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人高密度脂蛋白受体胞外片段在甲醇酵母中的表达: 2003年; 高密度脂蛋白受体在胆固醇逆向运输中起重要作用 ,并且其可以做为动脉粥样硬化的新型治疗靶点。为了构建以竞争性受体 -配体相互作用为基础的体外高通量药物筛选模型 ,在甲醇酵母中表达了高密度脂蛋白受体胞外结构域。应用RT -PCR方法从人肝癌Bel- 740 2总RNA中扩增了编码高密度脂蛋白受体胞外结构域的基因片段 ,此基因片段经测序证实后亚克隆至甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中。经测序验证读码框正确后将重组质粒电转至PichiapastorisGS115中。应用PCR方法确定目的基因的整合和Mut+ 表型。重组菌株用 1%甲醇诱导 5天后取发酵上清进行SDS -PAGE和Westernblot分析。结果表明 ,在分子量约 64 5kDa处有sHDLR表达。随后应用DiI-AcLDL为配体证明了表达的sHDLR具有结合其配体AcLDL的生物学活性。; 胡箭洪斌李元; 关键词：甲醇酵母

低密度脂蛋白受体研究进展被引量：2: 2000年; 本文介绍了低密度脂蛋白受体蛋白的分子结构、基因特征和基因突变的种类 ,从基因治疗、抗肿瘤、抗病毒和药物筛选等几个方面阐述了低密度脂蛋白受体在医药方面的应用及一些新进展 ,并对低密度脂蛋白受体的基因工程表达情况和低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的关系作了阐述。对低密度脂蛋白受体进行深入研究将会有助于对心血管疾病发病机理的进一步理解 ,同时对抗心血管疾病药物的开发有可能产生积极的作用。; 胡箭李元; 关键词：低密度脂蛋白受体基因治疗药物筛选抗肿瘤药

人可溶性白介素-4受体(sIL-4R)在甲醇酵母中的表达被引量：3: 2004年; 白细胞介素 4(IL 4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用。IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应。sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递来介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂应用于哮喘等疾病的治疗。采用RT PCR方法以人的单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序证实后插入到甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中 ,得到重组质粒pPIC9K sIL 4R ,利用限制性内切酶BglⅡ将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对重组菌发酵上清中的sIL 4R进行鉴定。结果表明 ,在分子量约为 3 0kD处有sIL 4R特异条带出现 ,并具有结合其配基IL; 张勇胡箭李元; 关键词：白细胞介素-4 IL-4 甲醇酵母生物学活性

人可溶性低密度脂蛋白受体在甲醇酵母中的表达被引量：4: 2002年; 为获得低密度脂蛋白受体配基结合结构域在甲醇酵母中的分泌表达 ,首先用RT PCR方法以人肝癌Bel 740 2总RNA为模板扩增了编码低密度脂蛋白受体配基结合结构域的基因片段。核酸测序分析表明克隆到的DNA片段的序列与报道的人LDLR的cDNA序列相同。然后构建了甲醇酵母表达质粒pPIC9K sLDLr ,并将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对GS115 pPIC9K sLDLr上清中的重组sLDLR进行鉴定。SDS PAGE和Westernblot分析表明表达的sLDLR的表观分子量为 36kD。; 胡箭李元; 关键词：甲醇酵母

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胡箭