韩伟国
- 作品数:4 被引量:10H指数:3
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 骨髓增生异常综合征骨髓细胞凋亡与肿瘤坏死因子α的研究被引量:4
- 2001年
- 目的 探讨骨髓增生异常综合征 (MDS)患者骨髓细胞凋亡及髓内肿瘤坏死因子α(TNFα)水平 ,初步揭示MDS无效造血机制。方法 采用TUNEL法检测 2 6例MDS及 10例正常健康对照组新鲜骨髓单个核细胞 (BMMNC)凋亡 ,RT PCR探讨BMMNC中TNFαmRNA表达 ,ELISA法测定骨髓上清液TNFα蛋白水平。结果 早期MDS(RA +BM原始细胞 <10 %RAEB)患者的骨髓细胞凋亡率明显增加 ,进展期MDS(BM原始细胞 >10 %RAEB +RAEB t)骨髓细胞凋亡率与对照组无显著差异 ,凋亡累及各阶段幼稚粒细胞及有核红细胞。早期MDS细胞凋亡程度与骨髓增殖程度有关。 5 8% (15 / 2 6 )MDS表达TNFαmRNA ,77% (2 0 / 2 6 )MDS髓内TNFα蛋白升高 ,早期MDS髓内TNFα水平与凋亡呈正相关 ,并于外周血血红蛋白 (Hb)量呈负相关。结论 早期MDS骨髓细胞凋亡增加 ,随病情演变 ,凋亡逐渐下降 ,这可能与异常克隆逃逸凋亡有关 ,髓内TNFα增加是骨髓细胞发生凋亡的机制之一。
- 李大启林果为韩伟国王小钦
- 关键词:骨髓增生异常综合征细胞凋亡肿瘤坏死因子Α骨髓
- 人线粒体tRNA^(Leu(UUR))及其突变体的基因克隆、表达和纯化被引量:2
- 2000年
- 将化学法合成的人线粒体tRNALeu(UUR)及其突变体(tRNALeu(M))基因分别连接到载体pGEM-9zf (?)中, 并转化到大肠杆菌JM109中得到两个转化体分别为Leu-W和Leu-M. 在IPTG的诱导下, tRNALeu(UUR)和tRNALeu(M)的表达量可达总小分子RNA的19.10%和17.76%. 经DEAE-sepherose CL4B柱层析可使它们的纯度提高3倍. 最后用15%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化, 并用大肠杆菌亮氨酰tRNA合成酶(LeuRS)分别测定了它们的氨酰化反应动力学常数. 结果显示, mtRNALeu(M)的Kcat / Km值约为mtRNALeu(UUR) 的1/5, 提示该突变可使mtRNALeu(UUR)的氨基酸接受能力明显下降.
- 韩伟国陈莉刘静查锡良金由辛王德宝
- 关键词:突变体基因克隆纯化
- 人线粒体tRNA^(Leu(UUR))基因A3243G点突变对其亮氨酰化活性的影响被引量:4
- 2003年
- 化学法合成人线粒体野生型与A3243G点突变型tRNA^(Leu(UUR))基因,体外转录生成相应的tRNA^(Leu(UUR)),表达并纯化人线粒体亮氨酰tRNA合成酶(mtLeuRS),用mtLeuRS催化野生型与突变型tRNA^(Leu(UUR))与亮氨酸结合,分别检测两种类型tRNA^(Leu(UUR))的氨酰化动力学常数。结果表明,野生型tRNA^(Leu(UUR))的K_m/K_(cat)仅为突变型tRNA^(Leu(UUR))的63.9%,A3243G点突变使tRNA^(Leu(UUR))接受亮氨酸的能力明显下降,提示此为A3243G点突变致病机制之一。
- 汪振诚王学敏金由辛缪明永韩伟国焦炳华
- 关键词:基因点突变
- 骨髓增生异常综合征患者Fas、FasL和FAP-1基因的表达被引量:3
- 2001年
- 李大启林果为韩伟国王小钦
- 关键词:骨髓增生异常综合征FASFASLFAP-1