陶凌
- 作品数：121 被引量：427H指数：8
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 调控NFκB表达对糖尿病冠状动脉血管平滑肌内MuRF1和BK-β1表达的影响
- 目的:研究调控核因子κB受体活化因子(NFκB)表达对糖尿病冠状动脉血管平滑肌细胞(VASMC)内肌环指蛋白1(MuRF1)和大电导钙激活钾通道β1亚基(BK-β1)表达的影响.方法:采用链脲霉素腹腔内注射建立糖尿病小鼠...
- 吴宾陶凌易甫
- 抗TNF-α中和抗体通过升高脂联素水平减轻小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用被引量：2
- 2012年
- 目的:阐明心肌缺血/再灌注(MI/R)时,脂联素(APN)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系,以及使用中和抗体阻断TNF-α可否提高血浆APN,进而发挥心肌保护作用。方法:96只成年雄性C57小鼠和36只ob/ob小鼠均采用30 min缺血/再灌注(I/R)建立MI/R模型。96只C57小鼠分为假手术组、手术+盐水对照组及手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=32);36只ob/ob小鼠分为ob/ob假手术组、ob/ob手术+盐水对照组及ob/ob手术+抗TNF-α中和抗体治疗组(n=12)。假手术或缺血20 min后,腹腔注射给予单次抗TNF-α中和抗体或盐水干预。分别采用ELISA检测TNF-α与APN血浆水平;小鼠心脏超声评估心脏LVEF;伊文氏蓝/TTC染色检测心脏梗死面积;以及TUNEL/Caspase-3活性检测观察心肌细胞凋亡。结果:血浆ELISA测定发现,MI/R后,小鼠血浆TNF-α水平在再灌后1 h即显著升高,后缓慢下降。注射抗TNF-α中和抗体可在再灌后1 h即中和TNF-α(P<0.01),同时在再灌注3 h、8 h、1 d及3 d后4个时间点,较给予盐水对照显著升高血浆APN(P<0.01)。通过小鼠心脏超声、伊文氏蓝/TTC染色和TUNEL/Caspase-3活性检测发现,与给予盐水的对照相比,腹腔注射抗TNF-α中和抗体可提高小鼠的心肌功能(P<0.05)、减少梗死面积(P<0.01)及心肌细胞的凋亡(P<0.01)。而在ob/ob小鼠中,通过以同样的实验方法证实,单次注射抗TNF-α中和抗体已不能提高血浆APN的含量,其减轻心肌损伤的作用同样被显著削弱,但给予APN球状片段仍可发挥心肌保护作用。结论:以抗TNF-α的中和抗体阻断TNF-α可逆转MI/R后血浆APN的降低并发挥心肌保护作用,提示抗TNF-α中和抗体发挥的心肌保护作用可能部分通过提高APN实现。
- 高超刘毅杨强孙璐杨璐陶凌王海昌
- 关键词：脂联素小鼠
- 脂联素通过APPL1减轻缺氧/复氧损伤诱导的心肌细胞凋亡被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨APPL1在脂联素(adiponectin,ANP)拮抗SD乳鼠心肌细胞(neonatal cardiomyocytes)缺氧/复氧(H/R)损伤中的作用。方法:分离SD乳鼠心肌细胞并培养。通过对培养的心肌细胞H/R损伤模拟缺血/再灌注(simulated ischemia reperfusion,SI/R)后,随机分为对照组、H/R组、H/R+APN组及H/R+APN+APPL1 RNAi组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的生存率,原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞的凋亡,Westernblot检测APPL1蛋白的表达。结果:与对照组相比,H/R组吸光度值明显降低(P<0.01),凋亡指数(AI)显著上升(P<0.01)。与对照组和H/R组相比,H/R+APN组中APPL1的表达明显上升(P<0.05)。以RNAi抑制APPL1表达后,与H/R+APN组相比,H/R+APN+APPL1 RNAi组凋亡指数率(%)明显上升[(28.32±4.13)%vs.(9.78±2.16)%,P<0.01]。结论:APN可显著抑制H/R损伤诱导的心肌细胞凋亡,促进心肌细胞存活,其拮抗作用与上调APPL1蛋白的表达相关。
- 李冬冬张海锋孙璐张荣庆王海昌陶凌
- 关键词：脂联素心肌细胞乳鼠
- Irisin对2型糖尿病小鼠血糖的影响及机制被引量：8
- 2014年
- 目的:研究Irisin对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠血糖的影响及机制。方法:采用喂养高脂饮食结合腹腔注射小剂量的链脲佐菌素(STZ)建立T2DM小鼠模型。Western blot检测Irisin经腹腔注射后的血浆水平。血糖仪检测T2DM小鼠经腹腔注射Irisin后30、60、90、120、150、180和210 min的血糖水平。Western blot检测注射Irisin后肝脏组织中葡萄糖-6-磷酸酶(G6pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCK)的表达。结果:1与正常饮食(ND)组相比,高脂饮食(HD)组小鼠在第6周时血糖糖水平明显增加(P<0.05),且葡萄糖耐量降低,说明T2DM小鼠造模成功。2与对照(Control)组相比,Control+Irisin组血浆中的Irisin蛋白水平明显升高(P<0.05)。3与T2DM+Vehicle(生理盐水)组相比,T2DM+Irisin组血糖于30 min时开始降低,60 min时出现显著差异(P<0.05),到120 min时下降到最低点,以后逐渐升高。4与Control组相比,T2DM组G6pase和PEPCK的水平升高(P<0.05),经外源给予Irisin后,G6pase和PEPCK的水平下降(P<0.01)。结论:Irisin对T2DM小鼠具有降低血糖的作用,这可能与降低T2DM小鼠肝脏糖异生有关。
- 黄卫东刘毅辛超杜朝升张君毅宋延彬陶凌
- 关键词：糖尿病糖异生小鼠
- 白黎芦醇减轻Ⅱ型糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤的作用被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨白黎芦醇(RSV)减轻Ⅱ型糖尿病(T2DM)小鼠心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的作用及其机制。方法:采用喂养高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM小鼠模型。造模成功后立即给予RSV(10 mg/kg)每日1次灌胃,连续3周。实验分为正常假手术组、正常手术对照组、DM假手术组、DM手术对照组、RSV组、CpC组,每组20只。手术方式采用心脏冠状动脉左前降支结扎30 min、再灌注3 h或24 h。抑制剂组于术前1 h腹腔注射Compound C(20 mg/kg)。用TTC染色法检测心肌梗死(MI)面积,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,ELISA法检测caspase-3活性、血浆脂联素(APN)水平,Western blot法检测AMPK、p-AMPK及脂肪组织APN的含量。结果:喂养高脂饮食结合小剂量STZ能够成功建立T2DM小鼠模型。与DM手术对照组相比,RSV饲喂能够减轻T2DM小鼠MI/RI,减小MI面积、减少心肌细胞凋亡(P<0.01),降低caspase-3的活性(P<0.05)。RSV还能够上调脂肪组织APN表达,逆转T2DM小鼠低APN血症(P<0.01)。AMPK抑制剂Compound C可显著减弱RSV的心肌保护作用(P<0.05)。结论:RSV可通过逆转T2DM小鼠的低脂联素血症,在MI/RI时发挥对心肌的保护作用。
- 杨强王海昌高超冯世栋孙璐刘毅陶凌
- 关键词：白藜芦醇脂联素小鼠
- 脂联素通过AMPK调节HepG2细胞中支链氨基酸的代谢
- 2014年
- 目的:探讨脂联素(APN)对HepG2细胞支链氨基酸(BCAA)分解代谢的影响及其作用机制。方法:将培养的HepG2细胞系随机分为对照组、APN组、APN+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C,CpC)组(APN+CpC)组和AMPK激动剂(AICAR)组。用Western blot检测AMPK、P-AMPK、BCKD E1α(BCAA分解代谢过程中的关键酶,磷酸化时为失活状态)及P-BCKD E1α蛋白的表达,用ELISA方法检测培养HepG2细胞上清中BCAA的含量。结果:与对照组相比,APN组和AICAR组均可以显著上调细胞P-AMPK的水平(P<0.05,P<0.01),显著降低细胞p-BCKD E1α及上清中BCAA的水平(P<0.05,P<0.01)。与APN组比较,APN+CpC组,其细胞内PAMPK水平显著下降(P<0.01),P-BCKD E1α及上清中BCAA的水平明显上升(分别为P<0.05及P<0.01)。结论:APN可显著促进HepG2细胞BCAA的分解代谢,其作用机制与AMPK磷酸化作用的上调相关。
- 杜朝升朱迪邹倩廉坤洪志博周芬陶凌
- 关键词：脂联素AMPKHEPG2细胞系支链氨基酸代谢
- 线粒体融合蛋白2在心血管疾病中的研究现状被引量：4
- 2015年
- 线粒体是一个处于不断地融合与分裂过程中的动态细胞器。线粒体融合蛋白2(Mfn2)作为广泛分布于线粒体外膜和线粒体结合内质网膜上具有多重功能的蛋白,参与维持正常细胞功能。除了参与线粒体融合外,Mfn2还能够调节线粒体代谢、促进损伤线粒体的自噬、增强线粒体与内质网交流、维持内质网功能及通过调控线粒体外膜通透性和渗透性钙转运孔道的启闭参与细胞死亡过程等。另外,Mfn2基因还可通过调控Ras-Raf-ERK/MAPK和Ras-PI3K-Akt信号通路分别参与调控血管平滑肌细胞的增殖和凋亡过程。Mfn2的这一系列重要的生物学功能有助于其参与高血压、肺动脉高压、动脉粥样硬化、急性缺血/再灌损伤、扩张性心肌病、心肌肥大、心衰和肥胖糖尿病等多种心血管疾病的发生发展过程。研究Mfn2与心血管疾病的相关性也许能为临床提供一个心血管疾病潜在治疗的靶点。因此,本文将综述Mfn2在心血管疾病相关研究中的现状。
- 张洋洋裴海峰段海霞贾敏王强杨永健陶凌
- 关键词：线粒体融合蛋白2内质网心血管疾病
- 缺氧前、后处理1-磷酸鞘氨醇对心肌细胞缺氧/复氧损伤拮抗作用的差异及相关机制被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨1-磷酸鞘氨醇（S1P）缺氧前、后处理对心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤拮抗作用的差异及相关机制。方法：分离SD乳鼠（1—2d龄）心肌细胞进行体外培养。对培养的心肌细胞进行H／R处理以模拟心脏缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，r／R）损伤。将培养的心肌细胞随机分为对照组、H／R组、H／R＋SIP缺氧前处理（H／R’pre—S1P）组及I-I／R＋SIP缺氧后处理（I-I／R＋post—S1P）组，采用四甲基偶氮唑蓝（methylthiazolyltetrazo｜ium。MTT）比色法检测心肌细胞的活力，乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase，LDH）检测试剂盒检测培养基中LDH的水平，caspase-3活性检测试剂盒检测心肌细胞中caspase．3的活性，Westernblot检测ATP激活的蛋白激酶（AMPK）、激活的苏氨酸激酶（Akt）、细胞外信号调节激酶1／2（ERKl／2）蛋白磷酸化水平及SIP裂解酶．1（SIPlyase1，SPLl）蛋白表达的水平。结果：与对照组相比，I-1／R组心肌细胞活力显著降低（P〈0．01），培养基中LDH的浓度和细胞中easpase-3的活性显著增高（P〈0．01）。S1P缺氧前处理可明显增加H／R处理后心肌细胞的活力（P〈0．01），减少LDH释放和caspase-3的活性（P〈0．01）；而I-I／R＋post—S1P组的各项指标与H／R组比较均无明显差异。Westernblot检测发现，S1P缺氧前处理可明显增高心肌细胞中AMPK、Akt和ERkl／2磷酸化的水平（P〈0．05），而SIP缺氧后处理未激活AMPK、Akt和ERKl／2生存信号。Westernblot检测发现，缺氧处理组心肌细胞中SPLl表达的水平较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：缺氧前用S1P处理可激活AMPK、Akt、ERKl／2生存信号，显著减少心肌细胞凋亡，增加细胞的存活率，减轻心肌细胞H／R损伤；而S1P缺氧后处理不能发挥以上保护作用，其机制可能是缺氧处理导致心肌细胞SPLl的表达上调，通过降解SIP而减弱了其介导�
- 张富洋周芬闫文俊王瀚陶凌
- 关键词：1-磷酸鞘氨醇缺氧复氧损伤乳鼠
- 支链氨基酸促进高脂诱导的小鼠肝脏胰岛素抵抗被引量：1
- 2016年
- 目的探讨支链氨基酸(Branched chain amino acids,BCAA)对高脂诱导胰岛素抵抗的影响。方法将60只野生C57BL/6J小鼠随机分成4组,分别给予正常饮食+普通饮水(ND)组,正常饮食+含50 g/L BCAA饮水(ND/BCAA)组,高脂饮食(HD)组,高脂饮食+含50 g/L BCAA饮水(HD/BCAA)组,喂养18周,仔细观察小鼠生活状态并每周记录小鼠体质量,18周后进行葡萄糖耐量(IPGTT)和胰岛素耐量(ITT)实验,检测小鼠血清BCAA和胰岛素水平,Western blot检测小鼠肝脏胰岛素信号通路关键分子IRS1及其磷酸化水平〔p-IRS1(ser307)〕、AKT及其磷酸化水平〔p-AKT(ser473)〕。结果 1BCAA抑制高脂诱导的小鼠体质量增加,表现为HD/BCAA组小鼠体质量增长比HD组缓慢(P<0.05,P<0.01);ND/BCAA组和ND组体质量增长无明显差异;2与ND组相比,ND/BCAA组小鼠血清BCAA浓度无明显升高,HD组血清BCAA水平升高(P<0.05);与HD组相比,HD/BCAA组血清BCAA浓度进一步升高(P<0.05);3与ND组相比,ND/BCAA组小鼠血清胰岛素、IPGTT和ITT均无明显改变;与HD组相比,HD/BCAA组血清胰岛素水平更高,IPGTT和ITT均明显受损(P<0.05);4Western blot检测显示:ND组和ND/BCAA组小鼠肝脏p-IRS1(ser307)和p-AKT(ser473)水平无明显改变;与ND组相比,HD组小鼠p-IRS1(ser307)上调(P<0.05),IRS1、p-AKT(ser473)均下调(P<0.05,P<0.01);与HD组相比,HD/BCAA组小鼠肝脏p-IRS1(ser307)进一步上调(P<0.05),p-AKT(ser473)水平进一步下调(P<0.01)。结论正常饮食单纯补充BCAA不影响小鼠肝脏胰岛素敏感性,BCAA能够促进高脂诱导的小鼠肝脏胰岛素抵抗。
- 赵会寿廉坤闫凤郭雄黄冲刘朝中陶凌
- 关键词：支链氨基酸2型糖尿病胰岛素抵抗
- 脂联素抑制炎症小体NLRP3表达减轻高糖高脂诱导内皮细胞损伤被引量：1
- 2016年
- 目的研究脂联素(APN)是否通过抑制炎症小体NLRP3表达减轻高糖高脂所致的内皮细胞损伤。方法将培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)分为6组:对照组、高糖高脂组、对照+NLRP3 siRNA组,高糖高脂组+NLRP3 siRNA组,对照+APN组,高糖高脂+APN组。培养48 h后检测细胞存活率、凋亡率、炎症小体NLRP3表达水平。结果与对照组相比,高糖高脂组细胞存活率显著下降,细胞凋亡显著升高,炎症小体NLRP3表达水平显著升高(均P<0.05);炎症小体NLRP3 siRNA可有效的抑制炎症小体NLRP3的表达,改善高糖高脂引起的内皮细胞损伤(均P<0.05);APN能抑制高糖高脂引起的炎症小体NLRP3表达增多,进而减轻高糖高脂引起的内皮损伤(均P<0.05)。结论炎症小体NLRP3表达增多是高糖高脂诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的内在机制,而脂联素可以通过抑制炎症小体NLRP3的过度表达发挥内皮保护作用。
- 张静隆朱迪王贺林辛超李燕刘毅陶凌
- 关键词：脂联素人脐静脉内皮细胞高糖高脂
