朱洪伟
- 作品数：13 被引量：42H指数：5
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡李氏杆菌的分离鉴定被引量：1
- 2007年
- 朱洪伟崔莉卢杰孙秀军曹倩倩谭磊刘宇朱战波
- 关键词：细菌分离鉴定李氏杆菌蛋鸡传染性疾病神经症状
- 奶牛乳房炎链球菌亚单位疫苗GapC蛋白及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种奶牛乳房炎链球菌亚单位疫苗GapC蛋白及其制备方法和应用，所述GapC蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明利用牛源链球菌GapC蛋白制备的亚单位疫苗对奶牛乳房炎常见的三种链球菌都具有交叉保...
- 朱战波崔玉东车车张军于立权周玉龙柳强朱洪伟王鹤杨玉英
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌重组GapC蛋白的GAPDH活性及免疫原性分析被引量：9
- 2008年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)表面GapC蛋白的GAPDH活性、免疫原性及免疫保护作用,应用PCR方法扩增出S.aureus的gapC基因,插入到pQE-30载体相应位点,构建重组质粒pQE/gapC。将其导入宿主菌E.coliM15(pREP4)后,IPTG诱导表达。重组蛋白纯化后进行GAPDH活性检测,并与灭活全菌体分别免疫健康家兔。然后,应用ELISA方法检测血清中IgG抗体水平及IFN-γ、IL-4细胞因子浓度,并用1.0×108CFU/mLS.aureus菌株Wood46对免疫家兔攻毒。SDS-PAGE结果显示,GapC蛋白在E.coliM15(pREP4)中获得表达;经GAPDH活性检测及WesternBlot检测,重组蛋白具有较高的GAPDH活性和抗原特异性;经ELISA检测,GapC蛋白及全菌体组兔血清中IgG抗体水平迅速升高,并在加强免疫后第28天达到最高(1:64000),加强免疫后第14d,血清中细胞因子IFN-γ和IL-4浓度与对照组相比,显著升高(P<0.05),而全菌体免疫组升高不明显(P>0.05);攻毒结果为蛋白免疫组家兔获得一定的免疫保护(4/5)。以上结果表明,表达的重组GapC蛋白具有GAPDH活性、较好的免疫原性及免疫保护力,可作为深入研究S.aureus基因工程疫苗的良好靶向。
- 朱洪伟朱战波崔玉东张晶刘乐锋朴范泽
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫原性免疫保护
- 金黄色葡萄球菌GapC基因的克隆和表达被引量：4
- 2008年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)GapC蛋白,应用PCR方法扩增出S.aureus菌株BMSA/855/23-1的gapC基因,随后将其克隆到pMD18-T载体上。重组克隆pMD-T/gapC经测序后,与GenBank上已发表的序列进行对比分析。然后,将gapC基因插入到pQE-30质粒,构建重组质粒pQE30/gapC。重组质粒转化大肠杆菌E.coli M15(pREP4),IPTG诱导后,SDS-PAGE鉴定GapC融合蛋白的表达。结果表明成功扩增并克隆了S.aureus gapC,该菌株的gapC基因与GenBank上S.aureus BM10株的核苷酸序列一致性为99.3%,推导氨基酸序列一致性为99.4%。SDS-PAGE结果表明,GapC蛋白在E.coli M15(pREP4)中获得表达。
- 张晶朱洪伟崔玉东
- 关键词：金黄色葡萄球菌克隆
- 金黄色葡萄球菌isdB基因克隆、表达及其抗原性鉴定被引量：1
- 2011年
- 为了构建含牛源金黄色葡萄球菌isdB基因的原核表达载体,并确定其在大肠杆菌表达系统中的表达效果,应用PCR方法扩增出isdB基因片段与原核表达载体pQE-30,构建了重组原核表达载体pQE-30-isdB,将该重组载体转化至E.coliXL1-Blue中诱导表达蛋白。经SDS-PAGE和Western blot鉴定,PCR扩增出约1 938 bp的基因片段,测序结果与GenBank上发表的MW2株核苷酸和氨基酸序列的一致性均为98.6%;成功表达出约72 ku的蛋白,与IsdB蛋白的相对分子质量大小一致;Western blot分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。本次试验成功构建了IsdB蛋白的原核表达系统。
- 崔莉朱战波朱洪伟崔玉东朴范泽
- 关键词：金黄色葡萄球菌ISDB原核表达
- 仙台病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达被引量：5
- 2006年
- 目的利用原核表达系统表达仙台病毒(Sendai Virus,SV)核衣壳蛋白。方法根据GenBank上发表的仙台病毒(Sendai Virus,SV)核衣壳蛋白基因序列,设计并合成一对引物,通过RT-PCR扩增出核衣壳蛋白全长cDNA序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS,于37℃1mmol/LIPTG条件下诱导表达,大肠杆菌裂解物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约60×103处出现一新蛋白带,与预期目的蛋白分子量相符。结果Western blot检测表明,表达产物能与兔抗SV阳性血清发生特异性反应,出现单一反应带,表明其具有免疫原性。结论为建立以重组NP蛋白为诊断抗原检测SV奠定基础。
- 姜骞刘怀然张龄朱洪伟曲连东
- 关键词：仙台病毒基因克隆基因表达
- 流产布氏杆菌的检测及生物型PCR鉴定被引量：11
- 2008年
- 目的确定近年来黑龙江省部分牛场频繁发生奶牛流产的病因。方法对发病的4个牛场进行流行病学调查,从流产胎牛真胃内容物中分离布氏杆菌;根据布氏杆菌不同种IS711设计用于鉴别流产布氏杆菌(B.abortus)、猪布氏杆菌(B.suis)和羊布氏杆菌(B.ovis)的4条引物,应用PCR方法进行生物型鉴定。结果从流产胎牛真胃内容物中分离出6株布氏杆菌,经PCR可扩增,产物大小为498bp。鉴定为流产布氏杆菌。结论引起奶牛流产的主要病原为牛流产布氏杆菌。
- 朱战波周玉龙朱洪伟王海波崔玉东朴范泽
- 关键词：奶牛PCR生物型
- 金黄色葡萄球菌GapC蛋白的表达与免疫原性研究
- 金黄色葡萄球菌/(Staphylococcus.aureus, S. aureus/)是引起人和动物多种疾病的重要致病菌。由于不同S. aureus菌株间缺乏共同的保护性抗原,目前研究的S. aureus疫苗在临床试验中...
- 朱洪伟
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫
- 文献传递
- 葡萄球菌毒力调控中的群体感应系统被引量：5
- 2007年
- 葡萄球菌细胞密度依赖性的多基因表达调控(群体感应)系统,是通过自身诱导与信号转导途径使其感知环境信息,调节多种毒力因子的表达。这些毒力因子的表达受agr、sae以及arl等多种基因表达系统的紧密调控,同时也受Sar家族蛋白的调节。此外,葡萄球菌毒力及抗性密切相关的生物膜形成与发育,也受群体感应系统的影响。对群体感应系统的自身诱导作用的干扰,原则上可成为寻找新型抗菌药物较适合的途径。
- 朱洪伟朱战波崔玉东
- 关键词：葡萄球菌毒力因子
- 奶牛隐性乳房炎诊断与防制技术的研究
- 崔玉东朱战波朴范泽侯喜林贾永全周永平刘兆民王龙祥潘兴广倪宏波杨焕民闻晓波孙冰王志强卢杰李冬野任宪刚周玉龙朱洪伟陈洪亮任宝国辛凤艳江振德樊兆乔张春杰徐春阳刘增清杨宏彬谢凤岩李长志马文龙曲练达戴金玲李春龙李娜
- 该课题为奶牛隐性乳房炎诊断与防制技术的研究。在国内首次建立了针对奶牛乳房炎四种主要病原菌的快速、特异、敏感的单重PCR和多重PCR检测和鉴定技术；对黑龙江省不同区域隐性乳房炎的发病情况进行系统调查，确定了其发病规律；根据...
- 关键词：
- 关键词：奶牛乳房炎
