何亚琴
- 作品数:10 被引量:17H指数:3
- 供职机构:宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 自噬抑制肿瘤坏死因子α诱导人胎盘胎儿来源间充质干细胞发生凋亡
- 2019年
- 目的:探讨TNF-α诱导人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hfPMSCs)发生凋亡和自噬的作用,以及自噬对细胞凋亡的调控作用。方法:利用流式细胞术检测无血清培养hfPMSCs中CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45的表达;用终浓度20μg/L的TNF-α处理hfPMSCs 24h,以未处理细胞作为对照组。Annexin V/PI双染色检测TNF-α对hfPMSCs凋亡程度的影响;分别提取各组总蛋白,Western blot检测自噬标志基因LC3Ⅰ/Ⅱ的表达;利用mRFP-GFP-LC3腺病毒感染细胞,观察胞内点状聚集形成的情况;利用Atg5干扰慢病毒(si-Atg5)及阴性对照慢病毒(si-NC)感染hfPMSCs,Annexin V/PI双染色检测TNF-α对慢病毒感染后hfPMSCs凋亡程度的影响。结果:所培养细胞具有典型的MSCs形态,呈CD73^+CD90^+CD105^+/CD14^-CD34^-CD45^-细胞;Annexin V/PI染色结果显示,TNF-α作用24 h后,hfPMSCs凋亡数和凋亡率均高于对照组(P <0. 05);Western blot检测自噬标志蛋白表达结果表明,TNF-α可增加LC3Ⅱ的表达(P <0. 05);荧光共聚焦显微境观察到TNF-α可显著提高细胞中的点状聚集。利用si-Atg5感染细胞,抑制hfPMSCs自噬的发生,与对照慢病毒si-NC感染细胞比较,可显著促进TNF-α诱导hfPMSCs凋亡的发生(P <0. 05)。结论:TNF-α诱导的自噬抑制人胎盘胎儿来源MSCs凋亡的发生,具有一定的保护性作用。
- 朱永朝陶金任萌萌熊燃何亚琴周瑜卢震辉杜勇杨芝红
- 关键词:人胎盘间充质干细胞肿瘤坏死因子-Α自噬
- 膜间隙入路双隧道法在腹腔镜低位直肠癌手术当中的临床应用价值
- 2022年
- 目的探究膜间隙入路双隧道法在腹腔镜低位直肠癌手术中的应用价值。方法回顾性选择2020年1月~2021年4月宁夏医科大学总医院接受腹腔镜手术治疗的60例低位直肠癌患者为研究对象,按照其接受术式的差异分为研究组(30例,接受膜间隙入路双隧道法)与对照组(30例,接受常规腹腔镜根治术),对比两组患者一般手术资料(手术时间、术中出血量、住院时间、术后通气时间)、术后指标(吻合口瘘、吻合口狭窄、腹腔出血、切口感染发生率)、盆腔神经保护效果(术后1个月、3个月和6个月时性功能、排尿功能得分及肛门括约肌控便能力)以及远期并发症(吻合口出血、腹腔出血、预防性造瘘手术造口、深静脉血栓、肺栓塞发生率)的差异。结果研究组患者的手术时间和术中出血量高于对照组,但住院时间及术后通气时间低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后研究组发生吻合口瘘1例,吻合口狭窄1例,切口感染1例,对照组发生吻合口瘘2例,腹腔出血1例,切口感染2例,两组术后指标方面差异无统计学意义(P>0.05);术后1个月、3个月及6个月时,研究组患者的排尿功能得分均显著低于对照组,性功能得分均显著高于对照组,研究组术后3个月及6个月时控便能力均显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),术后3个月及6个月时,两组排尿功能得分、性功能得分低于术后1个月,控便能力均显著优于术后1个月,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者术后均无深静脉血栓以及肺栓塞的出现,随访1年显示无局部复发以及远处转移,以及死亡病例出现。结论膜间隙入路双隧道法在腹腔镜低位直肠癌手术中具有较好的应用价值,能明显改善患者术后排尿功能、性功能及排便控制能力,且手术安全性较高。
- 赵少辉马硕苏进达何亚琴谢小亮
- 关键词:腹腔镜低位直肠癌
- miR-153-3p通过靶向FZD3调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭与迁移被引量:3
- 2021年
- 目的:探讨miR-153-3p对胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭和迁移的作用及其机制。方法:收集2018年5月至2020年6月宁夏医科大学总医院收治的60例胃癌患者的癌和配对癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系NCI-N87、AGS、SNU-5、SGC7901和胃上皮细胞GES-1,qPCR法检测miR-153-3p在胃癌组织与细胞中的表达水平。将miR-153-3p mimic及mimic对照序列转染至SGC7901细胞,用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、TUNEL、Transwell和划痕愈合实验分别检测上调miR-153-3p对SGC7901细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。构建裸鼠SGC7901细胞移植瘤模型,观察miR-153-3p对肿瘤生长的影响。通过生物信息学数据库和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-153-3p与FZD3靶向关系,WB法检测miR-153-3p对FZD3蛋白及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达的影响。结果:miR-153-3p在胃癌组织和细胞中表达水平分别显著低于癌旁组织和GES-1细胞(均P<0.01),以SGC7901细胞中表达水平最低。上调miR-153-3p显著抑制SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并提高细胞凋亡率(均P<0.01),同时上调细胞中E-cadherin表达而下调N-cadherin、MMP2和MMP9表达(均P<0.01)。在体内实验表明,静脉注射miR-153-3p mimic显著降低移植瘤体积和瘤组织中Ki-67表达而上调P57表达(均P<0.01)。机制分析表明,miR-153-3p靶向结合FZD3基因的3′UTR区域,上调miR-153-3p会抑制FZD3表达并上调β-catenin、TCF-4和cyclin D1水平(均P<0.01)。结论:miR-153-3p靶向FZD3并通过Wnt/β-catenin信号通路调控胃癌SGC7901细胞的增殖、侵袭和迁移。
- 张曹何亚琴钱海权叶晶晶
- 关键词:SGC7901细胞增殖迁移WNT/Β-CATENIN信号通路
- 人骨髓干细胞分离及其向神经细胞诱导分化的实验研究被引量:2
- 2013年
- 目的研究骨髓间充质细胞向神经样细胞诱导分化的能力,探讨利用其治疗神经损伤疾病的可行性。方法采用直接分离培养法从人骨髓中分离培养骨髓间充质干细胞,流式细胞术对其细胞特性进行鉴定,化学诱导法诱导其向神经样细胞分化,免疫组化技术验证诱导细胞特性。结果成功获得骨髓间充质干细胞,免疫表型鉴定结果为CD73、CD90、CD105表达阳性,CD14、CD34、CD45表达阴性;免疫组化染色显示诱导分化的细胞表达神经前体细胞标志物Nestin、GFAP和成熟神经元标志物NSE等。结论骨髓间充质细胞在特定诱导因子作用下能向神经细胞表型转化,并能稳定表达神经细胞因子,可以作为神经损伤疾病组织工程的种子细胞来源。
- 孙惠敏刘婷马丽君朱永朝何亚琴王立斌
- 关键词:骨髓间充质干细胞分化
- MTHFR基因rs1801133位点多态性与银川市体检人群高血压的相关性分析被引量:1
- 2018年
- 目的探讨高分辨率熔解曲线(hight-resolution melting,HRM)技术在亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因分型的应用及rs1801133位点多态性与银川市体检人群高血压的关联性。方法选择2017年1-10月间宁夏医科大学总医院体检人群中高血压患者743例和血压正常者718例为研究对象,收集临床资料,检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)、血脂、空腹血糖(FBG)、尿酸等临床生物化学指标。采用HRM技术对样本进行基因分型。结果采用HRM技术成功分型rs1801133位点样本1461例,CC型367例(25.1%)、CT型743例(50.9%)和TT型351例(24.0%),测序验证准确率达100%。银川市人群MTHFR基因rs1801133位点基因型频率和等位基因频率与天津、山东、江苏及湖北人群差异均有统计学意义(P均<0.01)。rs1801133位点CC、CT和TT基因型间血压和Hcy水平差异有统计学意义(P<0.01)。高血压组rs1801133的CC、CT、TT三种基因型频率和C、T等位基因频率与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。高血压组体质量指数(BMI)、FBG、尿酸、Hcy、甘油三酯(TG)及总胆固醇(TC)均高于正常组(P均<0.01)。Logistic回归分析显示,在校正了年龄、BMI、尿酸及Hcy后rs1801133不同基因型与高血压具有相关性(P<0.01)。结论 HRM法是一种检测准确性高、速度快、低成本的方法,适用于MTHFR基因检测。rs1801133基因多态性与高血压发病显著相关,且直接影响血浆Hcy水平。
- 田进海何亚琴于晶晶马荣周瑜王嘉王立斌
- 关键词:亚甲基四氢叶酸还原酶高血压基因分型
- 结直肠癌细胞中NF-κB活化与TRAF6、CCR5及PTEN/PI3K通路的关系及作用被引量:5
- 2022年
- 背景与目的:NF-κB的活化在多种恶性肿瘤的发生、发展中起了重要的作用。研究发现,趋化因子受体5 (CCR5)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)以及PTEN/PI3K通路相关蛋白均在恶性肿瘤中异常表达。因此,本研究探讨以上分子在结直肠癌细胞中的作用及相互关系。方法:分别用Westernblot、 CCK-8实验、 Transwell法检测结直肠癌HT29和SW480细胞经Maraviroc(CCR5抑制剂)、MG132 (TRAF6抑制剂)和NF-BAY (NF-κB抑制剂)处理后,各蛋白表达的变化,以及增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:在两种结直肠癌细胞中,抑制CCR5蛋白后,PI3K的表达降低,PTEN表达升高(均P<0.05),TRAF6和NF-κB表达无明显变化(均P>0.05);抑制TRAF6蛋白后,PI3K和CCR5表达降低,PTEN表达升高(均P<0.05),NF-κB的表达无明显变化(均P>0.05);抑制NF-κB表达后,CCR5、TRAF6和PI3K表达降低,PTEN表达升高(均P<0.05)。三种抑制剂均可明显降低两种结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。结论:结直肠癌细胞中存在NF-κB异常活化,后者可能通过上调TRAF6与CCR5的表达,抑制抑癌分子PTEN的活性,从而导致促癌分子PI3K及其通路的活性升高。
- 何亚琴苏进达赵少辉王健谢小亮
- 关键词:NF-ΚB
- 低氧对肿瘤干细胞增殖及耐药作用的分子机制被引量:2
- 2013年
- 低氧是多种肿瘤存在的基本生物学现象,参与构成复杂的肿瘤发展和侵袭的微环境。低氧环境下,低氧诱导因子(HIF)及其相关信号通路通过调节细胞的增殖、生存和代谢,精确的调控了肿瘤的侵袭、转移和化疗抵抗。同时也解释了肿瘤干细胞通过HIF依赖的方式获得自我更新的干细胞特性以及上皮间质转化特征。本文讨论了低氧及HIF信号通路参与调节肿瘤干细胞增殖和耐药的分子机制,及其在防治肿瘤复发、转移中的意义。
- 王立斌陈冬梅何亚琴夏海滨
- 关键词:低氧低氧诱导因子耐药肿瘤干细胞
- 人乳腺肿瘤干细胞的分离培养鉴定及低氧对乳腺肿瘤干细胞特性影响的研究
- 乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤,属高发病、高死亡率疾病。肿瘤术后出现较高的复发率和转移率,同时伴有对放化疗的抗药性是其高死亡率的原因之一。近年来肿瘤干细胞理论的提出突破了以往对肿瘤发生发展的认识,认为肿瘤的发生以及对放化疗的...
- 何亚琴
- 关键词:乳腺肿瘤肿瘤干细胞
- 文献传递
- 人乳腺肿瘤干细胞分离培养及鉴定被引量:4
- 2012年
- 目的:体外分离、培养乳腺肿瘤干细胞,并鉴定其生物学特性。方法:收集临床术后乳腺癌患者的肿瘤组织,经机械剪切联合酶消化法获得肿瘤细胞并培养,流式细胞仪鉴定细胞表面抗原,MTT比色法检测细胞生长曲线,实时定量PCR(qPCR)鉴定细胞Sox2、Nanog等基因表达,免疫荧光检测细胞特异性蛋白Bcl-2、孕激素受体(PR)的表达。结果:所获得的细胞呈克隆球样形态生长,鉴定结果发现其具有CD44+/CD24-表型,该细胞高表达Sox2、Nanog基因,且Bcl-2、PR蛋白均阳性表达。结论:人乳腺肿瘤组织中存在具有自我更新和增殖能力、表达CD44+/CD24-的乳腺肿瘤干细胞,并能在体外长期培养。
- 王立斌何亚琴吴立刚陈冬梅范恒贾伟
- 关键词:乳腺肿瘤干细胞
- 一种结直肠癌LncRNA诊断标志物、诊断试剂盒及应用
- 本发明提供了一种结直肠癌LncRNA诊断标志物、诊断试剂盒及应用,属于肿瘤分子生物学技术领域。本发明提取结直肠癌组织的RNA后进行逆转录,然后利用扩增结直肠癌LncRNA诊断标志物LncRNAMSTRG.40707.1的...
- 田进海王嘉 蒋宗英何亚琴于晶晶