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人胶质细胞源性神经营养因子基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达: 2011年; 目的在大肠杆菌中表达具有生物活性的人胶质细胞源性神经营养因子（glial cell linederived neurotrophic factor, GDNF）蛋白。方法从人胶质瘤组织中提取总RNA，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription PCR，RT—PCR）方法扩增出GDNFDNA片段，并将经双酶切后的GDNF基因片段直接与表达载体pET28a＋连接，构建重组表达载体pET28a＋GDNF，再将其转入大肠杆菌BL21中进行异丙基-β—D一硫代半乳糖苷诱导表达；采用分子筛层析法对表达产物进行纯化；用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）对其纯度进行鉴定。结果酶切和测序证实，PCR扩增出GDNF基因片段为GDNF成熟肽编码序列；表达产物的SDS—PAGE显示，相对分子质量16000处有一新增蛋白带。结论本研究所构建的原核表达系统可表达人GDNF。; 刘亚珍施雨露王友联刘永茂万全; 关键词：神经生长因子类基因表达逆转录聚合酶链反应

止颤胶囊对帕金森模型大鼠脑内单胺氧化酶B的影响被引量：2: 2010年; 目的探讨止颤胶囊对帕金森病(PD)模型大鼠脑内单胺氧化酶B(MAO-B)表达的调节作用。方法应用脑内定位注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)方法制备部分损伤PD模型;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对PD大鼠脑内MAO-B mRNA的表达进行分析;采用生化法对脑内MAO-B活性进行测定。结果从给药后第10天开始,模型组MAO-B mRNA表达明显增加,扩增产物的量为止颤胶囊的4.728倍,远远高于止颤胶囊组和对照组;MAO-B的活性检测结果与RT-PCR分析结果一致,止颤胶囊对大鼠脑内MAO-B活性抑制率大于40%。结论止颤胶囊对PD大鼠脑内MAO-B mRNA表达和活性有下调作用,可使6-OHDA引起的脑内MAO-B mR-NA高表达得到抑制。; 刘亚珍施雨露刘永茂万全; 关键词：帕金森病

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