江雪燕
- 作品数：10 被引量：6H指数：1
- 供职机构：广东省人民医院(广东省医学科学院)更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法被引量：3
- 2013年
- 目的:建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法:通过混合酶消化法从少量成年大鼠骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团,批量扩增骨骼肌干细胞;用qRT-PCR和免疫细胞化学染色检测干细胞标志物Nanog、Oct4和骨骼肌干细胞标志物肌源性因子5(myogenic factor 5,Myf5)、配对盒蛋白7(paired box protein 7,Pax7)的表达;成脂或成骨分化诱导培养基诱导检测骨骼肌干细胞的多功能性。结果:采用混合酶消化法可获得骨骼肌干细胞单细胞,在悬浮的培养条件下能快速克隆成骨骼肌细胞团,贴壁培养后能看到骨骼肌干细胞从细胞团中爬出来,和传统的差速贴壁方法相比悬浮培养法获得的骨骼肌干细胞纯度更高,细胞状态更好,干性因子Nanog、Oct 4和骨骼肌干细胞标志物Myf5、Pax 7的表达更高(P<0.05);在不同培养基的诱导下能向骨骼肌、成骨和脂肪细胞系分化。结论:悬浮培养法能获得大批量干性好、纯度高、具有多向分化潜能的骨骼肌干细胞,从而为肌肉相关疾病的细胞治疗提供优良的种子细胞。
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通余细勇
- 关键词：成年大鼠骨骼肌干细胞
- 干细胞定向分化为心肌细胞的分子调控机制
- 干细胞分化是多种调节因子共同作用的复杂过程,包括转录因子、microRNA和信号通路,共同形成复杂的网络调控体系。在心脏发育过程中,心肌特异转录因子发挥重要作用,它们的上调表达被认为是向心肌分化的首要标志。促进心肌分化的...
- 余细勇江雪燕林曙光
- 文献传递
- 碱性成纤维细胞生长因子对成年大鼠骨骼肌干细胞增殖和迁移的作用
- 目的:骨骼肌干细胞也称骨骼肌卫星细胞,主要存在于肌纤维的肌膜层与基底膜之间,具有自我更新、多向分化的能力,在骨骼肌的损伤修复中起着重要的作用,并在心肌疾病的自身修复中显示了良好的临床应用前景。本文旨在探索碱性成纤维细胞生...
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通林曙光余细勇
- 关键词：骨骼肌干细胞成年大鼠碱性成纤维细胞生长因子
- 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法
- 目的建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法通过混合酶消化法从少量成年骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团批量扩增骨骼肌干细胞;用quantitative real-time...
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通余细勇
- 建立缝隙连接蛋白43基因定点突变细胞株的研究
- 2011年
- 目的定点突变是通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的 DNA片段中引入包括碱基的添加、删除、点突变等所需变化。体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是实验室中改造/优化基因常用的手段。连接蛋白43(connexin43,Cx43)是心脏表达最丰富的连接蛋白,主要分布在心室,其构成的缝隙连接(gapjunction,GJ)在心肌细胞中的电偶联中起着非常重要的作用。近年来的研究表明干细胞移植治疗心肌梗死时,细胞间电偶联障碍是导致心律失常副作用的一个重要原因。己知Cx43的磷酸化状态可以调节通道的功能,磷酸化常见的是368位点的丝氨酸磷酸化。我们对缝隙连接蛋白43基因(Cx43)的特定碱基进行定点改变,从而改变对应的氨基酸序列,并对表达产物进行研究,以利于将来探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)中转染突变的Cx43对其向心肌分化能力的影响,及其磷酸化状态是否对心律失常有调控作用。方法设计引物,sense:5'-CTTCAAGCAGAGCCAGCAGTCGTGCCAGCA-3',antisense:5'TGCTGGCACGACGACTGCTGGCTCTGCTTGAAG-3'。以已构建的Pcdh-Cx43为模板,使用Stratagene基因定点突变试剂盒进行PCR扩增,用DpnI酶识别甲基化位点并将其酶切,PCR产物转化后筛选阳性克隆,提取质粒测序验证。在293FT中与其它3个穿梭质粒一起包装,再将慢病毒颗粒转染BMSCs,用嘌呤霉素筛选出阳性克隆BMSCs-mCx43,在压力培养基下传代培养。用流式细胞仪检测BMSCs-mCx43的干细胞相关表面标记表达情况,同时用western blot检测BMSCs-mCx43的蛋白表达情况。结果测序结果显示突变位点正确,荧光照片显示90%的293FT表达绿色荧光。50%的BMSCs有绿色荧光蛋白的表达。流式细胞仪检测示BMSCs-mCx43细胞CD29阳性表达94%±0.8%,CD73阳性表达92%±0.7%,几乎不表达CD34和CD105,与未转染病毒的BMSCs和转染空病毒载体的BMSCs的表面标记一致。Western blot结果显示BMS
- 李晓红朱杰宁江雪燕江雪燕符永恒单志新林秋雄邓春玉邝素娟
- 关键词：定点突变技术缝隙连接蛋白基因定点突变丝氨酸
- 斑点追踪成像技术评价糖尿病大鼠左心功能的研究被引量：1
- 2015年
- 目的评价斑点追踪成像技术(speckle tracking imaging,STI)的速度、位移和形变(应变及应变率)在检测2型糖尿病大鼠左心功能的灵敏性和应用价值。方法雄性SD大鼠按照30 mg/kg给予链脲佐菌素尾静脉注射后喂以高脂饲料,期间检测空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)及2 g/kg葡萄糖溶液灌胃2 h后的血糖(plasma glucose 2 h,PG2 h),以确定大鼠2型糖尿病模型建立成功;建模6周后用STI检测左心室6个不同节段收缩期、舒张期径向和周向速度、位移、形变(应变和应变率),并比较其变化情况。结果建模3周后,8只测得FPG>7.0 mmol/L和(或)PG2 h>11.1 mmol/L的大鼠被纳入模型组。建模6周后,STI分析显示模型组左心室收缩期和舒张期部分节段的径向、周向速度和位移较对照组显著降低,差异具统计学意义(P<0.05)。但左心室6个不同节段的收缩期和舒张期径向、周向整体速度,收缩期和舒张期径向、周向整体位移与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);形变分析显示模型组舒张期各节段径向、周向应变及其6节段的整体径向和周向应变,收缩期、舒张期径向整体应变率较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 STI能够在早期检测到2型糖尿病大鼠左心室心肌部分节段收缩及舒张功能受损,采用形变参数评估心功能比速度和位移更为灵敏。
- 张梦珍刘晓颖江雪燕符永恒林秋雄麦丽萍陈秀云陈少贤祁周措杨敏
- 关键词：斑点追踪成像技术2型糖尿病左心功能
- 孕期吸烟对SD大鼠胚胎心脏发育的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨孕期吸烟对SD大鼠胚胎心脏发育的影响及分子机制。方法将24只怀孕SD母鼠随机分为4组:正常对照组、10支烟/d组、20支烟/d组、40支烟/d组,每组6只,并于孕期0.5 d(GD 0.5)后开始给予吸烟处理直至分娩。采用超声多普勒Vevo2000检测出生后1 d的新生乳鼠的左心结构及其心脏功能;采用Color-Doppler检测心室血流方向,以确认室间隔的发育是否异常。心功能检测完毕后,收集各组新生乳鼠心脏组织,采用Western-blot检测心肌特异转录因子GATA4的表达量。结果各组新生乳鼠心脏重量无明显差异,40支烟/d处理组乳鼠体重显著下降,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。孕期持续给予40支烟/d被动吸烟处理能显著降低左心室重量、左心室舒张/收缩末期前壁厚度和左心室舒张/收缩末期后壁厚度,差异均有统计学意义(P<0.05)。孕期给予20支烟/d和40支烟/d处理后,新生乳鼠的GATA4蛋白表达呈剂量依赖性下调,40支烟/d组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论母鼠在怀孕期间接受被动吸烟后,引发后代新生乳鼠的心功能受损,其机制可能与下调心肌特异转录因子GATA4表达相关。
- 叶力通江雪燕张梦珍潘宇林秋雄单志新姜霖陈瑶余细勇
- 关键词：孕期吸烟心脏发育GATA4
- 超声斑点追踪成像技术评价2型糖尿病大鼠模型左心室功能
- 张梦珍江雪燕刘晓颖符永恒林秋雄陈少贤麦丽萍陈秀云杨敏
- 尼古丁抑制心肌分化和心脏早期发育及其相关机制研究
- 研究背景与目的 先天性心脏病（Congenital heart defects, CHDs）是一种常见的发育缺陷疾病。流行病学的研究结果显示,该病在美国的新生儿中的发病率为0.8-1%,而在亚洲的发病率为0.93...
- 江雪燕
- 关键词：尼古丁先天性心脏病心肌分化小鼠胚胎干细胞
- Vc维持骨髓间充质干细胞生长的研究
- 目的:干细胞具有自我更新和多向分化能力,而其中骨髓间充质干细胞(BMSCs)取材相对容易,是许多临床疾病很有前景的替代治疗手段。然而BMSCs在传代次数过多的时候,细胞呈现自发分化或老化的想象。而临床又需要大量的种子细胞...
- 李晓红江雪燕朱杰宁林秋雄邓春玉符永恒邝素娟杨敏余细勇
- 文献传递
