肖朝庭 作品数:13 被引量:44 H指数:4 供职机构: 湖南大学生物学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 湖南省科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
几种基因差异表达筛选技术在动物发育与繁殖中的最新进展 被引量:4 2006年 抑制性消减杂交(SSH)、DNA芯片和基因表达系列分析(SAGE)技术都是高效鉴别不同细胞群之间差异表达基因的方法。作者对这3种方法在动物发育与繁殖领域中的最新应用进展作了简要阐述。 肖朝庭 储明星 傅衍关键词:SSH DNA微阵列 SAGE 差异表达基因 快速鉴定猪肉和牛肉多重PCR方法的建立及初步应用 被引量:9 2011年 建立了快速有效地鉴定猪肉和牛肉的多重PCR方法。根据GenBankTM登陆的猪和牛的线粒体基因序列设计特异性引物,通过PCR条件优化建立起多重PCR方法,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明,该多重PCR方法能特异性扩增到目的大小的牛和猪线粒体基因片段;该方法不能扩增羊、鸡、狗等8种常见动物线粒体基因组片段;该方法最低能检测到牛DNA9.8×101fg/μ L和猪DNA6.7×101fg/μ L;能检测出市场上猪肉和牛肉商品中的假冒产品。该方法具有高度的特异性和敏感性,能够快速鉴别检测猪肉和牛肉商品。 李杰 乔绪稳 余兴龙 李润成 肖朝庭 刘国华 蒋大良关键词:多重PCR 牛肉 猪肉 骨形态发生蛋白及其受体在哺乳动物繁殖中的作用 被引量:5 2006年 骨形态发生蛋白(BM P s)属于转化生长因子-β超家族的成员,最初因其能诱导异位骨形成而得名。随着研究的深入,发现BM P s的功能不限于骨的发育和形成,而是涉及几乎全身所有系统,包括调节哺乳动物生长、细胞分化和细胞凋亡,而且越来越多的研究结果表明,BM P系统在调节雌性和雄性哺乳动物的繁殖中具有至关重要的功能。作者简要介绍了BM P s及其受体的结构与作用机制,并具体介绍了几种BM P s在哺乳动物繁殖中的功能。 肖朝庭 储明星 傅衍关键词:骨形态发生蛋白 5个绵羊品种BMP6基因部分片段的多态及序列分析 被引量:2 2008年 根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多赛特、特克塞尔、考力代5个绵羊品种301个个体中的单核苷酸多态性。结果发现这3对引物的扩增片段在检测的5个品种中均无多态性,说明所检测的BMP6外显子5、6、7序列比较保守。同时克隆了小尾寒羊(695 bp)和济宁青山羊(699 bp)部分BMP6 mRNA以及小尾寒羊BMP6基因外显子3-4的内含子序列和两端部分外显子序列(785 bp)。发现小尾寒羊和济宁青山羊的核苷酸和氨基酸序列差异很小,两者的核苷酸序列同源性高达99.28%,氨基酸序列同源性为98.1%,除济宁青山羊中插入一个丙氨酸外,两者只有4个氨基酸的差异。绵羊与牛、人、小鼠和大鼠的核苷酸同源性分别为97.04%、81.82%、84.68%和85.06%;氨基酸序列同源性分别为99.05%、91.43%、90.48%和92.38%,均大于90%,表明各物种BMP6核苷酸序列虽然差异较大,但氨基酸序列却非常保守。 肖朝庭 狄冉 储明星 傅衍 方丽 马月辉 李奎 徐作鹏关键词:绵羊 PCR-SSCP 猪星状病毒2型PCR检测分型方法的建立及初步应用 被引量:2 2016年 根据GenBank登的猪星状病毒2型(PAstV2)序列,设计1对引物。通过优化反应条件,首次在湖南地区检测到PAstV2型病毒。用该方法通过提取样品RNA,采用RT-PCR进行扩增,得到一条预期的特异性条带(243bp),将扩增产物进行测序分析,结果表明该序列与PAstV2型的参考序列同源性为96%。同时,用该引物检测可引起腹泻的PEDV、TGEV、CSFV和PRRSV四种病毒RNA,RT-PCR结果均为阴性。该RT-PCR的敏感性试验结果表明其最高敏感度为400 pg/μL。采用该方法对湖南境内78份猪肠道和粪便样品进行检测,发现PAstV2型的感染率达到11.5%(9/78)。结果表明该方法可以应用于临床PAstV2检测。 罗璋 罗季委 李海锦 贺巨炬 彭旺 李润成 余兴龙 肖朝庭关键词:基因型 PCR 猪札幌病毒VP1基因的表达及ELISA抗体检测方法的建立 被引量:1 2012年 为了在大肠杆菌中表达猪札幌病毒VP1基因,并以纯化的重组蛋白为抗原建立猪札幌病毒血清抗体ELISA检测方法。采用RT-PCR技术扩增VP1基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,再将所克隆的衣壳蛋白的编码序列亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,将成功构建的原核表达质粒pETSAVCAP转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达。用纯化的VP1蛋白作为抗原建立了猪札幌病毒血清抗体间接ELISA检测方法并初步用于临床样品的检测。结果显示,猪札幌病毒VP1基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达,Western-blot分析表明该重组蛋白具有良好的反应原性。经对反应条件进行优化,确定间接ELISA的抗原最佳包被浓度为0.5μg/mL,且不与其他常见猪病的阳性血清发生交叉反应,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。通过对从多个省份收集的490份猪血清样品进行检测,阳性率为65.31%。表明,以大肠杆菌表达的猪札幌病毒VP1重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可以用于猪札幌病毒抗体的检测。 李润成 刘国华 黄泽彬 丁建 汪镇南 肖朝庭 余兴龙关键词:VP1基因 酶联免疫吸附试验 抗体 传染性支气管炎病毒结构蛋白研究进展 被引量:3 2010年 传染性支气管炎是禽类最重要疾病的之一,给家禽业造成了重大的经济损失。基因突变、重组和免疫压力等因素都可能引起鸡传染性支气管炎病毒发生遗传变异,给该病的预防和控制带来了很大的困难。近年来国内外学者在分子生物学方面的研究不断深入,在病毒基因组的结构与功能,以及结构蛋白的研究方面取得了重要进展。论文就分子生物学领域对IBV结构蛋白的结构特性及生物学功能等方面的研究概况做一综述,以揭示IBV的致病机理和分子变异机制,为有效防控IB提供科学依据。 宋翥远 卿上田 肖朝庭 黎满香关键词:传染性支气管炎 S蛋白 N蛋白 M蛋白 酿酒酵母细胞表面工程应用研究新进展 被引量:8 2005年 酿酒酵母表面展示工程是一个新兴的蛋白表达系统,由于它能进行蛋白翻译后修饰,能方便地对表达的蛋白产物进行检测和筛选,近年来应用研究发展迅猛。它在构建全细胞催化剂、抗原/抗体库、生物吸附剂、生物传感器、组合蛋白文库、免疫检测及亲和纯化中取得了很多新的应用,在蛋白质分子的功能研究与应用中发挥了更加重要的作用。 肖朝庭 傅衍 田勇关键词:酿酒酵母 猪呼吸道、消化道内细菌质粒的提取 2011年 使用多种选择培养基,通过菌落形态、革兰氏染色、镜检和生化反应,对猪呼吸道、消化道中常规菌群进行初步分类,并使用碱变性法提取质粒。结果从健康猪呼吸道和消化道中分离培养出66株菌株(兼性厌氧菌),获得了长沙地区猪呼吸道、消化道中菌群的基本数据,为相关基础研究和模型应用提供了重要的参考数据;获得了丰富的质粒DNA库,为进一步针对质粒所具有的耐药基因相关研究打下基础。 胡辉 余兴龙 李杰 肖朝庭 李润成 李斌关键词:呼吸道 消化道 影响绵羊高繁殖力和非季节性发情基因的研究 本论文以褪黑激素受体1b(melatonin receptor1b,MTNR1B)、抑制素β,亚基基因(inhibinβA,INHBA)、kisspeptin及其受体G蛋白偶联受体54(Gprotein-coupled ... 肖朝庭关键词:绵羊 繁殖力 氨基酸序列 文献传递