李志加
- 作品数:7 被引量:4H指数:2
- 供职机构:承德医学院附属医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肾上腺髓质素在黑素瘤中的表达和作用
- 恶性黑色素瘤是所有恶性肿瘤中发病率增长最快的肿瘤之一,近年来受到广泛重视,其临床研究也进展迅速。黑素瘤的恶性程度高、易复发和转移,预后较差,研究显示肿瘤厚度>3mm的患者5年存活率不足60%,发生远处转移后其平均生存期仅...
- 李志加
- 关键词:黑素瘤实时荧光定量PCR肾上腺髓质素基因干扰流式细胞术侵袭力
- 文献传递
- siRAN沉默肾上腺髓质素基因对黑素瘤细胞凋亡的影响
- 目的为了研究肾上腺髓质素(adrenomedullin ADM)在黑素瘤发生、发展中的作用。方法采用人黑素瘤细胞株A375,利用人工合成的ADM靶向小分子干扰RNA(small interference RAN,siRN...
- 段昕所李志加孙立新陆洁
- 文献传递
- siRNA沉默肾上腺髓质素基因对黑素瘤细胞周期和侵袭力影响
- 段昕所李志加陆洁孙立新
- siRNA沉默肾上腺髓质素基因对黑素瘤细胞增殖和凋亡的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默。肾上腺髓质素(ADM)基因对黑素瘤细胞系A375增殖和凋亡的影响。方法实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)检测干扰效果,并选出干扰效果最好的siRNA。用筛选出的最有效siRNA转染A375细胞为实验组;转染非特异序列的细胞为阴性对照组,未转染的细胞为空白对照组。免疫细胞化学法蛋白水平检测干扰效果;噻唑蓝法(M1Tr)分iiJJN定沉默ADM基因24、48h后A375细胞增殖的变化;流式细胞仪(FCM)检测干扰ADM基因48h后A375细胞的凋亡情况。结果qRT-PCR显示ADM-siRNA-2干扰效果最好。免疫细胞化学结果显示转染ADM-siRNA-2后ADM蛋白的表达显著低于未转染组和阴性对照组。MTr结果显示,转染ADM-siRNA-2的细胞24、48h吸光度A值为0.389±O.0375,0.469±0.0330,低于空白对照组(0.574±0.0733、0.685±0.0154)和阴性对照组(0.548±0.0376、0.676±0.0374),差异均有统计学意义(P值均〈0.05),空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P值均〉0.05)。FCM检测显示转染ADM-siRNA-2组的细胞早期凋亡率为(20.200±6.046)%,高于空白对照组(1.667±0.340)%和阴性对照组(4.587±1.294)%,差异有统计学意义(P值均〈0.05),空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P值均〉0.05)。结论siRNA沉默ADM基因对A375增殖有抑制作用;而对凋亡则有明显促进作用。
- 李志加孙立新陆洁段昕所
- 关键词:小分子干扰肾上腺髓质素黑色素瘤细胞系
- siRNA沉默肾上腺髓质素基因对A375黑素瘤细胞周期的影响被引量:2
- 2013年
- 目的研究小干扰RNA(siRNA)沉默A375黑素瘤细胞肾上腺髓质素(ADM)基因对其细胞周期的影响。方法利用人工合成的ADM靶向小分子干扰RNA转染A375细胞,采用实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)筛选出有效的siRNA,用选出的干扰效果最好的siRNA转染的A375细胞为实验组;转染非特异序列的细胞为阴性对照组;未转染的细胞为空白对照组。流式细胞仪(FCM)检测干扰ADM基因48 h后A375细胞周期的情况。结果 FCM结果显示,siRNA干扰组G2/M期细胞比率为(11.360±1.224)%,明显高于未转染组的(1.020±0.990)%和非特异序列转染组的(4.150±1.032)%,差异有统计学意义(P<0.05);未转染组与非特异序列转染组差异无统计学意义(P>0.05)。而siRNA干扰组G1/G0、S期细胞比率分别为(69.443±2.023)%、(19.197±0.890)%,与未转染组(68.567±3.653)%、(30.417±4.582)%和非特异序列转染组(70.530±3.008)%、(23.313±4.645)%比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论 ADM能够将黑素瘤细胞阻滞在G2/M期,抑制细胞增殖。
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- 关键词:黑素瘤细胞周期小分子干扰肾上腺髓质素
- siRNA沉默肾上腺髓质素基因对黑素瘤细胞周期和侵袭力影响
- 目的:研究小干扰RNA(siRNA)沉默肾上腺髓质素(ADM)基因对黑素瘤细胞系A375细胞周期和体外侵袭力的影响。方法:利用人工合成的ADM靶向小分子干扰RNA转染A375细胞,采用实时荧光定量-PCR(qRT-PCR...
- 段昕所李志加陆洁孙立新
- 文献传递
- 肾上腺髓质素在黑素瘤中的表达被引量:2
- 2012年
- 目的:检测肾上腺髓质素(adrenomedulin,ADM)在人黑素瘤中的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测ADM在15例黑素瘤、30例色素痣组织标本及人成纤维细胞、黑素瘤细胞系A375中的表达。结果:人成纤维细胞中ADM的表达为弱阳性、A375中ADM表达呈强阳性。黑素瘤组织标本中80%检测到ADM,色素痣组织标本中仅有43.3%检测到ADM的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肾上腺髓质素在人黑素瘤组织中高表达,在人的色素痣和成纤维细胞中低表达,提示ADM与黑素瘤发生、发展可能密切相关。
- 李志加孙立新陆洁段昕所
- 关键词:黑素瘤色素痣肾上腺髓质素成纤维细胞免疫组织化学