何云刚
- 作品数：12 被引量：23H指数：3
- 供职机构：云南大学生命科学学院生物技术系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金云南省教育厅科学研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用RIG质粒在大肠杆菌中有效表达转录因子类蛋白
- 2002年
- 大肠杆菌是常用的基因工程蛋白表达系统宿主菌 ,而密码子偏倚性常常成为某些异种蛋白质在大肠杆菌中成功表达的障碍 .利用含有编码多种稀有tRNA的重组质粒RIG ,一个含有大量稀有密码子的人类线粒体转录终止因子样蛋白成功地在大肠杆菌中得到表达 .证明使用RIG质粒是克服大肠杆菌密码子偏倚性的有效手段 .
- 何云刚赖建华钱伟陈瑶谭德勇
- 关键词：大肠杆菌基因表达
- 一个新的人类N-末端乙酰基转移酶基因的克隆及其表达研究
- 乙酰化是最普遍的真核生物蛋白质修饰途径之一,在各种不同的真核生物蛋白质中大约85%存在乙酰化修饰.对啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae的研究揭示了三种不同的N-末端乙酰基转移酶NatA、NatB、和...
- 何云刚谢永芳陈瑶赖建华金敏谭德勇
- 文献传递
- p53基因对mybbp1a(p160)基因的正调控作用研究
- c-myb基因是一种正常功能基因,其产物Myb蛋白对造血细胞的增殖起重要作用.在造血系统的恶性肿瘤中,c-myb基因由于转录增强而异常扩增,使Myb蛋白高表达,从而导致白血病细胞过度增殖.C-myb蛋白在细胞周期过程和阻...
- 钱伟何云刚赖建华舒坤贤谭德勇余敏
- 文献传递
- 人类线粒体转录终止样因子融合蛋白的构建与表达研究被引量：1
- 2003年
- 在前期工作中,采用EST介导的定位克隆策略,克隆了一个人类线粒体转录终止样因子,为进一步研究其结构与功能的关系,构建了含该基因全长编码区的pET-28b的表达载体,经大肠杆菌中诱导表达获得含该基因的融合蛋白.用此融合蛋白注入小鼠制备多抗血清,为深入研究该基因的功能奠定了基础.
- 陈瑶何云刚余敏钱伟谭德勇
- 关键词：融合蛋白表达WESTERNBLOT
- 一个人类线粒体转录终止样因子基因的克隆被引量：8
- 2003年
- 比较血清培养细胞和血清饥饿细胞的基因表达差异,获得了一段血清饥饿细胞中表达的cDNA序列,通过搜索表达序列标签(EST),拼接出完整的基因序列,通过PCR克隆获得全长cDNA序列.该基因全长1472bp,编码框预测有365个氨基酸.GenBank搜索,该基因与已有的人类线粒体转录终止因子有较大的同源性.所以,该基因可能是一个线粒体转录终止样因子.
- 陈瑶何云刚余敏钱伟谭德勇
- 关键词：血清饥饿克隆生物信息学
- DNA单链二级结构预测与单链构象多态性分析的一致性研究被引量：3
- 2001年
- 单链构象多态性 (SSCP)分析是一种简便 ,快速检测DNA突变的方法 ,它在基因突变检测、遗传分析、进化研究等领域有着广泛的应用价值 .但是这种方法的突变检出率随DNA序列不同而变化 ,一般只能达到 70 %～ 80 % .这主要是有的碱基突变对单链DNA的构象影响较小 ,不能通过SSCP检测出来 .将计算机对DNA二级结构的预测结果和实验结果作了对比 ,发现二者有很高的一致性 .这一结果表明计算机的DNA单链二级结构预测分析可用于PCR SSCP分析的辅助设计 。
- 何云刚谭德勇钱伟赖建华谢咏芳
- 关键词：突变检测单链构象多态性分析
- 合系35号水稻Q酶基因的克隆
- 2003年
- 支链淀粉含量是稻米品质的评价标准之一,控制支链淀粉合成的酶是淀粉分支酶.依据GenBank公布的日本水稻淀粉分支酶(Q酶)基因的cDNA序列合成相应引物,应用RT-PCR技术,SOE法成功地克隆到云南合系35号水稻Q酶基因的cDNA全长编码框2464bp.与日本水稻比较,合系35的Q酶基因有16个位点存在差异,并导致10个位点的氨基酸变化.
- 赖建华谭德勇钱伟何云刚余敏孙桂林
- 关键词：淀粉分支酶RT-PCRCDNA
- 云南妇女卵巢癌中p21^(WAF)基因有较高的31位密码(Ser/Arg)突变被引量：2
- 2002年
- 通过PCR -SSCP分析和序列分析 ,对取自云南地区的 44例妇女卵巢肿瘤样本的 p2 1WAF基因Ser3 1密码子的突变进行了分析 .结果表明 35例恶性肿瘤样本中有 15例发现有突变 ,突变率为 42 .9%;9例良性肿瘤中有 4例出现突变 ,突变频率 44 .4%;在另外 6例正常组织中出现 1例突变 ,突变率为 16 .7%.这一结果表明 ,云南妇女在这一基因位点存在多态性 ,这一位点的突变具有发生卵巢癌的趋势 .
- 江燕赖建华董跃兰余敏何云刚张虹谭德勇
- 关键词：卵巢癌基因突变基因位点PCR-SSCP分析
- 血清对人脑胶质瘤细胞株U251基因表达的影响被引量：6
- 2000年
- 利用分子原位杂交和定量PCR技术分析新生小牛血清培养和无血清培养的人脑胶瘤细胞株U2 5 1的基因表达 ,发现血清对细胞周期正调控基因cdc2基因和PCNA基因的表达有激活作用 ,而对细胞周期负调控基因 p2 1和 p16基因的表达有抑制作用 .这些事实表明 ,血清刺激细胞生长时 ,一方面要激活促进细胞增殖的基因 。
- 罗兰何云刚舒坤贤赖建华谭德勇张虹
- 关键词：人脑胶质瘤细胞血清基因表达U251细胞株
