许海东 作品数:24 被引量:64 H指数:4 供职机构: 中国水产科学研究院南海水产研究所 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目 国家自然科学基金 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 建筑科学 更多>>
军曹鱼MHC-Ⅱα基因全长cDNA的克隆及其组织表达分析 被引量:6 2010年 本研究根据其他鱼类MHC-Ⅱα基因的保守序列设计兼并引物,运用同源克隆和末端快速扩增方法扩增了军曹鱼MHC-Ⅱα基因的全长cDNA序列,并对cDNA及其氨基酸序列进行了分析,比较了军曹鱼和其他物种的MHC-Ⅱα氨基酸序列的差异,分析了军曹鱼MHC-Ⅱα基因的组织分布及经LPS刺激后头肾组织中MHC-Ⅱα基因的表达变化。结果表明,军曹鱼MHC-ⅡαcDNA全长998 bp,包括53 bp的5′末端非编码区(5′UTR)、234 bp的3′末端非编码区(3′UTR)及711 bp的开放阅读框(ORF),编码236个氮基酸,其蛋白质分子质量约为25.94 ku,等电点为4.39;军曹鱼MHC-Ⅱα蛋白质序列具有一些重要的特征,包括前导肽、α1、α2、CP/TM/CYT区和保守的半胱氨酸等;军曹鱼MHC-Ⅱα与鼠、人及其它鱼类的氨基酸同源性在25.0%~69.5%之间。Real-ti me PCR检测结果显示,MHC-Ⅱα基因在正常军曹鱼组织中均有表达,但其表达量在各种组织中存在差异,其中较强表达于头肾、鳃,中等程度表达于脾脏、肠,在心脏、脑、肌肉中表达较弱;经LPS刺激后,头肾中MHC-Ⅱα基因表达下调。 茅莉娜 冯娟 李玉谷 侯月娥 郭志勋 许海东关键词:军曹鱼 全长CDNA 诺卡氏菌mce1A基因的克隆及重组表达 被引量:2 2017年 诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是近年来海淡水养殖鱼类频发慢性传染病的病原菌。该研究通过引物扩增得到全长1 254 bp、编码417个氨基酸的诺卡氏菌毒力因子mce1A基因的全序列。该基因编码蛋白质的分子量约为43.98 k D,理论等电点5.14,含有161个疏水性氨基酸,疏水性平均值为0.044,为疏水性蛋白,具有α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲3种结构。经预测,Mce1A有MCE、DUF3407区域、OM_asym_Mla D、Mtu_fam_mce、Mla D 5个结构域,彼此交叠,含有公共区域。根据Mce1A氨基酸构建的系统进化树可以发现诺卡氏菌和新星诺卡氏菌的亲缘关系最近。构建p ET32a-mce1A重组质粒并转化至大肠埃希菌BL21中,得到的重组蛋白的相对分子量约63 k D。温度、IPTG浓度对重组蛋白表达量没有影响。该研究为进一步研究Mce1A的致病机制奠定了基础。 高芳 许海东 徐力文 苏友禄 郭志勋 蒋魁 冯娟关键词:诺卡氏菌 原核表达 神经坏死病毒对卵形鲳鲹的致病性及外壳蛋白基因序列分析 被引量:17 2010年 2008年5月,湛江市某网箱养殖场的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)幼鱼发生大规模死亡,调查发现病鱼呈现体色发黑、反应迟钝、呈螺旋状或旋转游动等典型的病毒性神经坏死症症状,在鱼体没有发现寄生虫或细菌感染,PCR检测发现病鱼感染了鱼类神经坏死病毒(NNV)。利用已经发表的NNV核酸序列设计引物,克隆外壳蛋白基因并测序,根据同源性比较和系统进化分析,该病毒与斜带石斑神经坏死病毒(ECNNV)碱基相似率达99.2%,属于赤点石斑鱼神经坏死病毒基因型(RGNNV)。同时进行人工感染试验,采用4种方法感染该病毒,累计死亡率均达100%,并对感染样品进行克隆测序鉴定,证明导致此次湛江卵形鲳鲹大规模死亡的病原为神经坏死病毒。 许海东 区又君 郭志勋 苏友禄 王瑞旋关键词:卵形鲳鲹 神经坏死病毒 论科研院所的国际合作交流工作 被引量:1 2021年 国际合作是科研院所单位对外展示能力的窗口与舞台,良好的国际合作能够促进知识、技术的创新与发展。国家“一带一路”倡议的提出给新时期的国际合作赋予了更加深远的意义。国际合作交流工作推动了科研院所发展,为科研人员的专业素质提升夯实了基础,为了提高科研院所国际合作交流工作质量,需要就当前工作面临的问题进行系统分析,并以此为基础提出相应的指导建议。 许海东神经坏死病毒感染卵形鲳鲹早期阶段的病毒增殖规律研究 目前,赤点石斑鱼神经坏死病毒(RGNNV)感染海水鱼类早期阶段的病毒增殖规律研究未见报道。本文采用荧光定量PCR(qPCR)研究RGNNV在卵形鲳鲹体内各组织中的增殖规律及组织嗜性。 苏友禄 许海东 马红玲 冯娟 郭志勋关键词:卵形鲳鲹 卵形鲳鲹病毒性神经坏死病及其LAMP快速检测方法研究 2008年春季,广东湛江一些网箱养殖的卵形鲳鲹Trachinotus ovatus幼鱼发生大规模死亡,每个网箱每天死亡数十至上百尾鱼,累积死亡率超过90%。患病鱼呈现出体色变黑、反应迟钝、身体失去平衡、呈螺旋状或旋转游动... 许海东文献传递 鱼类养殖用药解析 被引量:3 2008年 近年来,我国水产养殖业发展迅速,水产养殖集约化程度也在快速提高,同时养殖的环境也在不断恶化,使得养殖对象免疫力、抗病力有所下降,而发病率更是显著提升,并且由于病原菌的突变等因素使得新病种、疑难病等频频出现。目前对于这些疾病主要是采用药物治疗。本文针对我国渔药的发展、分类、影响药物作用的因素以及在使用中存在的问题进行了讨论。 许海东 区又君关键词:养殖用药 水产养殖业 鱼类 养殖对象 药物治疗 药物作用 某水产研究所2011-2021年国家自然科学基金现状分析 2022年 基础研究为我国科学技术的发展提供了助力支持,也能在一定程度上彰显我国的综合实力。国家自然科学基金项目作为支撑我国基础研究工作的主要来源之一,对于科研院校及企事业单位的科研成果、学科建设、梯队搭建、人才培养等都发挥着重要作用。国家自然科学基金获取金额作为评价科研院校及企事业单位基础研究实力的重要评定指标,直接决定着科研院校及企事业单位的科研能力及专业水平,科研院校及企事业单位若想进一步推动自身科研能力的提升,就需要定期对获取的国家自然科学基金自主数据进行梳理分析,以此发现自身不足并有针对性的采取改进措施。中国水产科学研究院南海水产研究所(简称南海所)是我国南海区域从事热带亚热带水产基础与应用基础研究、水产高新技术和水产重大应用技术研究的公益性科研创新机构。本文就南海水产研究所2011-2021年国家自然科学基金申请和资助情况进行总结和分析,以期进一步提升单位科研管理能力,并为同行单位提供一定的借鉴和参考。 许海东关键词:自然科学基金 一种赤点石斑鱼神经坏死病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒 本发明公开一种赤点石斑鱼神经坏死病毒检测用引物组、检测方法和快速诊断试剂盒,该引物组由如下四条引物组成:内引物FIP、内引物BIP、外引物F3和外引物B3。本发明的引物组和试剂盒均可高效高特异性地检测赤点石斑鱼神经坏死病... 郭志勋 许海东 区又君 冯娟 苏友禄文献传递 军曹鱼MHC-Ⅰα基因全长cDNA的克隆及其组织表达分析 被引量:4 2011年 采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,得到1330bp的军曹鱼(Rachycentroncanadum)MHC-Ⅰα全长cDNA片段。该序列包括76bp的5’末端非编码区(UTR),189bp的3’UTR及1065bp的开放阅读框(ORF),编码354个氨基酸,预测其蛋白质分子量约40.10kDa,等电点5.70。构建MHC-Ⅰα氨基酸序列的系统进化树并进行氨基酸相似性比对,结果表明,军曹鱼和已知鱼类及人类(Homosapiens)MHC-Ⅰα氨基酸的同源性在27.9%~67.1%之间。所推测的蛋白序列具有一些重要特征,包括前导肽、α1、α2、α3区、CP/TM/CYT区和保守的半胱氨酸等。Real—timePCR检测结果显示,MHC-Ⅰα基因在各个正常军曹鱼组织中均表达,但表达量各有不同,其中较强的表达于头肾;中等程度表达于鳃、脾和肠;在心、脑和肌肉中表达较弱。 张鹤 茅莉娜 冯娟 管越强 许海东 苏友禄关键词:军曹鱼 全长CDNA 组织特异性表达