于佳
- 作品数:18 被引量:44H指数:4
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- 小鼠卵巢玻璃化冻存过程中FSH干预对卵泡形态及整合素αvβ5表达的影响
- 2013年
- 目的观察促卵泡刺激素(FSH)对整合素αvβ5(αvβ5 Integrin)表达的影响,以便提供FSH干预可提高卵巢玻璃化冻存效率的有关依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢分为:新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻融对照组(VCG)、0.3 IU·mL-1FSH干预玻璃化冻融组(FSH-VG),通过形态学、免疫组织化学技术观察并分析各组正常卵泡百分比及卵巢组织整合素αvβ5蛋白表达情况。结果正常卵泡百分比、αvβ5蛋白表达为FSH-VG最高,与VCG比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠卵巢玻璃化冻存中的FSH干预有助于卵泡结构的维持及整合素αvβ5蛋白的表达。
- 贺晓亮陈杰张红吴昊王燕蓉马文智于佳孙苗张宁
- 关键词:小鼠卵巢促卵泡刺激素玻璃化冻存
- 烷化剂联合应用建立小鼠卵巢早衰模型的初步研究被引量:6
- 2013年
- 目的探索烷化剂联合应用在构建小鼠卵巢早衰(POF)模型的作用及效果。方法以6~7周龄ICR雌性小鼠为研究对象,造模组(MG)为一次性腹腔注射150 mg·kg-1的环磷酰胺和20 mg·kg-1的白消安,对照组(CG)为同体积溶媒DMSO腹腔注射。通过检测小鼠动情周期、血清FSH和E2水平、早期发育卵泡数的变化及抗苗勒管激素(AMH)和生长分化因子9(GDF9)表达水平变化,以判断造模效果。结果 MG组小鼠动情周期紊乱,POF造模成功率为37.5%,造模60 d后与同期对照组比较模型组小鼠血清FSH显著升高(P<0.05),早期发育卵泡数明显减少(P<0.05),卵巢组织AMH表达减少。结论 150 mg·kg-1的环磷酰胺和20 mg·kg-1的白消安一次性腹腔注射后可引起小鼠卵巢内分泌功能紊乱和卵巢组织的明显损伤,导致卵巢早衰。
- 孙苗于佳马文智马会明杨延周蒲静曹秀琴张宁裴秀英王燕蓉
- 关键词:环磷酰胺白消安卵巢早衰小鼠模型
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中重组人卵泡刺激素干预对血管内皮生长因子(VEGF)及整合素αvβ3表达的影响被引量:9
- 2015年
- 目的:观察重组人卵泡刺激素(r FSH)对小鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF)以及整合素αvβ3表达的影响。方法:将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU/L r FSH干预玻璃化冻存组(r FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学观察VEGF和整合素αvβ3在卵巢不同细胞中的定位,Western blotting检测VEGF、整合素αv和整合素β3蛋白表达量。结果:各级卵泡计数、VEGF及整合素β3的蛋白表达均为r FSHVG组优于VCG组(P<0.05),整合素αv的表达组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:玻璃化冻融过程中添加r FSH可以上调VEGF及整合素β3蛋白的表达。
- 张红马文叶杨延周裴秀英吴昊常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军王燕蓉
- 关键词:玻璃化冻存整合素ΑVΒ3
- 促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用
- 2019年
- 目的:分析促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用。方法:选择3周龄雌性小鼠卵巢组织六十枚,等量分为对照组(无促卵泡刺激素干预玻璃化冻存)、空白对照组(新鲜雌性小鼠卵巢组织)和观察组(促卵泡刺激素全程干预玻璃化冻存),观察对比分析三组小鼠卵巢的卵泡百分比差异。结果:观察组小鼠卵巢玻璃化后正常卵泡百分比明显高于对照组,其差异具有统计学意义(P<0.05);对照组小鼠卵巢玻璃化后正常卵泡百分比明显低于空白对照组,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在小鼠卵巢被玻璃化冻存后全程添加促卵泡刺激素进行干预,可对卵巢组织的形态结构起到有效的保护作用,值得被推广使用。
- 王海菲王佳静蒲静刘心蕊潘朋歌李雪杨梦怡于佳
- 关键词:促卵泡刺激素小鼠卵巢玻璃化冻存抗凋亡
- 卵泡刺激素与卵泡刺激素及黄体生成素共同干预对玻璃化冻存小鼠卵巢组织血管内皮生长因子表达的影响被引量:1
- 2015年
- 目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织卵泡刺激素(FSH)及FSH和黄体生成素(LH)共同干预,观察冻融卵巢组织的形态学改变以及两种激素干预对冻存卵巢组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,寻找最佳的提高冻融卵巢组织卵泡存活及VEGF表达的激素干预方式。方法 4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),300IU/L FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及150IU/L FSH+150IU/L LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH),每组30个卵巢样本。通过常规组织学、Western blotting技术,观察并分析各组卵巢组织形态结构改变及VEGF蛋白表达量;通过荧光定量PCR技术(Real-time PCR)检测VEGF mRNA表达情况。结果 OG-FSH+LH组正常卵泡百分比最高,且显著高于OG-FSH组(P<0.05);VEGF蛋白表达量在OG-FSH+LH组显著高于OG-FSH组(P<0.05);荧光定量PCR检测结果表现为VEGF mRNA表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组,最低是VCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式较单独FSH干预具有更高正常卵泡百分比和更佳的VEGF蛋白表达。
- 陈杰常青杨延周裴秀英黑常春于佳孙苗王燕蓉
- 关键词:卵泡刺激素黄体生成素血管内皮生长因子实时定量聚合酶链反应小鼠
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中FSH干预对血管生成相关因子表达的影响被引量:2
- 2015年
- 目的在小鼠卵巢玻璃化冻融过程中给予重组人卵泡雌激素(r FSH)干预,通过观察其对卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSH-R)及与血管生成相关的Integrinαvβ3、Angpt-2、Kindlin-2蛋白表达的影响,提供FSH干预对卵巢血管生成相关因子影响的依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU·m L-1FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VG)。对3组卵巢内各级卵泡进行计数;通过免疫组化方法观察并分析各组FSH-R、Angpt-2、Kindlin-2在卵巢不同细胞中的定位;观察粘附分子Integrinαvβ3在各组卵巢细胞中表达,并进行亚基表达量的分析。结果FSH-VG组的原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡及总卵泡数均高于VCG组,但低于FCG组(P均<0.05),闭锁卵泡数VCG组高于FCG及FSH-VG组(P均<0.05);FSH-R与Angpt-2阳性表达呈现FSH-VG与VCG组均低于FCG组(P<0.05),但FSH-VG组高于VCG组(P<0.05);Kindlin-2阳性表达在FSH-VG组与FCG组之间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.01或<0.05);Integrinβ3蛋白表达量FCG与FSH-VG组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.05),Integrinαv的表达3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加FSH可以上调FSH-R及粗血管生成的相关因子Integrinβ3、Angpt-2和Kindlin-2蛋白的表达,提高正常卵泡数。
- 张红马文叶杨延周裴秀英常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军孔斌王燕蓉
- 关键词:小鼠卵巢RFSH玻璃化冻存ΑVΒ3
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中FSH的DNA保护作用被引量:2
- 2016年
- 目的探讨卵泡刺激素(FSH)干预下的小鼠卵巢玻璃化冻融对卵母细胞形态以及DNA损伤的影响,为临床玻璃化冷冻实施FSH干预的应用提供科学依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、非干预玻璃化冻存对照组(VTG)及0.3IU·m L-1FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VG)。通过石蜡切片及HE染色法判断卵泡形态;采用单细胞凝胶电泳法检测分离的卵母细胞,Olive尾矩评价各组卵母细胞DNA的损伤情况;免疫组织化学法和Western blot法检测与DNA修复相关的PCNA蛋白表达情况。结果 FSH干预下的冻存卵巢组织内部的卵泡结构优于非干预组。Olive尾矩分析结果显示,与FCG相比,VTG差异有统计学意义(P<0.05),FSH-VG差异不明显。免疫组织化学和Western blot检测结果显示,FSH-VG的PCNA表达明显优于非干预组(P<0.05),与新鲜对照组相似。结论 FSH干预下的卵巢玻璃化冻融有利于卵母细胞DNA的保护与修复。
- 于佳马会明张红孙苗王燕蓉裴秀英杨延周蒲静张宁
- 关键词:玻璃化冷冻单细胞凝胶电泳卵泡刺激素
- 妇科养荣胶囊改善化疗所致小鼠卵巢功能损伤的效果被引量:3
- 2016年
- 目的:观察妇科养荣胶囊(Fu Ke Yang Rong capsule,FKYRC)对卵巢损伤小鼠卵巢储备功能和生育力的保护作用。方法:通过成年雌性小鼠一次性腹腔注射120 mg/kg环磷酰胺和10 mg/kg白消安建立卵巢损伤小鼠模型,于造模前7 d至造模后60 d每日对卵巢损伤小鼠用高、中、低剂量(6 g/kg、4 g/kg和2 g/kg)FKYRC(H组、M组、L组)连续灌胃给药;同时,于造模前7 d一次性皮下注射给予Gn RHa(38 mg/kg)作为阳性对照组(Gn RHa组),用生理盐水(0.2 m L/d)代替FKYRC连续灌胃作为卵巢损伤对照组(模型组),另设正常对照组:非卵巢损伤正常小鼠腹腔注射给予等体积DMSO(NC组)。分别于造模后30 d和60 d取材,计数卵巢组织中各级卵泡数量,检测血清E2、FSH、抑制素B(INHB)和抗苗勒氏管激素(AMH)水平,检测卵巢组织中翼状螺旋/叉头转录因子2(FOXL2)和AMH蛋白的表达水平。并观察造模60 d后各组妊娠率和窝仔数。结果:各给药组和模型组小鼠血清E2低于NC组(P<0.05),但FSH水平组间无统计学差异(P>0.05)。造模各组卵泡数明显低于NC组(P<0.05),且H组和Gn RHa组造模后60 d时卵巢组织中窦前卵泡与窦卵泡数较高,但各干预组与模型组比较无统计学差异(P>0.05)。模型组小鼠卵巢组织中FOXL2和AMH蛋白表达水平显著低于各FKYRC干预组(P<0.05),H组的妊娠率(80.00%)显著高于模型组(36.36%)(P<0.05)。结论:连续FKYRC(6 g/kg)给药60 d后可明显改善烷化剂所致卵巢损伤小鼠的卵巢储备功能和生育能力,其机制可能与上调颗粒细胞中FOXL2和AMH的表达水平相关。
- 蒲静杨延周谢人明马会明马文智常青孙苗于佳王燕蓉裴秀英
- 小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH、FSH+LH对Cx43表达的影响
- 2015年
- 目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)、FSH和促黄体生成素(LH)共同干预,观察FSH及FSH+LH干预对冻存卵巢卵泡缝隙连接蛋白(connexin-43,Cx43)表达的影响,从而判断最佳的激素保护方法。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),0.3IU·m L^(-1)FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及0.15IU·m L^(-1)FSH+0.15IU·m L^(-1)LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH)。通过免疫组织化学法、Western blot技术及荧光定量PCR检测,观察并分析各组卵巢组织Cx43蛋白表达量。结果免疫组织化学及Western blot检测结果表明Cx43蛋白表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),各组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05);荧光定量PCR检测结果显示Cx43mRNA表达量从高到低依次为OG-FSH+LH组、OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),且各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式更有利于冻融卵巢组织缝隙连接蛋白Cx43蛋白的表达。
- 陈杰常青杨延周裴秀英马文智马会明马会明黑常春于佳孙苗
- 关键词:小鼠卵巢促卵泡刺激素促黄体生成素玻璃化冻存缝隙连接蛋白
- 生长分化因子-9下调对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力的影响被引量:5
- 2016年
- 目的探讨生长分化因子-9(GDF9)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖能力基因周期蛋白A(cyclin A)、周期蛋白D1(cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶抑制因子27(p27kip1)表达的影响。方法利用CCK-8检测法检测细胞的增殖能力;使用流式细胞术、Real-time PCR和Western blot法验证GDF9 siRNA的干扰效率;采用Real-time PCR和Western blot法检测细胞增殖cyclin A、cyclin D1和p27kip1 mRNA和蛋白表达情况。结果 GDF9 siRNA显著抑制颗粒细胞增殖活力,其中72 h抑制最明显(P<0.05);Real-time PCR和Western blot法检测结果显示GDF9 siRNA显著下调小鼠卵巢颗粒细胞中GDF9 mRNA及蛋白的表达(P<0.01);Realtime PCR法检测结果显示,细胞cyclin A、cyclin D1 mRNA表达降低,p27kip1 mRNA表达增强;Western blot法结果显示,GDF9 siRNA可促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27kip1的表达,同时下调G2/M期调控蛋白cyclin A、cyclin D1的表达。结论靶向抑制小鼠卵巢颗粒细胞中GDF9的表达,下调细胞cyclin A、cyclin D1的表达,上调P27 kip1的表达,显著抑制细胞的增殖。
- 马会明张永芳王蒙蒙李昀伽蒲静于佳王燕蓉裴秀英徐仙
- 关键词:GDF9SIRNA细胞周期卵巢颗粒细胞小鼠