贺芳
- 作品数：16 被引量：31H指数：3
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 喜树碱诱导的HL-60细胞凋亡过程中线粒体的变化被引量：2
- 2006年
- 目的:研究喜树碱(CPT)诱导的人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60凋亡过程中线粒体的质量和膜电势的变化。方法:以CPT诱导HL-60细胞凋亡为模型,利用膜联蛋白V(annexinV)-FITC/PI双染流式细胞术,研究HL-60细胞的凋亡和坏死。用DiOC6(3)染色流式细胞术,检测线粒体的膜电势(△ψm)。用NAO染色流式细胞术,检测线粒体的质量。结果:在4×10-6mol/LCPT的诱导下,HL-60细胞(12h)早期的凋亡率为(12.75±4.61)%,对照组为(2.88±2.49)%,二者相比较差异显著(P<0.01);CPT组坏死比率为(3.48±1.67)%,对照组为(0.71±1.10)%(P<0.01)。PI染色的结果显示,HL-60细胞(12h)晚期凋亡细胞的百分率,CPT组为(3.52±1.07)%,对照组为(0.46±1.06)%(P<0.01)。同时观察到,G2/M期细胞出现阻滞,G2/M期细胞的百分率,对照组为(22.46±2.19)%,CPT组为(13.45±1.91)%(P<0.01)。在12h时间点,CPT组线粒体的质量显著低于对照组(P<0.01),低线粒体质量的细胞所占百分率,对照组为(4.53±1.26)%,CPT组为(25.74±2.09)%。同时,CPT组线粒体的膜电势显著下降(P<0.01),CPT组线粒体膜电势降低的比率为(17.71±5.23)%,对照组为(1.64±2.00)%。结论:CPT诱导HL-60细胞凋亡过程中,线粒体的质量和膜电势均有所下降,但其去极化作用增强。
- 贺芳曾耀英王通邢飞跃林羿梁佩燕肇静娴
- 关键词：喜树碱凋亡线粒体
- HIV-1 Vpr蛋白对C8166细胞毒性研究
- 2008年
- 目的利用腺病毒系统研究HIV-1Vpr蛋白在T细胞来源的C8166细胞内的高表达以及细胞内该蛋白对T细胞毒性。方法将表达目的蛋白Vpr的重组腺病毒rAd—vpr和空白载体病毒rAd—vector分别感染对数生长期的C8166细胞，流式细胞术（FCM）检测细胞周期分布、凋亡和坏死。用Hoechst—PI荧光染色观察细胞的凋亡和坏死，JC-1荧光染色测定线粒体膜电势。结果An—nexinV—PI染色及Hoechst—PI染色一致显示HIV-1Vpr能显著诱导C8166细胞凋亡和坏死；PI细胞周期结果表明HIV-1Vpr能阻滞C8166细胞于G2期；JC—1荧光染色法测定HIV-1Vpr致C8166线粒体膜电势下降。结论细胞内HIV-1Vpr介导的T细胞毒性包括线粒体功能障碍、细胞周期的G2期阻滞和细胞的死亡。
- 贺芳曾耀英王通肇静娴臧宁林长乐
- 关键词：重组腺病毒HIV-1VPR细胞死亡
- HIV-1 Vpr蛋白表达介导人T细胞白血病病毒1型转化细胞凋亡及蛋白组学研究
- 目的：构建含HIV—1 vpr基因的重组腺病毒rAd—vpr，通过重组腺病毒感染，在人T细胞白血病病毒1型转化细胞C8166内源性表达HIV—1 Vpr蛋白，研究表达Vpr蛋白诱导C8166细胞周期阻滞、细胞致死效应等功...
- 贺芳
- 关键词：免疫疗法蛋白组学
- 文献传递
- 染料木黄酮与环孢菌素A联合用药对小鼠淋巴细胞体外免疫应答的影响被引量：1
- 2007年
- 研究染料木黄酮(Gen)与环孢菌素A(CsA)联合用药对小鼠体外淋巴细胞增殖、周期及混合淋巴细胞反应的影响,从而为将Gen开发为免疫干预药物以降低CsA的临床用量提供理论依据.以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠淋巴细胞增殖,通过CFDA-SE染色流式细胞术检测荧光强度的变化,用相关软件分析其增殖指数;以碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期的分布情况;MTT法测定体外混合淋巴细胞反应(MLR).结果显示,细胞培养48 h后,ConA诱导下小鼠淋巴细胞与空白对照组相比有明显增殖(P<0.01),5、10μmol/L Gen以及0.02μmol/L CsA均可抑制这种增殖作用,二者联合用药后,这种抑制增殖的作用加强(P<0.01).对细胞周期分析显示,Gen和CsA抑制细胞由G0/G1期向S期转化.MTT法测定的结果显示,二者联合用药后Q值分别为1.82、1.39,对MLR呈协同抑制效应.以上结果表明与单剂量Gen、CsA相比,二者联合使用对ConA诱导的淋巴细胞增殖、细胞周期的阻滞、体外混合淋巴细胞反应的抑制作用更加明显,呈协同效应.
- 叶雪仪曾耀英肇静娴狄静芳贺芳周建国赵令斋
- 关键词：染料木黄酮环孢菌素A混合淋巴细胞反应
- 阻断p38途径对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的影响被引量：3
- 2006年
- 目的研究阻断p38途径对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的胸腺细胞凋亡的影响。方法WesternBlott检测DEX对p38途径的阻断作用。以SB203580(SB)阻断BALB/c小鼠胸腺细胞p38途径,在3、5和7h,利用An-nexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;利用DiOC6(3)/PI双染流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm)和细胞膜完整性变化。结果DEX显著减少了胸腺细胞p38蛋白含量;阻断p38后DEX诱导小鼠胸腺细胞晚期凋亡率显著增加(P<0.01);DEX诱导了胸腺细胞△ψm降低,同时阻断p38途径后,DiOC6(3)阴性PI阳性细胞显著增多(P<0.01)。结论阻断p38后加速了DEX介导的小鼠胸腺细胞凋亡中细胞膜完整性的破坏,该现象可能与线粒体功能有关。
- 王通曾耀英何贤辉邢飞跃梁佩燕贺芳
- 关键词：P38胸腺细胞线粒体
- NOD/SCID小鼠胎盘细胞内细胞因子表达及其与妊娠转归的关系
- 2006年
- 目的:研究Th1和Th2型细胞因子在胎盘淋巴细胞内的表达状况及其与NOD/SCID孕鼠妊娠转归的关系。方法:比较BALB/c和NOD/SCID小鼠孕13.5d胚胎吸收率(RR),采用4色流式细胞术检测胎盘淋巴细胞内Th1型(TNF-α和IL-2)和Th2型(IL-10)细胞因子表达率。结果:虽然NOD/SCID小鼠存在多重免疫缺陷,但BALB/c和NOD/SCID小鼠孕13.5dRR无显著差异;NOD/SCID×NOD/SCID母-胎界面CD8+IL-10+/CD8+细胞百分率显著高于BALB/c×BALB/c妊娠模型(P<0.01),而CD4和CD8阳性细胞内TNF-α和IL-2表达水平均无显著差异。结论:母-胎界面CD8+IL-10+/CD8+细胞百分率自发性升高可能与NOD/SCID小鼠基本正常的生育力有关。
- 贺芳曾耀英林羿陈艺菁罗文亭王通
- 关键词：胎盘细胞因子类免疫缺陷
- 黄芩苷诱导JurkatT细胞凋亡的体外研究被引量：2
- 2008年
- 目的:研究黄芩苷(BA)抑制Jurkat T细胞(人T淋巴细胞白血病细胞株)的生长和诱导其凋亡的作用及机制。方法:以噻唑兰(MTT)比色法测定BA对细胞生长的抑制率;胞内[Ca2+]i和线粒体跨膜电势(ΔΨm)分别用F luo-4/AM和D iOC6(3)荧光探针标记,流式细胞仪检测;PI染色流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率;凋亡细胞形态以Hoechst33342/PI染色后荧光显微镜观察。结果:BA明显抑制Jurkat细胞增殖(P<0.01),并呈时间、浓度依赖性;BA可浓度依赖的诱导Jurkat细胞[Ca2+]i浓度上升、线粒体膜电势ΔΨm降低,将细胞周期阻滞在S期,凋亡率增加,荧光显微镜下可见经BA(100 mg/L)作用的细胞呈现典型的凋亡核固缩表现,胞核呈致密浓染的颗粒状荧光。结论:BA体外显著抑制Jurkat T细胞增殖及诱导其凋亡,其机制可能与胞内[Ca2+]i及线粒体依赖的凋亡通路有关。
- 李林曾耀英宋兵贺芳赖新强黄秀艳
- 关键词：黄芩苷胞内钙离子细胞周期凋亡
- HIV-1 Vpr蛋白表达介导入T细胞白血病病毒1型转化细胞凋亡及蛋白组学研究
- 目的:构建含HIV-1 vpr基因的重组腺病毒rAd-vpr,通过重组腺病毒感染,在人T细胞白血病病毒1型转化细胞C8166内源性表达HIV-1 Vpr蛋白,研究表达Vpr蛋白诱导C8166细胞周期阻滞、细胞致死效应等功...
- 贺芳
- 关键词：蛋白质组学炎症
- 文献传递
- 胸腺细胞和细胞器水平的线粒体膜电势研究被引量：3
- 2006年
- 以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡；利用PI和AnneXin V/PI流式细胞术分别检测细胞晚期和早期凋亡；利用JC-1和DiOC_6(3)/PI在细胞水平检测凋亡中线粒体膜电势(△ψm)变化：抽提线粒体,利用JC-1直接染色技术检测现存线粒体△ψm情况。实验结果显示,DEX显著诱导胸腺细胞早期和晚期凋亡,凋亡细胞主要来自G_0/G_1期；细胞水平可见DEX介导与△ψm相关的J-aggregate和DiOC_6(3)可染性降低,同时介导线粒体数量显著降低,6h细胞膜完整性无显著变化：单纯线粒体检测结果显示,多数线粒体维持正常△ψm。提示,DEX介导胸腺细胞凋亡中线粒体数量降低,现存线粒体多保持着正常△ψm以维持凋亡过程细胞能量供给。
- 王通曾耀英邢飞跃梁佩燕梁兆端贺芳
- 关键词：凋亡细胞水平
- 重组腺病毒HIV-1 vpr基因的构建、表达及其生物学功能的初步研究
- 目的： 研究HIV-1 vpr基因编码的病毒蛋白R(Viral protein R，Vpr)对CD4T淋巴细胞系C8166生物学行为的影响，为进一步了解Vpr的功能和作用机制，及今后研究Vpr引起整个CD4T淋巴...
- 贺芳
- 关键词：重组腺病毒
- 文献传递
