许小明
- 作品数：5 被引量：27H指数：2
- 供职机构：大连理工大学更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生更多>>
- 毕氏酵母表达蛇毒类凝血酶发酵条件的优化
- 本文利用500ml摇瓶培养体系研究了不同培养基、pH值、诱导时间等因素对类凝血酶表达量的影响,获得最适的发酵条件:丰富培养基比营养缺陷型培养基更利于目的蛋白的分泌表达,发酵最佳pH值为6.0,最佳时间为36小时.目的蛋白...
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- 关键词：类凝血酶毕氏酵母发酵
- 文献传递
- 蛇毒类凝血酶的应用及制备生产
- 蛇毒中富含多种毒素和蛋白水解酶,本文总结了其中的类凝血酶的性质及医学应用情况,重点介绍了近年来在天然蛇毒中分离纯化和基因工程生产方面的研究成果.
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- 关键词：蛇毒类凝血酶分离纯化生物医药
- 文献传递
- 蝮蛇类凝血酶基因的克隆与表达研究
- 根据同源性设计引物,通过RT-RCR方法从大连蛇岛蝮蛇毒腺总RNA中合成扩增出类凝血酶基因,并由此推测出其相应的氨基酸序列.将该基因克隆到表达载体pPIC9K电泳纯,并表现较强的生色底物活性.
- 杨青李民许小明包永明安利佳
- 关键词：类凝血酶克隆纯化多聚酶链反应
- 文献传递
- 大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)被引量：17
- 2002年
- 根据同源性分析设计引物 ,通过RT PCR方法从大连蛇岛蝮蛇毒腺总RNA中合成扩增出类凝血酶基因 ,之后将该基因克隆到表达载体 pPIC9K中 ,经电激转化后整合至毕赤酵母细胞基因组中 .经筛选得到甲醇快速生长型转化子His+ Mut+ 在 5 0 0ml摇瓶中培养 ,甲醇诱导分泌表达 .上清液中重组类凝血酶是通过两步柱层析得到 :QSepharoseFF和Benzamidine Sepharose 4BCL .与天然蛇毒类凝血酶一致 ,分泌表达的重组类凝血酶具有较强的酯酶活性 ,但精氨酸甲酯如TAME的水解活性较弱 .此重组类凝血酶在 37℃中性溶液中保存过夜将分解成小肽 ,但在 0℃下很稳定 .该酶的最适pH为 8 0 .
- 杨青胡学军许小明高晓蓉安利佳苏志国J.C.JANSON
- 关键词：蝮蛇类凝血酶基因毕赤酵母分离纯化
