目的:制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串联蛋白并分析其免疫学特性。方法:用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位,将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,经大肠杆菌BL21表达并纯化。制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE、Western blot鉴定后,免疫小鼠制备多克隆抗体,以ELISA检测抗体的效价,免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性。结果:通过原核表达与纯化,获得高纯度的表位融合蛋白,经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体,该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析。结论:本研究制备的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体,为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础。
目的探讨αB-crystallin基因在喉癌组织中的表达及其与喉癌的关系。方法收集2008年3月~2014年10月南京医科大学第二附属医院及皖南医学院弋矶山医院手术切除的喉癌标本54例及13例癌旁正常黏膜标本,采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测8例喉癌组织及其癌旁正常组织中αB-crystallin基因的表达,免疫组化法检测54例癌组织及13例癌旁正常组织中αB-crystallin蛋白的表达,比较不同组织中αB-crystallin阳性表达率。结果喉癌组织中的αB-crystallin m RNA表达量及αB-crystallin蛋白阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有高度统计学意义（P〈0.01）;不同TMN分期及淋巴结转移情况的喉癌组织中αB-crystallin蛋白的阳性表达率比较差异有统计学意义（P〈0.05）,不同性别、年龄、肿瘤分型及分化程度的喉癌组织中αBcrystallin蛋白的阳性表达率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论αB-crystallin基因的高表达与喉癌发生发展及转移有关,可能为喉癌患者的预后提供一个潜在的风险评估指标。
