林国滟
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：福建师范大学更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 木聚糖酶高产菌株EIM-30的鉴定及其产酶条件的优化被引量：1
- 2012年
- 通过对木聚糖酶高产菌株EIM-30基于形态学和18SrDNA序列的系统发育进化分析，鉴定为里氏木霉Trichoder撇reesei。在单因子实验确定EIM-30产木聚糖酶的最适碳源和氮源的基础上，通过Plackett—Burman实验对影响其产酶的相关因素进行评估并筛选出3个显著效应因子，然后应用最陡爬坡实验和响应面分析确定最适产酶培养基配方为：酵母浸膏1．50％，蛋白胨1．00％，NaC10．50％，PPG-20000．10％，MgS041．20％，CaC20．18％，（NH4）2S040．45％，甘油4．18％，乳糖3．05％，K2唧041．59％。优化后TrichodermareeseiEIM-30的液体发酵产木聚糖酶的活力可达9．857×105V／mL，较优化前提高1．98倍。
- 杨章萍蔡少丽柯崇榕黄平刘小琳余清梅庄秀红陈林林国滟黄建忠
- 关键词：木聚糖酶里氏木霉液体发酵
- 中性纤维素酶外切葡聚糖酶CBHⅡ的异源表达被引量：2
- 2011年
- 利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从本实验室保存的1株特异腐质霉EIM-50上克隆到中性纤维素酶外切葡聚糖酶基因(CBHⅡ)全长序列,大小约为1 586 bp。将其克隆到pPIC9K上,成功构建重组质粒pPIC9K-CBHⅡ,并经电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达。gel pro Analyser软件分析其表达蛋白的表观分子量约为62.548ku。用BandScan软件分析其蛋白表达量为2.3%,即0.738μg/mL(mg/L)。
- 林国滟蔡少丽黄平郑海英柯崇榕杨章萍蔡水淋林艺平黄建忠
- 关键词：特异腐质霉毕赤酵母异源表达
- 特异腐质霉内切葡聚糖酶Ⅱ基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质被引量：7
- 2012年
- 【目的】在毕赤酵母中表达特异腐质霉Humicola insolens的中性内切葡聚糖酶Ⅱ,并对其性质加以研究。【方法】利用RT-PCR的方法,以特异腐质霉(Humicola insolens)NC3总RNA为模板,克隆到中性内切葡聚糖酶Ⅱ基因(egⅡ)的cDNA。将其插入表达载体pPIC9K,重组质粒经线性化后电击转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115。【结果】SDS-PAGE和酶活的检测结果均表明:egⅡ基因在毕赤酵母中成功表达。重组酶的部分酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为70°C,且在65°C以下具有较好的热稳定性。最适反应pH为6.5,在pH 6.0?7.0之间有较好的稳定性。【结论】用重组毕赤酵母可高效表达外源中性内切葡聚糖酶,为其今后在工业应用奠定了基础。
- 郑海英黄平蔡少丽柯崇榕林国滟黄建忠
- 关键词：特异腐质霉毕赤酵母
