赵光宇
- 作品数：73 被引量：101H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 具备中和中东呼吸综合征冠状病毒活性的单克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的制备并鉴定对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)具有中和活性的单克隆抗体,为进一步开展MERS-CoV感染与免疫保护机制研究,以及发展诊断与治疗手段奠定基础。方法 MERS-CoV S蛋白受体结合区与人IgG Fc片段融合表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过ELISA筛选出阳性克隆,随后通过多次亚克隆筛选出稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定;通过MERS-CoV假病毒及活病毒中和试验筛选出中和单抗。结果获得了10株能够稳定分泌抗原特异性单抗的杂交瘤细胞株。制备的腹水单抗亚类均为IgG1;其中7株单抗抗体ELISA效价达到10 000以上,并有1株单抗对MERS-CoV具有良好的中和活性。结论本研究获得了1株对MERSCoV具有良好中和活性的单克隆抗体。
- 于虹邱洪杰潘婷李琳唐健郭彦孙世惠寇志华赵光宇周育森
- 关键词：单克隆抗体中和活性
- 一种抗SARS－CoV IgY抗体及其制备方法
- 本发明的公开一种新型的用于治疗、预防SARS－CoV的鸡抗SARS－CoV IgY抗体蛋，同是本发明公开一种新型的用于治疗、预防诊断SARS－CoV的鸡抗SARS－CoV IgY抗体。本发明抗体能特异消灭SARS－CoV...
- 王希良杜新安石辛甫张松乐赵光宇田光刘士山朱和平周华
- 新发病毒(SARS和H5N1病毒)新型表位性疫苗研究
- 新发病毒性疾病是影响人类健康的重要传染病,防治该类疾病的有力措施是发展预防该类病毒感染的疫苗。SARS和H5N1病毒是两种烈性的新发病毒,已经或正在对人类的健康带来危害。SARS和高致病禽流感病毒都是以急性感染为主的传染...
- 周育森赵光宇孙世惠王弋嘉陈万荣
- 关键词：SARSH5N1病毒结构蛋白传染病防治
- 一种植物蛋白的肿瘤抗原活性的研究被引量：4
- 2004年
- 目的探讨一种植物蛋白是否具有肿瘤抗原活性。方法用淋巴细胞转化实验测定植物蛋白对正常人和食管癌患者淋巴细胞的刺激指数。将131Ⅰ标记植物蛋白免疫兔抗体注射给Lewis肺癌荷瘤小鼠,然后测定不同时段不同单位组织的放射性剂量占注射剂量的百分率(％ID/g)。结果该植物蛋白对食管癌患者淋巴细胞具有特异性刺激作用。单位肿瘤组织的％ID/g明显高于心、肝、脾、肾、肌肉等组织。结论该植物蛋白具有肿瘤抗原活性,其抗体可望用于肿瘤靶向治疗的载体。
- 邓学峰赵光宇单保恩郑振海丁献义王增林
- 关键词：植物蛋白肿瘤抗原靶向治疗
- 一种具有较高免疫原性的融合蛋白及其应用
- 本发明公开了一种具有较高免疫原性的融合蛋白及其应用。该融合蛋白，是在S1的氨基末端或羧基末端融合抗原表位肽得到的蛋白质；所述S1是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序...
- 周育森赵光宇管洁肖文珺李军锋何玉先于虹陈万荣
- 可调控肝脏特异性表达HCV全基因转基因小鼠模型的建立
- 2015年
- 目的:构建一种可调控肝细胞特异性表达丙型肝炎病毒(HCV)全基因的小动物模型。方法:将9.6 kb的HCV全长基因JFH1插入Tet-on系统效应表达载体p TRE2中,并在HCV全基因3'端插入丁型肝炎病毒(HDV)核酶序列,从而构建转基因载体p TRE2-JFH1(HCV);将该转基因载体线性化后显微注射获得整合有HCV全基因的TRE2-HCV首建鼠;将该阳性鼠与本室保存的Alb-rt TA转基因小鼠杂交,获得肝细胞白蛋白启动子调控HCV全基因表达的Tet-on-Alb-HCV双转基因小鼠;在强力霉素(Dox)诱导后通过PCR、Western印迹、免疫组化等方法鉴定转基因小鼠HCV基因整合及HCV蛋白在肝组织中的表达;实时定量PCR检测小鼠血清及肝组织中的HCV滴度;用HCV反义小分子药物anti-mi R122评价该模型在药物评价中的应用。结果:获得了整合rt TA基因和HCV全长基因的双转基因小鼠;Dox诱导下,该转基因小鼠可在肝组织长期特异性表达HCV全长基因,小鼠血清中可检测到HCV的RNA;分子药物anti-mi R122可降低血清中的HCV滴度。结论:构建了可调控肝组织特异性表达HCV全基因的转基因小鼠模型,该小鼠模型可应用于HCV药物筛选和评价研究。
- 高同同刘晨风姜玉庭王友亮吴小红曾扬赵亚光郭彦于虹赵光宇高基民孙世惠周育森
- 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠药物评价
- 表达miR-192的重组腺病毒的构建及其在肝细胞中的表达分析被引量：1
- 2013年
- 目的:构建表达miR-192的重组腺病毒,感染HepG2细胞建立miR-192高表达的细胞模型,以研究miR-192在肝细胞中的功能。方法:将miR-192前体基因插入腺病毒穿梭载体pAdTrack,构建miR-192穿梭载体pAdTrack-miR-192,经线性化和同源重组,构建重组腺病毒载体pAd-miR-192;线性化后,在QBI-293A细胞中进行病毒包装;用包装成功的重组腺病毒感染HepG2细胞,72 h后收集细胞,提取总RNA,逆转录后进行定量PCR,检测miR-192和潜在靶分子视网膜母细胞瘤基因1(RB1)mRNA的变化。结果:获得670 bp的miR-192前体基因,经过穿梭载体后重组构建表达miR-192的腺病毒载体pAd-miR-192;将pAd-miR-192转染QBI-293A细胞,第8 d细胞病变及荧光的表达结果表明重组腺病毒成功包装;感染HepG2细胞后,定量PCR检测表明miR-192的表达较对照增加了835.87倍,同时检测到细胞中RB1 mRNA的表达显著降低。结论:构建了高效表达miR-192的腺病毒,建立了miR-192高表达的肝细胞模型,证明在肝细胞中抑制的RB1是miR-192靶分子,为后续miR-192在肝细胞中功能的研究奠定了基础。
- 代晓朋李军锋张红飞张伟赵光宇于虹郭彦周育森
- 关键词：腺病毒载体肝癌细胞
- 抗GPC3 C端抗体辅助杀伤肝癌细胞HepG2的活性检测及抗原表位鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的：检测制备的7株抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）蛋白C端单克隆抗体是否具有辅助杀伤肝癌细胞的活性，并研究其识别的抗原表位。方法：用细胞增殖法检测制备的抗体是否具有抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）活性；用生物信息软件分析GPC3蛋白C端（359～580残基）的结构及抗原特征，并据此将其分为4个截短片段，将克隆的各基因片段分别连接到原核表达载体pGEX-4T-1中，进行蛋白表达和纯化，用间接ELISA和Western印迹分析GPC3C端单克隆抗体的表位识别情况。结果与结论：制备的7株单克隆抗体对肝癌细胞HepG2均具有不同程度的辅助杀伤作用，其中5号单克隆抗体的辅助杀伤效果最好；表达并纯化了GPC3C端4个截短片段的重组蛋白；间接ELISA和Western印迹检测结果表明，7株抗体均特异性结合GPC3蛋白的473～525残基区段。
- 张红飞张慧娜李军锋于虹代晓朋赵光宇郭彦王凯娟张建营周育森
- 关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖3肝癌细胞HEPG2
- 禽流感病毒感染小鼠模型病理损伤及抗原定位研究被引量：1
- 2009年
- 目的通过建立高致病性禽流感H5N1病毒感染小鼠模型,研究病毒感染致小鼠组织病理损伤、病毒抗原在体内分布及复制特点,为禽流感病毒传播途径及致病机理研究提供实验依据。方法采用A/vietnam/1194/2004(H5N1)病毒株,滴鼻感染BALB/c小鼠,5 d后取小鼠肺、脑、脾、肠、心、肝、肾等组织,制备石蜡切片并进行组织病理损伤和抗原定位研究。结果小鼠肺组织表现为弥漫性肺损伤,脑组织出现轻度炎症反应,脾组织结构完整但脾小体可见凋亡细胞,其它脏器组织结构未查见组织病理损伤;利用M2、NS1单抗,采用免疫组织化学方法检测发现小鼠肺、脑、肠等均有M2、NS1抗原分布。结论高致病性H5N1病毒感染可在小鼠肺、脑、肠等多种组织中复制,引起严重的肺组织病理损伤及轻度的脑组织及脾组织病理损伤。
- 孙世惠赵光宇于虹郭彦吴小红范薇曾林周育森
- 关键词：病理损伤病毒复制
- 重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的佐剂活性被引量：1
- 2011年
- 目的探讨重组蛋白ASP-1对高致病性禽流感M2e疫苗分子的免疫佐剂作用。方法在大肠杆菌原核表达系统中获得融合了pET32(+)表达载体蛋白trxA和M2e三联体的重组蛋白TrxA-M2e3作为高致病性禽流感M2e疫苗分子;在大肠杆菌中截短表达盘尾丝虫活化相关蛋白ASP,获得截短片段ASP-1作为佐剂蛋白。将纯化后的重组蛋白TrxA-M2e3和ASP-1混合或者单独使用,免疫BALB/c小鼠后检测血清中M2e抗体水平。使用不同进化分支H5N1病毒对免疫小鼠进行致死性攻击,检测交叉免疫保护效果。结果获得了纯化的重组蛋白TrxA-M2e3和ASP-1;与TrxA-M2e3单独免疫组相比,应用佐剂蛋白ASP-1可显著提高免疫小鼠血清中M2e特异性IgG抗体滴度(P<0.05)。在不同进化分支H5N1病毒的致死性攻击后,应用ASP-1与TrxA-M2e3联合免疫小鼠的肺组织病毒复制得到有效抑制,免疫小鼠全部存活。而其它免疫组小鼠全部死亡。结论 M2e是发展新型禽流感疫苗应对病毒变异的理想靶抗原分子,而重组蛋白ASP-1可以为一种新型佐剂在M2e疫苗分子诱导交叉免疫保护中发挥关键作用。
- 俞建萍赵光宇肖文珺郭彦孙世惠寇志华于虹温晶何后军周育森
- 关键词：高致病性禽流感疫苗佐剂
