王彩梅
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建被引量：3
- 2007年
- 利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并将含突变基因的重组质粒pAO815-ep8-R182K在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-R182K表达产物与野生型PEL、PEL-ep8比较实验表明:叠加突变体表达蛋白PEL-ep8-R182K最适反应温度与野生型PEL、PEL-ep8一致,均为40℃;热稳定性与野生型相似,比PEL-ep8降低2.25℃。但是,在比活上,PEL-ep8-R182K与PEL-ep8、野生型PEL相比,其比酶活分别提高了14.03%和3.86%。
- 王彩梅蔡少丽吴义真林琳
- 关键词：扩展青霉脂肪酶叠加突变最适温度热稳定性
- K55R与ep8叠加突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善被引量：9
- 2007年
- 利用重叠延伸PCR对扩展青霉脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,构建了K55R与随机突变体ep8叠加突变的重组质粒pAO815-ep8-K55R。将该质粒电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。实验结果表明:该叠加突变体在毕赤酵母中获得了活性表达,得到表达产物脂肪酶PEL-ep8-K55R-GS。其表达量为508u/mL,分别约为野生型脂肪酶PEL-GS(627u/mL)的81%,随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS(924u/mL)的55%;其比活力为2309.1u/mg,与随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS和野生型脂肪酶PEL-GS的相仿。叠加突变脂肪酶PEL-ep8-K55R-GS的最适作用温度为37℃,与野生型脂肪酶PEL-GS和随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS一致;其Tm值为41.0℃,比野生型脂肪酶PEL-GS提高了2.3℃,比随机突变脂肪酶PEL-ep8-GS提高了0.8℃。表明叠加突变脂肪酶PEL-ep8-K55R-GS的热稳定性有了进一步的提高。
- 蔡少丽林俊涵王彩梅林琳
- 关键词：扩展青霉脂肪酶叠加突变热稳定性
- Cryptococcus laurentii B40胞外脂肪酶的分离纯化及特性分析
- 罗伦隐球酵母(Cryptococcus laurentii)B40是一株产胞外碱性高温脂肪酶的野生菌株。本文对其发酵培养基进行优化获得其最佳发酵配方,并通过硫酸铵沉淀、DEAE Sephadex A-25离子交换层析和 ...
- 王彩梅蔡少丽吴义真林俊涵章文贤施巧琴林琳
- 关键词：分离纯化脂肪酶
- 文献传递
- 罗伦隐球酵母B40脂肪酶的分离纯化及扩展青霉脂肪酶突变体的构建
- 本论文阐述了对罗伦隐球酵母B40的发酵配方改良、该菌产生的脂肪酶的纯化及酶学特性等方面的研究。通过对发酵培养基的优化，确定了其适宜的发酵配方;通过硫酸铵沉淀、DEAE SephadexA-25离子交换层析和Superde...
- 王彩梅
- 关键词：脂肪酶定点突变分离纯化
- 文献传递
- K55R与ep8叠加突变对扩展青霉碱性脂肪酶热稳定性的改善
- 利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,构建了K55R与随机诱变体ep8叠加突变的重组质粒pAO815-ep8-K55R。将该质粒电转化毕赤酵母GS115进行表达。结果表明:该叠加突变体在...
- 蔡少丽王彩梅邹有土黄平林琳
- 关键词：扩展青霉碱性脂肪酶叠加突变热稳定性
- 文献传递
