黄志坚
- 作品数:48 被引量:326H指数:10
- 供职机构:中山大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目广东省科技厅资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 基于细菌/真菌相互作用的红树林内生真菌活性菌株筛选
- 2017年
- 为筛选出具有抑菌活性且次级代谢产物丰富的红树林内生真菌,以水产养殖中分离得到的2株病原细菌(Vibrio parahaemolyticus B1和Acinetobacter johnsonii B2)对2014年从珠海淇澳-担杆岛省级自然保护区采集得到的616株红树林内生真菌进行代谢产物抗菌活性和丰富度筛选。利用共培养技术,寻找在共培养后菌落形态特征出现明显变化或形成抑菌圈的内生真菌。通过对纯培养和共培养真菌的粗提物进行抑菌活性检测和HPLC指纹图谱分析,筛选出在共培养条件下可诱导产生新代谢产物且抑菌效果显著提高的菌株,为发现抗菌化合物提供新来源。
- 张柳红李嫣然李云龙宁嘉盈周耀航熊智瑶李佳欣王玉如黄志坚刘岚
- 关键词:红树林内生真菌抑菌活性HPLC指纹图谱次级代谢产物
- 水产养殖生物和养殖环境细菌鉴定及抗生素抗性基因检测被引量:19
- 2012年
- 抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)作为一种新型环境污染物,极大地限制了我国水产养殖业的发展。采用改进的煮沸法,设计快速提取DNA的方法,鉴定194株水产养殖生物和养殖环境中革兰氏阴性菌和阳性菌。选取其中的139株细菌,采用PCR方法研究氟氯霉素抗性基因(floR)、2种磺胺类抗性基因(sul1、sul2)、链霉素抗性基因(str)及甲氧苄啶抗性基因(dfrA20)的存在情况。结果表明,鉴定的194株菌株属于62种不同种属,主要以赖氨酸芽孢杆菌、副溶血性弧菌、中间气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、蜡样芽孢杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、金黄杆菌、假交替单胞菌、霍乱弧菌为主。139株细菌中floR、sul1、sul2、str、dfrA20检测结果呈阳性的分别占11.51%、20.86%、12.23%、10.07%、2.88%,表明水产养殖生物和养殖环境中存在不同程度的抗生素污染。
- 黄志坚陈旭凌路晓峰钟立洪何建国
- 关键词:养殖环境细菌鉴定抗生素抗性基因
- 鱼类线粒体DNA控制区扩增引物及其设计方法和应用
- 本发明公开了一种鱼类线粒体DNA控制区扩增引物及其设计方法和应用。本发明设计的鱼类线粒体DNA控制区扩增引物是一对简并引物,其上游引物MitDl-F有21个碱基:CAC CCY TRR CTCCCAAAG CYA,下游引...
- 黄志坚徐晓鹏唐晶晶张飓何建国
- 一种基于推理决策一致性的自动驾驶规划方法
- 本发明公开了一种基于推理决策一致性的自动驾驶规划方法,包括:获取训练样本数据集,构建第一正负样本集,并计算每个第一正负样本的平均真实token得分;获取训练样本的视觉token和语言token,输入到多模态大语言模型中,...
- 黄志坚 唐涛梁小丹
- 对虾白斑综合症病毒基因诊断试剂盒及检测方法
- 本发明提供一种对虾白斑综合症病毒(WSSV,White Spot Syndrome Virus)的基因诊断试剂盒及检测方法。该试剂盒及检测方法是以根据白斑综合症病毒基因保守区序列设计的两对引物为主体而设计的。本发明采用聚...
- 何建国邓敏黄志坚吕玲翁少萍
- 基于改性壳聚糖纳米胶束的制备和表征及其细胞毒性评价被引量:1
- 2011年
- 背景:壳聚糖进行化学改性以制备性能优良且细胞毒性低、生物相容性高、可降解的聚合物纳米胶束,在药物控释、组织工程等领域获得普遍应用。目的:将强疏水链十八烷氧基接枝到N-琥珀酰壳聚糖分子中,制备结构稳定、粒径较小的聚合物胶束,以获得可适用于药物传递载体或医学生物材料领域的聚合物纳米胶束。方法:用N-琥珀酰壳聚糖和十八烷基缩水甘油醚反应,在壳聚糖衍生物中引入长链疏水基。结果与讨论:成功制备出聚合物纳米胶束,通过红外光谱和1H核磁波谱表征,证实壳聚糖分子中成功引入了琥珀酰基和十八烷氧基。通过动态激光散射测量出其粒径在136~166nm,其临界胶束溶度在1.67×10-3~3.35×10-3g/L,反映出胶束具有非常好的稳定性,而且其临界胶束浓度值和粒径随着疏水链接枝率的增加而减少。MTT法检测说明该胶束对细胞毒性极低。
- 蒋刚彪林钻涛徐晓鹏黄志坚戚何妹
- 关键词:胶束细胞毒性
- 淡水鱼类线粒体DNA D-loop基因的引物设计和应用被引量:18
- 2009年
- 线粒体DNA测序已广泛应用于鉴定和区分种类以及解决系统进化关系问题。本文选取已测定的主要淡水鱼类的线粒体DNA D-loop基因序列进行同源性比较,寻找保守序列,利用简并性原则设计一对通用的简并引物。利用设计的引物对广东省珠江流域主要的淡水鱼类线粒体DNA D-loop控制区基因进行扩增,均能获得单一的目的DNA片断,特异性扩增产物大小为1 kb左右。经测序及与GenBank同源序列的比较,证实为包含线粒体控制区全序列的扩增产物。本研究所设计的引物和应用的方法可以快速地同时对多种鱼类进行大规模的遗传背景分析,鉴定某些难于鉴别的近缘物种,为我国鱼类的种类鉴定、地理种群鉴别及种质资源的评估提供重要的工具。
- 黄志坚徐晓鹏唐晶晶张飓郑锦卿李桂峰何建国
- 关键词:淡水鱼类线粒体DNAD-LOOP引物设计
- 鱼类线粒体DNA控制区扩增引物及其设计方法和应用
- 本发明公开了一种鱼类线粒体DNA控制区扩增引物及其设计方法和应用。本发明设计的鱼类线粒体DNA控制区扩增引物是一对简并引物,其上游引物MitDl-F有21个碱基:CAC CCY TRR CTCCCAAAG CYA,下游引...
- 黄志坚徐晓鹏唐晶晶张飓何建国
- 鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因诊断试剂盒及检测方法
- 本发明提供一种鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV,Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus)的基因诊断试剂盒及检测方法。该试剂盒及检测方法是以根据鳜鱼传染性脾肾坏死病毒基因保...
- 何建国邓敏翁少萍黄志坚吕玲
- 多种细菌与凡纳滨对虾肝胰腺坏死症(HPNS)爆发有关被引量:20
- 2016年
- 近年来,在中国南方超过50%以上的凡纳滨对虾养殖场在养殖30 d后爆发1种疾病,导致80%以上的养殖对虾死亡。患病对虾临床症状为肝胰腺萎缩坏死、活动力减弱、对虾在池塘底部死亡,发病初期水面和池塘边观察不到病虾,因此养殖者通常将该病称为"偷死病"。患病对虾肝胰腺萎缩坏死是主要症状,因此,我们称这种对虾疾病为对虾肝胰腺坏死症(hepatopancreas necrosis syndrome,HPNS)。2012年3月-2013年10月,我们在中国南方广东、海南和广西3个省的12个养殖地区采集具有HPNS症状的凡纳滨对虾进行了组织病理观察、病毒检测与人工感染、细菌分离鉴定与人工感染研究。组织病理学研究表明具有HPNS症状的病虾肝胰腺坏死,在部分区域肝胰腺管细胞消失,肝胰腺小管间结缔组织减少。对305尾HPNS对虾进行11种对虾病毒PCR检测,并采用人工病毒感染方式感染健康对虾,感染对虾不表现HPNS症状。从63尾HPNS病虾的肝胰腺、血淋巴和肠道分离鉴定383株细菌,这些细菌分别属于10个属,49种细菌,每尾对虾均混合感染多种细菌,其中38尾对虾中分离到副溶血弧菌,34尾对虾中分离到蜡样芽孢杆菌,20尾对虾中分离到苏云金芽孢杆菌,19尾对虾中分离到霍乱弧菌。选取副溶血弧菌和苏云金芽孢杆菌分别采用注射和浸泡方式感染健康对虾,感染对虾均出现HPNS症状。结果表明多种细菌与凡纳滨对虾HPNS爆发有关。
- 黄志坚陈勇贵翁少萍路晓锋钟立洪范文洲陈旭凌张慧文何建国
- 关键词:凡纳滨对虾细菌病毒