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RNA的免疫共沉淀分离及检测被引量：1: 2010年; 非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子,绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中;不仅如此,RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合成、加工和修饰、胞内运输和定位、功能发挥及降解的整个生命循环。鉴于此,利用RNA结合蛋白分离或发现鉴定功能性RNA分子是RNA研究领域中一个不可或缺的研究方法。简单地说,就是利用RNA结合蛋白的抗体免疫沉淀RNA/蛋白复合物,再从沉淀的RNA/蛋白复合物中分离得到特定RNA结合蛋白的RNA;分离得到的RNA可以通过末端标记和变性胶电泳对RNA分子的大小进行鉴定,也可以利用高通量RNA测序方法对RNA序列进行分析。; 苟兰涛赵爽刘默芳; 关键词：非编码RNA 共沉淀分离免疫沉淀 RNA结合蛋白生物大分子蛋白复合物

PIWI蛋白在后期精子细胞中泛素化修饰降解为精子形成所必需: piRNA是新近从动物生殖细胞中发现的一类小分子非编码RNA,因其与生殖细胞特异性PIWI家族蛋白相互作用,故称之为PIWI-interacting RNA,简称piRNA.有证据表明,piRNA的生成和功能都必需要PI...; 苟兰涛赵爽刘默芳; 关键词：PIWI PIRNA APC/C 精子形成无精症

piRNA/PIWI在小鼠后期精子细胞中的协同降解调控功能与分子机制: piRNA是新近从动物生殖细胞中发现的一类小分子非编码RNA,因其与生殖细胞特异性PIWI家族蛋白相互作用,故称之为PIWI-interacting RNA,简称piRNA.有证据表明,piRNA的生成和功能都必需要PI...; 苟兰涛赵爽刘默芳; 关键词：PIWI PIRNA APC/C 精子形成

非编码RNA研究技术概述: 非编码RNA是当前生命科学研究领域的前沿热点。系统地研究生物体内非编码RNA的起源、结构、功能和作用机制,有助于我们更加全面、深入地了解基因表达调控机理及生物体的生命活动,而科学问题的解答依赖于实验技术和实验方法的创新和...; 苟兰涛刘默芳付向东; 关键词：非编码RNA 免疫沉淀高通量测序 RNA结合蛋白

非编码RNA研究技术概述: 2014年; 非编码RNA是当前生命科学研究领域的前沿热点。系统地研究生物体内非编码RNA的起源、结构、功能和作用机制,有助于我们更加全面、深入地了解基因表达调控机理及生物体的生命活动,而科学问题的解答依赖于实验技术和实验方法的创新和革命。本文按不同的实验目的和研究内容,就当前非编码RNA领域内主要的研究策略和方法技术作一简述。; 苟兰涛刘默芳付向东; 关键词：非编码RNA 免疫沉淀高通量测序

PIWI/piRNA“机器”与雄性生殖细胞发育被引量：4: 2014年; PIWI(P-element-induced wimpy testis)蛋白在动物生殖系细胞中特异性表达,为动物生殖细胞发育分化所必需。piRNA(PIWI-interacting RNAs)是最近在动物生殖系细胞中发现的一类非编码小分子RNA,这类小RNA特异性地与PIWI家族蛋白相互作用。PIWI/piRNA"机器"通过沉默转座元件和调控编码mRNA等方式在动物生殖细胞发育分化过程中发挥重要作用。本文围绕PIWI/piRNA"机器"的生物学功能及分子机制,对近期取得的相关研究进展进行了系统性总结。; 戴鹏苟兰涛刘默芳; 关键词：PIWI PIRNA 转座元件精子发生

人Piwi基因突变致男性不育的机制研究被引量：5: 2017年; 大量遗传学研究表明,Piwi蛋白对于动物生殖系细胞发育具有至关重要的作用,Piwi基因敲除致动物不育。人Piwi(Hiwi)基因特异性地在雄性生殖细胞表达,但目前对其在人精子发生中的作用及其与男性不育的联系还知之甚少。该研究通过筛查临床男性不育样本发现,少弱精症患者Hiwi基因中存在拮抗泛素化修饰的D-box元件突变;通过构建基因敲入小鼠模型证实,该突变导致雄性不育。机制研究表明,小鼠Piwi(Miwi)D-box突变致MIWI蛋白异常稳定存在于后期精子细胞中,导致与其相互作用的组蛋白泛素连接酶RNF8(ring finger protein 8)被扣留于细胞质、不能入核催化组蛋白泛素化修饰,进而抑制组蛋白被鱼精蛋白替换,引发精子形成异常、雄性不育。该研究发现了男性不育的一类新型致病基因突变,并发现了Piwi蛋白具有调控组蛋白泛素化修饰的新功能,揭示了精子形成中调控组蛋白–鱼精蛋白转换的重要机制。; 苟兰涛康俊炎刘默芳; 关键词：精子形成 PIWI

PIWI蛋白在后期精子细胞中泛素化修饰降解为精子形成所必需: piRNA是新近从动物生殖细胞中发现的一类小分子非编码RNA,因其与生殖细胞特异性PIWI家族蛋白相互作用,故称之为PIWI-interacting RNA,简称piRNA。有证据表明,piRNA的生成和功能都必需要PI...; 苟兰涛赵爽刘默芳; 关键词：PIWI PIRNA APC/C 精子形成无精症; 文献传递

小分子RNA抵御转座元件对基因组的侵袭被引量：1: 2010年; 真核生物在漫长的进化繁衍过程中,一直处在抵御转座元件对基因组侵害的"斗争"中。在过去的十多年中,越来越多的证据指明,小分子RNA扮演了这样一个抵御转座子侵袭的角色。尽管这种抵御侵害的策略对于不同物种各具特点,但它们都呈现出惊人相似的共同特征。基本上,所有的机制都包含三个组成部分:首先,转座元件促使产生小分子RNA,在某些物种中主要是Piwi-interacting RNAs,而在其他物种中主要是small interfering RNAs;第二,作用于活跃转座子的小分子RNA通过RNA依赖性RNA聚合酶或切割机制进行扩增;第三,这些小分子RNA与含有Argonaute蛋白或Piwi蛋白的效应复合物相结合,从而作用于目标转座子的转录本,实现转录后沉默,或作用于目标转座子DNA,抑制染色质修饰和DNA甲基化。这些属性特征构成了一个限制由转座元件活动所造成的严重后果的系统,从而防止转座子侵袭所带来的突变积累,基因表达谱的改变,以及生殖腺发育不良和不育。; Gregory J.Hannon苟兰涛; 关键词：DNA甲基化

非编码RNA研究技术概述: 非编码RNA是当前生命科学研究领域的前沿热点。系统地研究生物体内非编码RNA的起源、结构、功能和作用机制,有助于我们更加全面、深入地了解基因表达调控机理及生物体的生命活动,而科学问题的解答依赖于实验技术和实验方法的创新和...; 苟兰涛刘默芳付向东; 关键词：非编码RNA 免疫沉淀高通量测序 RNA结合蛋白; 文献传递

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苟兰涛