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高活性β-内酰胺酶的分离、表达和性质: 2008年; 应用DNA家族改组方法制备TEM型β-内酰胺酶基因突变文库，利用平皿初筛和琼脂稀释法复筛获得一株酶活力增高的突变体blaTEM^m。带有该突变基因的大肠杆菌，其最低抑菌浓度（MIC）比带有野生型blaTEM的大肠杆菌高24倍（氨苄青霉素）、4-8倍（头孢唑啉）、4-8倍（头孢呋辛）、16-32倍（头孢他啶）、8倍以上（头孢曲松）和4～8倍（头孢噻肟）。在E.coli BL21（DE3）高效表达blaTEM和blaTEM^m，利用离子交换柱层析和凝胶过滤层析对包涵体进行柱上复性和纯化，获得纯度达90％的重组蛋白质。酶动力学分析显示，与野生型蛋白相比，突变蛋白酶促反应的kcat／Km值分别增加1．5倍（青霉素G）、4．4倍（氨苄青霉素）、3．1倍（头孢唑啉）、2．8倍（头孢他啶），但是对头孢噻肟的kcat／Km下降了2．5倍。DNA序列分析显示blaTEM^m发生7处碱基置换，造成4个氨基酸改变，即S59G、R164S、A237T和E240K。应用Swiss-Pdb Viewer3．7软件预测蛋白质的三维结构，显示这些突变不影响酶的活性中心，但是变异造成的蛋白质空间结构的细微变异增加了酶和底物的亲和性。; 赖飞田宇鑫赵峰王震吕建新; 关键词：Β-内酰胺酶最低抑菌浓度耐药

温州地区CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的流行性及CTX-M-3酶特性分析: 到目前为止,在已报道的 ESBLs 中,各地方流行的 CTX-M 亚型不同,阿根廷主要为 CTX-M-2型、日本主要为 CTX-M-44型,我国华南地区以 CTX-M-14、CTX-M-3和 CTX-M-9多见,我国台湾...; 高国栋王震吕建新林镯赖飞田宇鑫; 文献传递

重组EGF-IL-18融合蛋白的表达优化与分离纯化: 目的:构建 EGF-IL-18融合蛋白的原核表达系统,优化表达 EGF-IL-18 融合蛋白,分离纯化有活性的 EGF-IL-18。方法:将人 EGF-IL-18融合蛋白基因克隆到 pET12a(+)和 pET26b(+...; 赵峰彭颖吕建新王震赖飞; 关键词：分离纯化复性; 文献传递

温州地区CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的流行性及CTX-M-3 酶特性分析: 到目前为止，在已报道的ESBLs中，各地方流行的CTX-M亚型不同，阿根廷主要为CTX-M-2型、日本主要为CTX-M-44型，我国华南地区以CTX-M-14、CTX-M-3和CTX-M-9多见，我国台湾主要为CTX-M...; 高国栋王震吕建新林镯赖飞田宇鑫; 关键词：CTX-M型基因型检测; 文献传递

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赖飞