刘战民 作品数:9 被引量:73 H指数:5 供职机构: 南京农业大学食品科技学院 更多>> 发文基金: 江苏省高技术研究计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 化学工程 更多>>
毕赤酵母工程菌原果胶酶的分离纯化 被引量:5 2006年 采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等方法,对毕赤酵母工程菌发酵液中的原果胶酶进行了分离纯化,测定了其分子质量,并确定了离子交换层析法的最佳离子交换条件。结果表明,硫酸铵的饱和度为70%时,可以使原果胶酶的回收率达到71.9%,比活力为1096.35U/mg;经Sephadex G75凝胶过滤,原果胶酶回收率达到57.6%,酶的比活力提高到3762.40U/mg;最佳离子交换条件为:0~0.5mol/L NaCl(缓冲休系为NoAc—HAc,pH5.8)溶液线性洗脱、Sepharose Fast Flow离子交换层析分离.在该条件下酶的比活力提高到9743.20U/mg,纯度为粗酶液的18.91倍。达到了电泳级;SDS-PAGE电泳结果表明,其分子质量为43.17ku。 刘战民 陆兆新 吕凤霞 别小妹 赵海珍关键词:毕赤酵母 原果胶酶 分离纯化 无溶剂体系中脂肪酶改造猪油制备功能性脂的研究 被引量:5 2005年 我国有丰富廉价的动植物油资源,但这一资源并未得到有效的利用,为了充分利用这些资源,开展了无溶剂系统脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂的研究工作。脂肪酶筛选实验表明,在所选用的五种脂肪酶中,来自T .languginosa的固定化脂肪酶LiopzymeTLIM的催化效果最好。以LipozymeTLIM为催化剂,进一步研究了酶量、底物比率、反应时间、反应温度和水分添加量对猪油中辛酸插入率的影响。反应产物通过高效液相色谱法(HPLC)进行分析。研究结果表明,当脂肪酶量为2 0 % (底物重量百分比)时,猪油中辛酸插入率最高。反应时间研究表明,当反应时间达到2 4h时,辛酸的插入率最高,达到38 77mol%。当猪油与辛酸的比率为1∶2 (摩尔比)时,辛酸的插入率最高,达到30 95mol%。在4 5~6 0℃范围之内,反应温度对辛酸插入率没有明显的影响,温度高于6 0℃时,辛酸插入率降低。水分添加量为2 5 %时,辛酸插入率最高,高达35 76mol%。 赵海珍 陆兆新 别小妹 吕凤霞 刘战民原果胶酶在毕赤酵母中的表达、发酵优化及酶学性质研究 原果胶酶是能水解不溶性果胶物质为可溶性果胶物质的一类酶。1978年Sakai等首次报道了酵母生产的原果胶酶,之后相继报道了细菌、酵母和霉菌中的原果胶酶的酶学性质及原果胶酶的应用。在中国,有关微生物原果胶酶的研究和应用技术... 刘战民关键词:枯草杆菌 原果胶酶 毕赤酵母 高密度发酵 酶学性质 文献传递 脂肪酶酸解猪油制备减热量型功能性脂 被引量:1 2006年 研究了脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂。在所选5种脂肪酶中,固定化脂肪酶L iopzym e TLIM的催化效果最好。研究了加酶量、底物比率、反应时间和反应温度对猪油中辛酸插入率的影响。用高效液相色谱法(HPLC)进行产物分析。最终确定2种体系中辛酸插入的条件为:在正己烷体系中,当加酶量为15%,猪油与辛酸摩尔比为1∶2,55℃反应24 h,辛酸插入率(摩尔分数)为(34.9±1.7)%;无溶剂体系中,加酶量为20%,猪油与辛酸摩尔比为1∶2,在50℃反应24 h时,辛酸插入率(摩尔分数)为(32.4±2.6)%。 赵海珍 陆兆新 别小妹 吕凤霞 刘战民关键词:猪油 酸解 固定化脂肪酶 辛酸 甲基营养酵母在生产重组蛋白中的应用 被引量:1 2005年 对真核表达系统Hansenula,Candida,Torulopsis和Pichia甲基营养酵母的生理特性、基因整合、糖基化、载体设计及其在生产与研究中的应用进行了综述,表明该系统表达外源基因具有经济合理、安全可靠、表达蛋白可以翻译后修饰等优点,是一类极具发展潜力和广泛应用的真核表达系统. 陆兆新 刘战民 吕风霞 别小妹 赵海珍关键词:外源基因表达 真核表达系统 枯草芽孢杆菌产原果胶酶发酵条件研究 被引量:6 2005年 原果胶酶(Protopectinase)是可以催化原果胶水解的酶类,广泛用于果胶生产、单细胞食品制备和棉织品的生化精炼之中。实验对影响枯草芽孢杆菌XZ2(BacillussubtilisXZ2)摇瓶发酵生产原果胶酶的相关因子:豆粕粉的水提时间、水提液浓度、磷酸盐浓度、金属离子、发酵培养基初始pH值、接种量和接种龄等采用单因素试验进行了研究,在单因素试验基础之上,选取pH、接种量、Mg2+、磷酸盐和转速等因素进行正交试验,结果表明发酵培养基初始pH和磷酸盐缓冲液浓度对产酶影响显著。当发酵初始pH7.5,接种量10%,MgSO4·7H2O0.04%,磷酸盐缓冲液浓度为0.20mol/L,摇床转速为120r/min的摇瓶发酵条件下,产酶酶活最高为16.71U/ml。 刘战民 陆兆新 吕凤霞 别小妹 赵海珍关键词:枯草芽孢杆菌 原果胶酶 发酵优化 爬山虎内生菌的鉴定及其谷氨酸脱羧酶酶学特性 被引量:12 2007年 从爬山虎茎中分离到5株内生菌,其中菌株EJC-1具有谷氨酸脱羧酶(GAD)活性。当湿菌体与10 g.L-1谷氨酸钠溶液比例为1∶10(W∶V)时,在30℃和120 r.min-1下振荡反应24 h,细胞转化液中γ-氨基丁酸浓度为(3.07±0.23)mmol.L-1。通过形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定EJC-1为巨大芽孢杆菌(Bacillus megateri-um)。同时基于16S rDNA构建了系统进化树,并对EJC-1进行了系统发育分析。B.megateriumEJC-1 GAD的最适反应温度和pH分别为50℃和5.6。低于40℃,GAD在pH5-6范围内较稳定。2.5 mmol.L-1Mg2+对GAD活力具有显著的促进作用,活力提高了13.85%。 杨胜远 陆兆新 孙力军 吕凤霞 别小妹 刘战民关键词:谷氨酸脱羧酶 Γ-氨基丁酸 内生菌 巨大芽孢杆菌 脂肪酶改良猪油制备功能性脂的研究 被引量:2 2005年 我国有丰富廉价的动植物油资源,但这一资源并未得到有效的利用,为了充分利用这些资源,开展了脂肪酶催化猪油与辛酸酸解制备功能性脂的研究工作。脂肪酶筛选实验表明,在所选用的五种脂肪酶中,来自T.languginosa的固定化脂肪酶LiopzymeTLIM的催化效果最好。以LipozymeTLIM为催化剂,进一步研究了酶量、有机溶剂、底物比率、反应时间和反应温度对猪油中辛酸插入率的影响。反应产物通过高效液相色谱法(HPLC)进行分析。研究结果表明,在正己烷介质中,脂肪酶量为15%(底物重量百分比),底物比率为1:2(猪油:辛酸)反应时间24h,反应温度为55~60℃时,辛酸插入率最高。 赵海珍 陆兆新 刘战民 吕凤霞 别小妹关键词:猪油 酸解 固定化脂肪酶 辛酸 天然食品来源的血管紧张素转换酶抑制肽的研究进展 被引量:41 2004年 血管紧张素转换酶 (ACE)在血压调节中扮演着重要的角色。最近抑制肽的研究在食品医药界倍受关注 ,ACE抑制肽通过抑制血管紧张素Ⅰ向血管紧张素Ⅱ的转换以及阻止ACE使激肽失活而起到降压作用。利用某些蛋白酶对食品蛋白质进行定向水解或通过微生物发酵可产生具有降压作用的活性短肽 ,现在人们已从许多蛋白质源中分离到了各种ACE抑制肽。此文对近年来天然食品蛋白质来源的ACE抑制肽的研究进展做一简介。 赵海珍 陆兆新 刘战民关键词:血管紧张素转换酶 结构与功能关系