李楚芳
- 作品数：20 被引量：110H指数：6
- 供职机构：中国科学院广州生物医药与健康研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- hPLIC-2可溶性表达及多克隆抗体的制备被引量：3
- 2004年
- 利用多聚酶联反应(PCR)扩增获得人hPLIC-2基因,并将该基因克隆到原核表达载体pGEX-2T上。转化大肠杆菌JM109,在27℃经IPTG诱导后,GST-hPLIC-2融合蛋白获得高效可溶性表达,并通过GlutathioneSephorase4B获得纯化。使用结合有GST-hPLIC-2的GlutathioneSephorase4B凝胶珠免疫大白兔制备了兔抗hPLIC-2多克隆抗体,抗体滴度大于1∶16000。该抗体制备为研究hPLIC-2的功能提供了有用的工具。
- 李楚芳刘萱李平马清钧曹诚军
- 关键词：多克隆抗体可溶性表达多聚酶大白兔抗体滴度IPTG
- 高温对小鼠胸腺细胞亚群及其热休克蛋白70表达的影响被引量：2
- 2002年
- 目的 研究高温对小鼠胸腺细胞亚群及其热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的影响 ,探讨热锻炼诱导小鼠胸腺热耐受形成的机制。方法 BALB/c小鼠每天 41℃高温处理 1h ,连续 9d ,于第 1、3、5、7、9天高温后 4h取胸腺细胞 ,用流式细胞术检测胸腺细胞亚群及HSP70表达阳性率。结果 高温使小鼠胸腺重量明显减轻 ,第 1、3天胸腺细胞CD4+CD8+亚群明显减少 ,第 5天后CD4+CD8+亚群比例开始恢复。除第 9天外 ,高温组胸腺细胞HSP70的表达均高于对照组。结论 CD4+CD8+胸腺细胞亚群减少可能是高温致小鼠胸腺萎缩的主要原因 ,而HSP70表达升高是热耐受形成的分子基础之一 。
- 蒋定文郭明秋李楚芳陈立茵沈先荣
- 关键词：高温热耐受热休克
- c-Abl蛋白酪氨酸激酶形成同源二聚体(英文)被引量：1
- 2005年
- cAbl是非受体酪氨酸激酶,它在细胞内被一些基因毒性的、氧化的及其它形式的压力所激活。目前研究证明:应用标记的cAbl发现其在细胞内可以相互形成同源二聚体,并且一分子cAbl的N末端区域与相应的另一分子的C末端相互作用形成二聚体。实验进一步表明:cAblSH3结构域结合到另一cAbl分子富含脯氨酸的C末端约958982氨基酸区域。如果去除cAbl富含脯氨酸的结构域,就会阻止二聚体的形成。这些结果首先证实了cAbl在细胞内可以相互形成同源二聚体,并暗示着二聚体的形成可能影响着cAbl活性的调节。
- 魏玲刘萱易艳萍李楚芳王云龙曹诚
- 关键词：C-ABL相互作用同源二聚体
- 高温对小鼠胸腺和脾脏T细胞亚群的影响被引量：8
- 2001年
- 目的 研究高温对小鼠胸腺和脾T细胞亚群变化的影响 ,探讨高温诱导小鼠免疫器官损伤及热耐受形成的机理。方法 BALB/c小鼠每天 41℃高温处理 1小时 ,连续应激 9天 ,每间隔 1天于高温处理后 4h取胸腺和脾脏 ,称重后制成单细胞悬液 ,用流式细胞术检测CD4CD8细胞亚群。结果 高温的第 3天开始小鼠胸腺重量明显减轻 ,脾脏重量在第 3、第 5天明显减轻。胸腺CD4+ CD8+ 亚群比例第 1、3天明显减少 ,第 5天后开始恢复 ,胸腺细胞CD4+ :CD8+ 比值第 1天明显增高 ,之后迅速下降 ,第 7天下降到最低 ,第 9天开始恢复。脾细胞CD4+ :CD8+ 比值第 1天也增高 ,第 3天下降到最低值 ,此后开始恢复。结论 高温使小鼠胸腺和脾细胞均受到损伤 ,未成熟的CD4+ CD8+ 胸腺细胞亚群减少是高温处理后小鼠胸腺萎缩的主要原因 ,高温处理后期小鼠胸腺和脾T细胞亚群比例恢复可能提示热耐受的形成。
- 蒋定文郭明秋李楚芳陈立茵
- 关键词：高温胸腺T细胞亚群热耐受动物实验
- IL-18与IL-l相似的信号转导途径被引量：5
- 2000年
- IL 18与IL 1是结构极为相似的前炎症细胞团子 (Pro inflammatoryCytokine) ,两者具有相似的信号转导途径。IL 1受体相关蛋白 (IL IRrP)是IL 1受体家族中的一员 ,也是IL 18重要的受体之一。IL 18与IL 1有着极为相似的NF κB信号转导途径 ,在激活NF κB过程中都需要IRAK TRAF6途径和MyD88蛋白的参与。另外 ,MAPK途径也参与了IL 1和IL 18介导的信号转导。认为IL 18与IL 1家族相关 ,IL 18可能是IL 1家族中的一员。
- 蒋定文李楚芳
- 关键词：IL-18IL-1NF-ΚBMAPK信号转导途径
- H1启动子siRNA载体的构建及应用被引量：4
- 2004年
- 利用双链RNA(dsRNA)调控基因表达已经成为研究基因功能的有力工具。用人H1启动子构建了pBS/H1PS小干扰RNA(siRNA)表达载体,用于在哺乳动物细胞中产生特异性dsRNA转录产物。通过对293细胞中的PSMA7分子进行表达抑制,证明该siRNA载体能够有效产生针对靶基因的RNA干扰(RNAi)效应。
- 刘萱李楚芳李平曹诚军
- 关键词：小干扰RNA293细胞PSMA靶基因双链RNA哺乳动物细胞
- 热应激诱导的胸腺细胞凋亡及相关分子表达被引量：13
- 2001年
- 目的 :探讨体外热应激诱导胸腺细胞凋亡与细胞表达Fas、Fas L及HSP70的关系。方法 :用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas L和HSP70表达阳性率。结果 :体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas L表达阳性率均呈时间依赖性增高 ,体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas L的表达与凋亡明显相关。体外热应激后 ,HSP70表达明显增高 ,在 6h达到高峰 ,此后缓慢下降。结论 :HPS70是热应激胸腺细胞损伤的标志 ,Fas与Fas
- 蒋定文郭明秋陈立茵李楚芳卢晓
- 关键词：胸腺细胞热应激FAS-LHSP70细胞凋亡
- IL-18信号转导途径研究进展被引量：2
- 2000年
- 白细胞介素18(IL-18)是新近发现的细胞因子,其独特的少TATA型启动子、特殊的mRNA结构及其前体蛋白需IL-1β转化酶(ICE)加工成熟的特点,使得IL-18基因可广泛表达于多种类型的细胞。IL-18与IL-18受体结合组成受体复合物,受体复合物信号通过IRAK-TRAF6途径激活NF-кB,及通过酪氨酸蛋白激酶(PTK)的LCK-MAPK信号途径诱导TH1细胞产生IFN-γ、IL-2等细胞因子。IL-18通过AP-1位点调节IFN-γ启动子活性,而IL-12则需要通过STAT4和AP-1两个位点共同调节IFN-γ启动子的活性。
- 蒋定文李楚芳
- 关键词：IL-18信号转导基因表达启动子
- SARS病毒核衣壳蛋白、膜蛋白在大肠杆菌中的高效表达和纯化被引量：22
- 2003年
- 通过反转录 PCR获得了SARS冠状病毒核衣壳蛋白 (N)和膜蛋白 (M)基因 ,其序列分析结果与加拿大多伦多株完全一致。将M基因和N基因克隆到大肠杆菌表达载体pET2 2b和pBV2 2 2上 ,并在大肠杆菌中以包涵体及可溶形式获得高效表达。通过离子交换、金属螯合层析纯化获得电泳纯制品。所获得的核衣壳蛋白具有良好的抗原性 。
- 易艳萍李楚芳石玉岭李林海李平黄维王升启马清钧曹诚
- 关键词：SARS病毒核衣壳蛋白膜蛋白大肠杆菌纯化
- 胸腺五肽研究进展被引量：32
- 1999年
- 胸腺五肽(TP5)是人工合成的五肽,其氨基酸顺序和结构与胸腺生成素(TP)的32-36位氨基酸组成相同,是TP重要的功能活性部分,具有与TP相似的生物活性.TP5能促进胸腺和外周T细胞的分化和发育,对机体的免疫功能具有双向调节作用,能使过高或过低的免疫反应趋向正常.动物实验和临床研究证明TP5对免疫功能低下和自身免疫病患者的免疫功能具有重要的调节作用.
- 蒋定文李楚芳
- 关键词：胸腺五肽胸腺生成素生物学作用
