祝文彩 作品数:36 被引量:103 H指数:7 供职机构: 南通大学附属医院 更多>> 发文基金: 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 南通市科技局社会发展科技计划项目 江苏省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子培养的猪肝细胞移植对急性肝衰竭大鼠肝再生的影响 被引量:7 2007年 我们将聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖(PLA-O-CMC)纳米粒子培养的猪肝细胞移植到急性肝衰竭(ALF)大鼠腹腔内,观察移植后血浆中肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的变化及受体肝脏病理改变,探讨其对ALF大鼠肝再生的影响。 陈钟 官伟军 汤飞 蔡鸿宇 祝文彩关键词:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖 急性肝衰竭 肝细胞移植 肝再生 聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子的制备及其对培养猪肝细胞的影响 被引量:13 2006年 目的:制备聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子并探讨其对培养猪肝细胞形态和功能的影响.方法:以聚乳酸和O-羧甲基壳聚糖为基质材料,采用超声波法制备了聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,用原子力显微镜对其进行了物理表征,用X射线光电子光谱法对其表面的化学结构进行了表征.用聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子进行原代猪肝细胞培养,并以普通培养作为对照组.观察培养后1 wk内肝细胞的形态和功能变化.结果:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子制备成功,原子力显微镜下其直径300-500 nm.经过XPS光谱分析显示,C,O,N的比例分别为72.51%,23.69%,3.80%.普通培养的肝细胞,48 h后逐渐失去多边形特征.而与PLA-O- CMC共培养48 h后,肝细胞形成细胞黏附聚集的球形体,大部分肝细胞重建细胞极性,呈现较典型、均匀的多边形形态特征.培养后 24 h,3 d和5 d时,纳米细胞培养组ALB含量高于普通培养组(3.53±0.052,3.48±0.075,3.57 ±0.137g/L vs 3.10±0.179,3.17±0.186,3.10 ±0.219 g/L,均P<0.05);3,5,7 d时,纳米细胞培养组ALT水平明显低于普通组(15.33± 13.05,8.84±8.87,7.00±5.22 nkat/L vs 24.17 ±20.35,16.17±27.49,15.50±11.95 nkat/L, 均P<0.05),而BUN含量虽然有所升高,但是不显著(P>0.05).结论:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子是肝细胞培养的良好材料. 陈钟 戴新征 杨欣荣 祝文彩关键词:聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖 纳米材料 肝细胞 肝细胞移植 实时荧光定量PCR检测RAGE mRNA方法的建立及初步应用 被引量:3 2008年 目的建立实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)检测人晚期糖基化终末产物受体(RAGE)mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达。方法根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物,应用SYBR GreenⅠ荧光染料,建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法,并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价;根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量,并以RAGE mRNA和18SrRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标。结果线性范围为5.0×10^3~5.0×10^9copies/ml,相关系数为-0.98,批内变异系数(CV)为0.63%~8.71%,批间CV为1.52%~12.38%。食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18SrRNA浓度的对数比值(^-x±s)分别为0.638±0.068和0.334±0.329(P〈0.005),提示食管癌组织RAGE表达上调。结论RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点,RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性。 景蓉蓉 王惠民 鞠少卿 祝文彩 张志泉关键词:晚期糖基化终末产物受体 实时荧光定量PCR 食管癌 多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞微小RNA-202的表达及意义 被引量:2 2011年 目的 建立SYBR Green Ⅰ FQ-PCR检测人外周血单个核细胞(PBMC)中miR-202表达的方法,并初步探讨其检测MM的意义.方法 采用特异miR-202茎环引物逆转录后,用FQ-PCR对21例MM患者及20名健康人PBMC中miR-202表达水平做相对定量分析;结果用Mann-Whitney法进行两组间miR-202表达差异比较.此外,用1份1∶125稀释标本重复检测5次;及同一标本连续检测3d,每天检测1次,每次重复5管,根据循环阈值(Ct)计算标准差和变异系数(CV),以评价所建方法的重复性.结果 FQ-PCR检测PBMC中miR-202的扩增曲线呈标准的S型,熔解曲线峰值单一,未见杂峰,显示其特异性较好.批内CV为1.2%,批间CV为3.2%,当标本miR-202浓度被稀释为12.8 pmol/μl时,仍可稳定地得到扩增曲线.FQ-PCR检测MM组中miR-202表达量为1.844(0.162 ~3.966),健康对照组表达量为0.014(0.007~0.221),MM组中miR-202表达明显高于健康对照组(U=48.000,P<0.01).结论 FQ-PCR是一种快速简便、特异性和重复性较好的检测miR-202的方法,MM患者PBMC中miR-202表达升高,其可能参与MM的发生过程,并有可能成为MM诊断和治疗的新指标. 张霞 王旭东 申娴娟 吴信华 施维 祝文彩 刘振宗 鞠少卿关键词:聚合酶链反应 微小RNAS 多发性骨髓瘤 南通地区健康人群血清NSE电化学发光法检测参考区间的调查 被引量:7 2018年 目的调查和建立南通地区表观健康人群神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)的参考值区间。方法选取2017年1月~2018年1月南通大学附属医院体检中心3 874例健康体检者作为研究对象,其中男性2 767例,女性1 107例,通过问卷调查和体格检查排除神经系统、血液病、炎症、肿瘤等疾病,采用罗氏cobase 411全自动电化学发光仪检测NSE水平。根据性别、年龄将受检者分组(男女各7组:<30岁,30~39岁,40~49岁,50~59岁,60~69岁,70~79岁,>80岁),对结果进行统计学分析,建立相应的参考区间。分析性别、年龄分组后的组间差异是否有统计学意义;将获得的参考区间与试剂盒提供的生物参考区间进行比较,并进行参考区间的验证。结果 NSE水平呈正态分布,男性血清NSE水平(15.79±3.52ng/ml)明显高于女性(13.79±3.04ng/ml),差异有统计学意义(t=3.102,P=0.037)。但独立样本t检验进行各年龄组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。采用x^-±1.96s确定参考区间,NSE参考区间为8.47~21.07ng/ml,男性为8.72~21.36ng/ml,女性为8.06~20.10ng/ml,对该研究建立的NSE参考区间进行验证符合标准。结论初步建立了适合该地区表观健康人群的血清NSE参考区间。NSE的参考区间有性别差异,根据不同性别建立的参考区间,可为疾病的诊断和治疗提供准确的依据。 卢美红 鞠少卿 丛辉 杨曙梅 祝文彩关键词:神经元特异性烯醇化酶 年龄 性别 PLA-O-CMC纳米粒子培养的猪肝细胞移植对急性肝衰竭大鼠肝再生作用的初步研究 被引量:1 2006年 目的:探讨胶原凝胶包埋聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖(PLA-O-CMC)纳米粒子粘附培养猪肝细胞移植对急性肝衰竭(ALF)大鼠肝的再生作用。方法:D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠ALF模型;48h后分别将5mlⅠ型胶原凝胶包埋的PLA-O-CMC纳米粒子粘附培养24h猪的肝细胞、5mlⅠ型胶原凝胶固定培养24h的猪肝细胞、5ml培养24h的猪肝细胞悬液(均含5.0×107个)移植到各组ALF大鼠腹腔内,并以5mlRPMI1640腹腔内注射作为阴性对照。观察大鼠14天存活率和受体肝脏的病理变化。结果:移植后14天ALF大鼠的存活率:单纯肝细胞移植组(Ⅰ组)为56.25%,胶原肝细胞移植组(Ⅱ组)为62.5%,纳米胶原肝细胞移植组(Ⅲ组)为75%,阴性对照组(Ⅳ组)为18.75%,各移植组14天存活率高于对照组(P<0.05),各移植组间无统计学意义(P>0.05)。ALF大鼠肝脏再生于ALF后5~7天最为显著;各组肝脏病理变化以Ⅲ组恢复最好,双核细胞最多,肝再生最快。结论:应用PLA-O-CMC纳米粒子和Ⅰ型胶原联合培养猪肝细胞移植于ALF大鼠腹腔内能促进肝脏的再生。 杨欣荣 陈钟 戴新征 祝文彩 张国寿 陈玉泉关键词:肝细胞移植 肝再生 急性肝衰竭 聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖 Calmagite双试剂法测定镁离子 2001年 建立 Calmagite双试剂法测定血清镁离子。该方法操作简便 ,能够消除黄疸、乳糜血清空白干扰 ,具较高准确度 ,与校准血清直接比较 ,^y=0 .9846 ^x+0 .0 2 44 (r=0 .990 9) ,具有推广价值。 祝文彩 孙承龙关键词:终点法 双试剂 镁离子 血液检验 微囊化猪肝细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭 被引量:9 2005年 目的探讨微囊化猪肝细胞移植(HTx)治疗大鼠急性肝衰竭(ALF)的效果。方法采用原位胶原酶循环肝灌注法分离中国实验用小型猪肝细胞,海藻酸钠-氯化钡法微囊化。应用 D-氨基半乳糖(D-gal)1.2 g/kg体重腹腔内注射制作SD大鼠ALF模型。ALF大鼠随机分为3组。注药24 h后分别将PRMI 1640培养液2 ml腹腔注射为对照(I组)、2 ml游离猪肝细胞(2×107个/ml)腹腔内移植(Ⅱ组),以2 ml微囊化猪肝细胞腹腔内移植(2×107个/ml,Ⅲ组)。观察移植后大鼠14 d存活率、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)、血氨(NH3)的改变和肝脏的病理变化。结果肝细胞移植后大鼠14 d存活率:I组为20.0%(5/25),Ⅱ组为66.7%(16/24),Ⅲ组为76.0%(19/ 25),3组间差异有统计学意义(P<0.05)。移植后第1天I组ALT、TB和移植前相比差异无统计学意义,Ⅱ、Ⅲ组ALT、TB下降。第4天3组ALT、TB均继续下降,Ⅱ、Ⅲ组低于I组(P<0.05), Ⅱ、Ⅲ两组间差异无统计学意义(P>0.05)。移植后第7天,ALT进一步下降,3组间差异有统计学意义(P<0.05);TBⅢ组显著低于Ⅱ组和I组(P<0.05),Ⅱ组低于I组但差异无统计学意义 (P>0.05)。移植后第14天,肝功能均明显恢复,ALT、TBⅡ、Ⅲ组均低于I组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ两组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组治疗前后NH3有所改善,但各时间段及各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。微囊组和游离肝细胞组移植后肝脏病理损害修复较快,而阴性对照组肝脏再生修复较差。结论微囊化猪肝细胞腹腔内移植可以提高药物诱导急性肝衰竭大鼠的存活率,改善急性肝衰竭大鼠的肝功能,有利于受体受损肝脏的再生修复,但对降低血氮的效果不明显。 黄华 陈钟 吴振宇 祝文彩 陈玉泉关键词:肝衰竭 微囊 细胞移植 间接计算法与匀相法直接测定LDL-C的比较研究 被引量:3 2006年 目的探讨匀相法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)值与P lane lla公式(P公式)、P rledew a ld公式(简称F公式)计算结果。方法收集1 862份标本,在日立7600-020全自动生化分析仪上直接测定;TC、TG、LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),同时运用P公式与F公式计算每份标本对应LDL-C值,进行统计学处理。结果①TG≤4.52 mm o l/L时P公式法、F公式法与均相法的相关性(r=0.909,r=0.841)好于TG>4.52 mm o l/L时(r=0.807,r=0.787)。②总胆固醇(TC)水平对LDL-C结果也有影响;TG≤4.52 mm o l/L时,TC<6.21 mm o l/L组相关性好于TC>6.21 mm o l/L组;而当TG>4.52 mm o l/L时,TC<6.21 mm o l/L组差异最大。结论在确保TC、TG、HDL-C结果准确可靠的情况下,可以用P公式法、F公式法计算LDL-C值作为参考。 祝文彩 丛辉 王旭东 苏建友 王跃国 沈荣春 鞠少卿关键词:胆固醇 三酰甘油 低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C间接计算法与匀相法测定比较 目的探讨匀相法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL- C)值与Planella公式(P公式)、Friedewald公式(简称F公式)计算结果。方法收集1862份标本,在日立7600-020全自动生化分析仪上直接TC、TG、... 祝文彩文献传递