做CD30标记。结果12例伴有胸腹水的患儿最终均确诊为NHL，其病情危重，进展迅速。流式细胞术免疫分型诊断为NHL-B系6例，其中5例为腹水，1例为胸水，B系中CD20都出现高表达；诊断为NHL-T系4例，胸水3例，胸腹水混合1例，T系中αβ或γδ出现单克隆表达；另2例出现CD30的表达，确诊为间变大细胞淋巴瘤，2例均为胸水，其细胞形态学具有异质性。结论胸腹水流式细胞术免疫分型在儿童淋巴瘤辅助诊断中具有早期、快速和准确的特点，为早期化疗及抢救争取了时间，并为化疗中联合应用美罗华等靶向药物提供依据。
- 夏敏孙恒娟高原廖雪莲刘亚楠蒋慧
- 关键词：儿童非霍奇金淋巴瘤免疫表型
- 细胞遗传学技术在儿童急性白血病诊断中的应用价值被引量：1
- 2021年
- 急性白血病(acute leukemia,AL)是造血干细胞恶性克隆性疾病,为发病率占首位的小儿临床恶性血液肿瘤疾病。AL可以分为两大类:急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)和急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)。主要临床症状为贫血、出血、器官浸润和感染等,严重威胁患儿生命安全[1]。国际上一般通过MICM[综合形态学(morphology)、免疫学(immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)、分子生物学(molecule biology)]分型对初诊恶性血液病患者进行准确诊断与规范治疗,以提高患者生存率[2-4]。因此,及时、有效的诊断对于AL患儿的预后和治疗具有十分重要的意义。本研究采用常规染色体核型分析和荧光原位杂交技术对140例AL患儿进行检测,探讨联合检测对提高白血病染色体异常检出率的价值。
- 孙恒娟杜成坎蒋慧邵静波李红张泓
- 关键词：急性白血病荧光原位杂交儿童
- 多发畸形患儿t（3;12;15）复杂易位核型分析一例
- 2010年
- 染色体畸变是导致自然流产、死胎和畸形儿的重要病因之一[1].细胞遗传学检查发现,最常见的染色体结构变异包括缺失（deletion）、重复（duplication）、倒位（inversion）和易位（translocation）.本研究报道1例多发畸形患儿复杂易位核型分析.
- 管翌华孙恒娟任兆瑞黄英
- 关键词：复杂易位畸形患儿核型分析多发细胞遗传学检查染色体畸变
- 1489例外周血染色体核型分析
- 2000年
- 采用人体外周血液进行染色体的核型分析并发现其与先天愚型、流产、死产、原发性闭经、性腺发育异常有着密切关系。本文对各种患者的异常核型的发生基础做了一些阐述。
- 孙恒娟周琳赵巍松李勇
- 关键词：染色体异常外周血染色体核型
- 1例伴MLL-AF10幼儿急性巨核细胞白血病生物学特征分析
- 2018年
- 急性巨核细胞白血病（AMKL）是一种罕见的急性髓系白血病，常见于婴幼儿，该病具有发病急，病程短，病情凶险，复发率高等特点。因其缺乏典型的临床表现并具有复杂的生物学特征，临床误诊率较高。现将上海市儿童医院收治的l例AMKL患儿报道如下，以提高对AMKL的认识。患儿，女，l岁8个月，因“发现帆小板下降1月余”就诊。患儿起初因无明显诱因出现发热，伴咳嗽，至当地医院就诊，查血常规“白细胞（WBC）6．9×10^9／L,血红蛋白（Hb）92g／L，血小板（PLT）26×10^9／L，C反应蛋白（CRP）7．18mg／L”，遂于当地住院治疗，给予抗感染治疗后，患儿PLT上升至52×10^9／L，半月后门诊复查“PLT47×10^9／L”，外院随访PLT未见明显好转，后至上海市儿童医院就诊，查血常规“WBC3．26×10^9／L，中性粒细胞（NE）9％，淋巴细胞（LY）87％，Hb93g／L，PLT27×l0^9／L，CRP2mg／L”，遂以“PLT减少症”收治人院。
- 刘亚楠夏敏王欢孙恒娟杜成坎马旭张泓
- 关键词：白血病融合基因
- 儿童急性淋巴细胞白血病单中心分子细胞遗传学与临床特征分析被引量：8
- 2020年
- 目的分析儿童初发急性淋巴细胞白血病(ALL)分子细胞遗传学异常及其与临床特征的关系。方法以2009年1月至2018年12月上海市儿童医院血液科确诊的初发ALL患儿403例为研究对象,完善骨髓涂片细胞学、免疫分型、染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)等。结果 1.403例患儿中,男240例(59.6%),女163例(40.4%);年龄(5.31±3.46)岁;急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)374例(92.8%),急性T淋巴细胞白血病(T-ALL) 29例(7.2%)。2.细胞遗传学:染色体核型分析有分裂相者311例(77.2%),异常者126例,异常检出率40.5%,其中高超二倍体和超二倍体占15.4%(48/311例)。3.融合基因:融合基因阳性者110例(27.3%),其中TEL/AML1 70例(17.4%)、BCR/ABL 13例(3.2%)、MLL 19例(4.7%),2015年至2018年检出PBX1/TCF3 8例(4.0%),EBF1-PDGFRB 1例(0.5%),SIL/TAL1 6例,占T-ALL的33.3%(6/18例),提高了T-ALL分子异常检出率;BCR/ABL阳性患儿年龄大于MLL、TEL/AML1阳性患儿[(8.01±3.11)岁比(3.89±1.84)岁、(1.56±1.25)岁,P<0.001];PBX1/TCF3阳性患儿年龄[(6.58±4.83)岁]大于TEL/AML1、MLL阳性患儿(均P<0.05);MLL阳性患儿年龄小于TEL/AML1阳性患儿[(1.56±1.25)岁比(3.89±1.84)岁,P=0.001];MLL阳性患儿初发时的白细胞数高于TEL/AML1、BCR/ABL阳性患儿[(76.97±19.87)×109/L比(16.94±2.28)×109/L、(20.53±6.49)×109/L,P<0.05];PBX1/TCF3阳性患儿初发时的白细胞数高于TEL/AML1阳性患儿[(85.75±30.32)×109/L比(16.94±2.28)×109/L,P=0.002];MLL阳性患儿免疫分型以早前B-ALL为主(14/19例),TEL/AML1阳性、BCR/ABL阳性患儿均以普通B-ALL为主(57/70例、11/15例)。4.染色体核型分析、FISH、PCR3种方法对初发ALL患儿分子遗传学异常检出率分别为40.5%(126/403例)、69.2%(279/403例)、29.7%(60/202例),差异有统计学意义(P<0.001);染色体核型分析与PCR异常检测率差异无统计学意义(P=0.71)。5.不同性别及年龄组分子细胞遗传学异常检出率差异均无统计学意义(P=0.651、0.721),而初发时的白细�
- 刘青蒋慧李红邵静波陈凯夏敏孙恒娟王真张娜朱嘉莳
- 关键词：急性淋巴细胞白血病分子细胞遗传学儿童
- 使用经固定细胞的DNA检测Prader-Willi综合征被引量：1
- 2017年
- 目的探讨以外周血染色体检查或荧光原位杂交(FISH)检查剩余的固定细胞作为DNA来源,采用甲基化特异性(MS)聚合酶链反应(PCR)与甲基化特异性多重连接探针扩增(MS-MLPA)方法进行Prader-Willi综合征(PWS)分子检测的可行性,为采用少量全血液样本同时开展染色体、FISH和分子检测奠定基础。方法将13例受试样本分为正常对照组(3例)、确诊组(2例)和疑似组(8例)3个组。将所有的冻存固定细胞进行离心,弃固定液,采用基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取,13例PWS样本同时采用MS-PCR与MS-MLPA进行检测。结果 13例DNA样本的A260/A280比值平均为1.94±0.1、浓度平均为(64.0±10)ng/μL、片段大小均在10 kb以上;MS-PCR检测发现正常对照组父源与母源条带均存在,确诊组仅存在母源条带、父源条带缺失,疑似组父源与母源条带均存在;MS-MLPA结果表明除确诊组2例提示为父源缺失型PWS外,其余2个组结果都提示为正常。结论来源于固定细胞的基因组DNA在纯度、浓度及完整性方面均可满足MS-PCR以及MS-MLPA检测的实验要求,可用于PWS临床分子检测及其相关实验。
- 杜成坎孙恒娟兰小平杨永臣孙嘉鹏许无恨张泓
- 关键词：PRADER-WILLI综合征DNA提取甲基化特异性聚合酶链反应
- 47，XY，t（2；21）（q21；q22．3），＋21一例
- 2012年
- 患儿男，5个月。因感冒检查发现心脏杂音人院。入院心脏超声检查示先天性心脏病：动脉导管未闭、卵圆孔未闭、有室肥大、轻度肺高压。同时发现患儿眼裂小、眼角外侧上翘、眼间距宽等特殊面容。细胞遗传学检查：取外周血常规淋巴细胞培养、制片、G显带。
- 孙恒娟包黎明陈柏松杜成坎
- 关键词：心脏超声检查细胞遗传学检查淋巴细胞培养肺高压
- 儿童急性淋巴细胞白血病细胞遗传学特征分析被引量：11
- 2012年
- 目的分析儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞遗传学变化的特点。方法以2009年1月至2011年11月确诊的90例初发ALL患儿为研究对象，采用染色体核型分析及荧光原位杂交（FISH）技术检测患者骨髓白血病细胞的细胞遗传学和分子生物学变化。结果①染色体核型分析：有分裂象者66例，其中异常者35例（53．0％）；无分裂象者24例。@FISH检测：对31例染色体核型正常和24例无分裂象的患者进行FISH检测，异常者分别为7例（占22．6％）和14例（58．3％），其中无分裂象患者异常检出率与有分裂象者核型分析异常检出率差异无统计学意义（P=0．655）；55例患儿中TEL—AML1融合基因阳性16例（29．1％），MLL重排3例（5．5％），bcr-abl融合基因阳性2例（3．6％）。（3）90例患儿通过两种检则方法共检出细胞遗传学异常56例（占62．2％）。结论儿童ALL易出现细胞遗传学改变；对于有足够分裂象的患者，常规染色体核型分析仍是可靠的方法，对分裂象质量低或无分裂象的儿童ALL患者，FISH检测异常克隆能提高细胞遗传学异常检出率。
- 刘青蒋慧孙恒娟宋以菊包黎明
- 关键词：荧光原位杂交染色体核型分析白血病儿童
