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李灵芝: 作品数：291 被引量：1,426H指数：19; 供职机构：武警后勤学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生理学文化科学生物学更多>>

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多样化教学方法提高卫生士官常用药物课程教学效果: 2015年; 目的提高基层部队卫生士官常用药物课程授课质量。方法根据章节内容特点,采用案例式、讨论式、问题导入式、比较式、论坛交流式等教学方法。结果多样化教学方法活跃了课堂气氛,提高了学员学习兴趣,突出了学习重点,有助于培养学员自主学习能力,取得了良好教学效果。结论在常用药物课程教学中,对不同授课内容采用不同教学方法效果良好,可为其他培训课程提供借鉴。; 李灵芝张丽崔颖李建宇顾军; 关键词：教学方法卫生士官

有限稀释病人PBMCs共培养法分离培养HIV-1 CRF07_BC生物性克隆病毒被引量：1: 2012年; 目的通过有限稀释艾滋病病毒(HIV)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)与正常供体PBMCs共培养,分离培养HIV-1生物性克隆毒株。方法选择6位新疆HIV-1CRF07_BC感染者,分离病人PBMCs,以不同浓度的病人PBMCs细胞数梯度(推荐浓度分别为5×103、2×104、4×104/孔)与健康供体的1×105PBMCs共培养,每个浓度设置32个复孔,每周检测HIV p24抗原。当某一浓度的复孔中p24阳性率低于33%时,可认为在这些阳性孔中的病毒是起源于同一个感染细胞。同时进行env区V1-V5基因扩增、测序和分析。结果经过有限稀释法共培养后,样本XJZK007在1×104细胞/孔的浓度下,各复孔HIV-1p24阳性率为31.3%;样本CBJB539在4×104细胞/孔的浓度下,得到9.4%分离阳性率;样本CBJB540在2×104细胞/孔的浓度下,得到25%分离阳性率;样本CBJB541在2×104细胞/孔的浓度下,得到12.5%分离阳性率;样本CBJB543在1×104细胞/孔的浓度下,得到21.9%分离阳性率;样本CBJB544在2×104细胞/孔的浓度下,得到25%分离阳性率。同一样本分离的不同生物克隆表现出不同的生物表型。对样本XJZK007分离得到的12株生物克隆的序列分析显示,各序列相互之间存在氨基酸的变异、插入及缺失,从而验证了生物性克隆方法的正确性与可行性。结论有限稀释病人PBMCs共培养方法,以常规分离方法十分之一的细胞数即可分离得到个体内多样性的病毒,即生物克隆病毒。; 刘玉磊刘铁军徐维四黄洋欧阳雅博李臻鹏李灵芝马丽英

树突状细胞和肿瘤免疫的研究进展: 2005年; 倪宁王丽红李灵芝; 关键词：树突状细胞肿瘤免疫疗法

四环素-哌嗪雌酚酮对小鼠骺板Ⅰ型胶原表达的影响被引量：2: 2003年; 目的　研究四环素 -哌嗪雌酚酮 (XW6 30 )对胚胎小鼠骺板型胶原的表达的影响。方法　采用胚胎小鼠体外培养模型 ,通过免疫组织化学手段 ,观察 XW6 30对型胶原蛋白表达水平的影响。结果　当培养基中XW6 30浓度为 10 - 7m ol/L和 10 - 8mol/L时 ,各区型胶原蛋白免疫组织化学染色阳性细胞面积与对照组相比均显著增加 ;与同浓度的雌酚酮组相比 ,10 - 7mol/L XW6 30组增殖区和肥大区阳性细胞面积增加。当浓度降至 10 - 9mol/L时 ,只有肥大区阳性细胞面积增加。随浓度升高 ,各区阳性细胞面积呈增加趋势。结论　在体外培养条件下 ,XW6 30剂量依赖地上调小鼠骺板静止区、增殖区和肥大区型胶原蛋白的表达水平。; 李灵芝翁玲玲张永亮楼荣良郑虎; 关键词：骺板 I型胶原免疫组织化学

HPLC-荧光法测定青海产蕨麻根中α-生育酚的含量被引量：1: 2017年; 【目的】测定青海产的高海拔植物蕨麻根中α-生育酚的含量。【方法】样品经KOH皂化后,采用正己烷和乙酸乙酯混合溶剂提取,以甲醇-乙腈(30:70,v/v)为流动相,经HPLC-荧光法测定α-生育酚含量。【结果】α-生育酚在1~16μg/ml质量浓度范围内呈良好的线性关系,日内相对标准偏差为1.18%~1.45%,日间相对标准偏差为1.40%~1.87%,日内重现性RSD为2.71%,日间重现性RSD为3.84%,方法回收率为90.08%~92.25%。青海产蕨麻中α-生育酚含量为81.25~84.47μg/g。【结论】建立的HPLC-荧光分析方法测定蕨麻根中α-生育酚的含量,方法灵敏、准确,提取效率高。; 李鹏飞谢龙崔颖李灵芝; 关键词：Α-生育酚皂化高效液相色谱法

葛根素对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响被引量：11: 2005年; 目的:研究葛根素对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响。方法:UMR106细胞培养于-αMEM培养基中,葛根素处理后光学显微镜下观察其形态学变化,绘制细胞生长曲线,并采用对硝基苯磷酸钠基质动力学法测定UMR106细胞内、外碱性磷酸酶活性。结果:UMR106细胞经葛根素和10-8mol.L-1雌二醇处理后d1,d2和d3,与空白对照组相比,增殖速度均加快,d2差异最显著。与对照组相比,10-8,10-7,10-6mol.L-1葛根素组的增殖率分别为9.3%,23.3%和40.9%,10-8mol.L-1雌二醇组增殖率为49.7%。与对照组相比,细胞经10-6mol.L-1葛根素处理后1 d和2 d时,细胞内ALP活性显著增加(P<0.01);细胞经10-6mol.L-1葛根素处理1 d后,细胞外ALP活性显著增加(P<0.05)。结论:葛根素可以促进成骨样细胞UMR106细胞合成和分泌ALP,提示其具有促进成骨细胞增殖和分化的作用。; 李灵芝刘启兵张永亮崔颖龚海英; 关键词：葛根素碱性磷酸酶

蕨麻多糖对缺氧损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制被引量：6: 2017年; 目的探讨蕨麻多糖对缺氧损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及机制。方法将培养好的人脐静脉内皮细胞株EA.hy926随机分为常氧对照组、缺氧模型组、复方丹参对照组及蕨麻多糖高、中、低浓度组,除常氧对照组外,其余5组构建缺氧损伤模型,同时复方丹参对照组加复方丹参片提取物(终浓度0.1 mg/m L),蕨麻多糖高、中、低浓度组加终浓度分别为0.1、0.05、0.025 mg/m L的蕨麻多糖,均培养2 h。采用MTT法检测细胞活力,采用台盼蓝染色法测算细胞存活率,光学显微镜下观察细胞形态变化,用比色法测定细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)水平,ELISA法测定培养基中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、内皮素1(ET-1)水平,比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,RT-PCR技术测定细胞内i NOS、e NOS mRNA表达。结果蕨麻多糖各浓度组、复方丹参组与缺氧模型组比较细胞形态均有不同程度改善。与缺氧模型组比较,蕨麻多糖各浓度组、复方丹参组细胞活力及存活率升高,细胞LDH外漏量下降,i NOS和ET-1水平降低,e NOS和NO水平升高,SOD水平升高,MDA水平降低,细胞e NOS mRNA表达升高,i NOS mRNA表达降低(P均<0.05)。结论蕨麻多糖可能通过提高缺氧损伤EA.hy926细胞的抗氧化活性、调控ET-1与NO的动态平衡发挥保护作用。; 葛肖健张永亮师超峰徐葳李建宇李灵芝; 关键词：缺氧损伤脐静脉内皮细胞一氧化氮内皮素

白细胞介素6诱导卵巢上皮性癌细胞对化疗药物产生耐药的机制研究被引量：9: 2010年; 目的探讨白细胞介素6（IL-6）诱导卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞对化疗药物产生耐药的机制及相关信号传导通路.方法应用外源性重组IL-6短期处理或将正义IL-6基因（ssIL-6）稳定转染至A2780细胞（不表达IL-6但表达其受体、对顺铂和紫杉醇敏感）,同时将反义IL-6基因（asIL-6）稳定转染至SKOV3细胞（高表达IL-6及其受体、对顺铂和紫杉醇耐药）,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、逆转录PCR（RT-PCR）技术及蛋白印迹法（western blot）观察IL-6是否影响卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,并对可能的信号传导通路进行研究.结果（1）外源性重组IL-6处理A2780细胞后,对顺铂和紫杉醇的耐药倍数分别为6.25和7.31倍;ssIL-6转染A2780细胞后（内源性过表达IL-6）,IL-6低、中、高表达细胞对顺铂的耐药倍数分别为7.13、7.47和8.34倍,对紫杉醇的耐药倍数分别为7.61、8.27和10.70倍;而asIL-6转染SKOV3细胞后（抑制内源性IL-6表达）,IL-6中、高抑制表达细胞对顺铂的耐药倍数分别为0.15和0.10倍,对紫杉醇的耐药倍数分别为0.10和0.08倍,可恢复SKOV3细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性.（2）外源性IL-6作用后,上调了A2780细胞中耐药相关基因MDR1和GST-π以及凋亡抑制基因bcl-2、bcl-xL和XIAP mRNA和蛋白的表达;与此相一致,ssIL-6转染的A2780细胞中MDR1、GST-π及bcl-2、bcl-xL、XIAP mRNA和蛋白的表达水平增加,而asIL-6转染的SKOV3细胞则明显降低.（3）有丝分裂原活化的蛋白激酶-细胞外信号调节激酶（MEK）抑制剂--PD98059和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂--wortmannin能分别阻断IL-6诱导的卵巢癌细胞细胞外信号调节激酶（ERK）和蛋白激酶B（Akt）的活化作用,且两者均能阻断IL-6诱导的卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生的耐药,细胞生长明显减少.结论 IL-6诱导的卵巢癌细胞化疗耐药很可能与其上调卵巢癌细胞耐药相关基因MDR1、GST-; 王越李灵芝叶路牛秀珑刘昕朱雅琴孙维甲梁彦军; 关键词：卵巢肿瘤肿瘤白细胞介素6 信号传导

骨质疏松症的药物治疗被引量：4: 2003年; 李灵芝; 关键词：骨质疏松症药物治疗

侧链失碳红景天苷类似物N04对缺氧EA.hy926内皮细胞缺氧诱导因子及其相关因子的影响被引量：2: 2017年; 目的红景天苷是我国传统中药红景天的主要活性成分,具有显著的抗缺氧缺血活性。文中研究侧链失碳红景天苷类似物N04对缺氧损伤血管内皮细胞缺氧诱导因子(HIF-1α)相关因子表达的影响。方法取对数生长期人脐静脉内皮细胞EA.hy926细胞随机分为常氧对照组、缺氧模型组、红景天苷组(1×10-6mol/L),以及N04高浓度(1×10-6mol/L)、中浓度(1×10-7mol/L)、低浓度(1×10-8mol/L)干预组。除常氧对照组外,其他各组均剥夺培养介质DMEM中的糖与血清,培养于95%N2+5%CO2环境中,建立EAhy926内皮细胞缺氧模型,红景天苷组及N04高、中、低浓度组分别给予相应药物干预处理。采用MTT法检测细胞活力,分光光度法检测细胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性,RT-PCR方法检测细胞HIF-1α和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平,Western blot方法检测细胞HIF-1α,VEGF和肿瘤抑制蛋白VHL(p-VHL)蛋白水平,ELISA方法检测细胞内皮型一氧化氮合酶(e NOS)活性。结果与常氧对照组比较,缺氧模型组细胞活力降低(0.51±0.05 vs 0.27±0.02,P<0.01)、LDH水平升高[(6.65±1.43)U/L vs(78.82±2.33)U/L,P<0.01]、e NOS活性下降[(1.56±0.23)U/100 m L vs(1.16±0.20)U/100 m L,P<0.01];与缺氧模型组比较,N04高、中、低浓度组细胞活力(0.42±0.05、0.40±0.03、0.37±0.04)升高,LDH水平[(53.05±3.90)、(58.42±4.45)、(62.73±3.63)U/L]降低,e NOS活性[(3.01±0.47)、(2.60±0.26)、(2.32±0.29)U/100m L]增加,红景天苷组e NOS活性[(2.33±0.49)U/100 m L]亦增加,差异均有统计学意义(P<0.01);与红景天苷组比较,N04高、中浓度组细胞活力升高(P<0.05),N04高浓度组e NOS水平升高(P<0.01),N04中、低浓度组LDH水平升高(P<0.05)。与常氧对照组比较,缺氧模型组HIF-1αmRNA、HIF-1α蛋白和VEGF蛋白表达升高(P<0.01),PVHL蛋白表达降低(P<0.01);与缺氧模型组比较,N04高、中、低浓度组和红景天苷组HIF-1αmRNA、HIF-1α蛋白、VEGF mRNA水平下调,p VHL蛋白表达增加(P<; 卜婧张永亮李灵芝吴志恒董培李建宇李雅潇; 关键词：缺氧内皮细胞缺氧诱导因子血管内皮生长因子内皮型一氧化氮合酶

李灵芝

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