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靳桂英
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
供职机构:
复旦大学生命科学学院生物化学与分子生物学系
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
杨青
复旦大学生命科学学院生物化学与...
言君凯
复旦大学生命科学学院生物化学与...
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杨青
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靳桂英
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言君凯
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年份
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2014
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促红细胞生成素(EPO)对叶酸在Caco-2细胞中跨膜转运的影响
被引量:2
2014年
目的采用人结肠腺癌细胞系(human colon adenocarcinoma cell line)Caco-2单细胞层模型观察促红细胞生成素(erythropoietin,EP0)对叶酸跨膜转运的影响。方法采用Caco-2单层细胞模型,观察不同剂量EPO(0.3、1、3U/mL)处理对叶酸在摄取与外排双向转运方面的影响。通过realtime-PCR与Westernblot观察EPO处理对质子偶联的叶酸转运体(protoncoupledfolatetransporter,PCFT)、还原叶酸载体(reducedfolatecarrier,RFC)以及多药耐药相关蛋白2(muhidrugresistance-associatedprotein2,MRP2)表达的影响。结果EPO在剂量0.3~3U/mL范围内可剂量依赖地增加叶酸在摄取方向的转运,增幅分别为31.6%、61.5%和120.5%。高剂量EPO(3U/mL)对叶酸在外排方向的转运也具有促进作用,增幅为56.9%,而中低剂量EPO(1、0.3U/mL)对叶酸外排无明显作用。叶酸转运体PCFT、RFC及MRP2均受EPO影响而表达上调,并呈剂量依赖和时间依赖关系。结论EP0可上调叶酸的摄取并呈剂量依赖关系,高剂量EPO对叶酸的摄取与外排具有双向促进作用。
言君凯
靳桂英
李豪男
杨青
关键词:
叶酸
CACO-2细胞
siRNA干扰Caco-2细胞鞘磷脂合酶2(SMS2)基因对药物转运体的影响
2014年
目的研究鞘磷脂合酶2(sphingomyelin synthase 2,SMS2)缺损对人结肠癌细胞(colon cancer cell,Caco-2)中药物转运体P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的表达与功能的影响。方法 SMS2特异性siRNA转染至Caco-2细胞。采用RT-PCR和real-time PCR检测SMS2-特异性siRNA的干扰效率;采用Western blot法检测siRNA转染后P-gp和MRP2蛋白表达的变化;采用胞内蓄积试验,通过HPLC检测P-gp及MRP2专一性底物罗丹明123及普伐他汀的蓄积含量,分析下调SMS2水平对Caco-2细胞中P-gp及MRP2功能的影响。结果应用siRNA下调SMS2水平后,P-gp和MRP2的蛋白质水平均显著下调;胞内蓄积实验结果显示罗丹明123及普伐他汀的蓄积量明显增加,说明P-gp和MRP2的外排功能减弱。结论SMS2基因表达下调对Caco-2细胞中P-gp和MRP2的表达以及功能均有显著影响。
靳桂英
杨青
关键词:
SIRNA干扰
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