徐远玲
- 作品数:3 被引量:6H指数:1
- 供职机构:郑州大学生物工程系更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 腺病毒载体左侧ITR区对下游基因表达特异性的影响
- 恶性肿瘤是当今社会威胁人类健康的主要疾病,肿瘤基因治疗的迅速发展为攻克这类严重威胁人类生命健康的疾病带来新的希望。基因转运系统是基因治疗过程中的关键环节,在肿瘤的基因治疗研究中,腺病毒载体目前应用最多的一种病毒载体。研究...
- 徐远玲
- 关键词:腺病毒绿色荧光蛋白基因治疗
- 腺病毒载体左侧反向末端重复区对下游基因表达特异性的影响
- 2011年
- 目的:研究腺病毒载体左侧反向末端重复区(ITR)对下游基因表达特异性的影响。方法:采用分子生物学方法及Gateway技术构建正反2个方向含有人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子及GFP报告基因的重组腺病毒载体。以含CMV启动子及GFP报告基因的重组腺病毒载体和不含任何启动子只含GFP报告基因的重组腺病毒载体作对照。重组腺病毒质粒经PacⅠ线性化后用脂质体转染法转染293A细胞,包装并扩增出重组腺病毒颗粒,TCID50测得滴度后分别以相同的感染复数感染4种肿瘤细胞,观察荧光表达情况。结果:携带正向和反向hTERT启动子的重组腺病毒载体在各细胞中荧光表达量无差异,无启动子的重组载体在腺病毒增殖比较强的细胞中有微弱荧光表达。结论:重组腺病毒左侧ITR能够影响上下游特异启动子及其调控基因表达,但对上下游基因的影响程度无明显差异,并且左侧ITR具有类启动子功能。
- 徐远玲张旭东马宏宝
- 关键词:腺病毒绿色荧光蛋白
- 红豆杉细胞蛋白质双向电泳样品制备方法的比较被引量:6
- 2009年
- [目的]探索适用于红豆杉愈伤蛋白质组学研究的样品制备方法。[方法]以红豆杉愈伤组织为材料,分别采用三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、Tris-HCl法和酚-甲醇/醋酸铵沉淀法提取其中的总蛋白,通过双向电泳(2DE)检测3种方法对总蛋白的提取效果。[结果]3种方法提取的蛋白样品2DE图谱显示的蛋白点数量均较多。TCA/丙酮沉淀法对蛋白质的提取率较高,2DE图像清晰,条纹少,拖带现象轻;Tris-HCl法提取的蛋白样品2DE图谱个别区域出现较轻的云片状聚集,并有轻微拖带现象;酚-甲醇/醋酸铵沉淀法提取蛋白样品的2DE图谱有条纹和拖带现象。[结论]TCA/丙酮沉淀法提取的蛋白质质量较高,所得图谱背景清晰,蛋白质信息量大。
- 任建升臧新赵丹丹徐远玲
- 关键词:红豆杉蛋白质组双向电泳