公共文化服务平台

“慕课”环境下军医大学生物化学教学设计探索被引量：8: 2017年; 慕课"MOOC"(Massive Open Online Course,大规模在线开放课程)在全球的兴起,给传统的课堂教学带来了前所未有的冲击与挑战。虽然目前国内外高校慕课资源中生物化学课程的内容在不断增多,但这些课程缺乏系统分析研究,实践运用较少。本文将从慕课平台中生物化学课程分布特点,包括主要慕课平台、开设机构、授课语言、课程内容等方面,对这其中的生物化学课程资源进行分析,探讨军医大学生化教学在慕课时代下面临的问题与挑战,致力将信息化时代的慕课与传统教学有机结合,帮助教师在大量的慕课课程中进行选择,为促进军医大学生物化学教学改革提供参考。; 茹懿屈亚媛王秦豪吴琳李霞; 关键词：生物化学教学改革教学设计

头孢曲松钠对大鼠蛛网膜下腔出血后认知功能的影响被引量：1: 2015年; 目的探讨头孢曲松钠(CEF)对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后的认知功能的影响及其机制。方法将68只成年SD大鼠随机分为4组:正常组(n=12)、对照组(n=24)、CEF低剂量治疗组(n=8)和CEF高剂量治疗组(n=24)。采用枕大池双次注血方法建立大鼠SAH模型。SAH后3 h经小脑延髓池缓慢注射100μl CEF(高剂量组浓度为100μmol/L,低剂量组浓度为50μmol/L),对照治疗组注射等体积生理盐水。采用Morris水迷宫检测各组动物学习记忆能力;Western blot检测各组大鼠海马Caspase-3和兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)的表达水平。结果与对照组相比,CEF治疗组SAH后动物的水迷宫实验中的逃逸时间显著减少(P<0.05),大鼠海马组织中EAAT2的表达增加(P<0.05),Caspase-3的表达减少(P<0.05)。结论 CEF对SAH后具有显著的神经保护作用,CEF治疗可能通过上调星形胶质细胞EAAT2的表达逆转SAH诱导的神经损伤。; 陈旭吴琳冯达云王举磊秦怀洲高国栋张治国; 关键词：蛛网膜下腔出血星形胶质细胞头孢曲松钠谷氨酸转运体

真核表达载体pcDNA3.1-3a的构建及其在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中的表达被引量：1: 2011年; 目的在pcDNA3.1真核表达载体中构建表达融合myc/his标签的甲基化酶表达载体pcDNA3.1-3a,并在神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞中进行验证,以期获得可表达甲基化酶催化结构域的融合基因。方法以甲基化酶的pcDNA4.0-GBD-3a-myc/his质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得融合有myc/his标签序列的目的区段--甲基化酶催化结构域3a,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1;以EcoRⅠ、EcoRⅤ双酶切和PCR方法对构建的表达载体进行鉴定,并通过测序证明载体构建正确,同时检测甲基化酶3a在SK-N-SH细胞中的表达。结果通过PCR方法获得了含有甲基化酶催化结构域的真核表达载体pcDNA3.1-3a,并通过免疫印记方法验证了在神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞样品中用抗his标签抗体可以特异性识别目的蛋白。结论正确构建了甲基化酶表达载体pcDNA3.1-3a,其可在神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞中表达。; 秦怀洲张治国王举磊吴琳李立宏高国栋; 关键词：DNA甲基化酶真核表达载体神经母细胞瘤

细胞自噬与人卵巢癌细胞对顺铂耐药的关系被引量：6: 2016年; 目的探讨细胞自噬与人卵巢癌细胞对顺铂耐药的关系。方法以不同浓度的顺铂(0、1、2、4、8、16μg/mL)分别作用人卵巢癌细胞A2780及其顺铂耐药株A2780/DDP 48h,采用MTT法检测卵巢癌细胞的增殖率,透射电镜检测顺铂诱导细胞自噬体的形成,Western blot法测定自噬和凋亡相关蛋白。结果与A2780对照比较,A2780/DDP增殖率明显升高(P<0.01);顺铂可以诱导A2780及A2780/DDP中自噬体的形成,且A2780和A2780/DDP中LC3-Ⅱ水平均升高,这种作用可以被自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断;顺铂可以诱导A2780中凋亡相关蛋白Cleaved-PARP水平升高,但作用A2780/DDP时影响不大,当3-MA与顺铂同时作用人卵巢癌细胞时,A2780/DDP中的Cleaved-PARP表达水平显著升高(P<0.01)。结论卵巢癌细胞的耐药可能与顺铂诱导卵巢癌细胞自噬有关,自噬抑制剂3-MA可以抑制顺铂诱导的细胞自噬,同时促进顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡,且增加顺铂耐药株对顺铂的敏感性。; 朱星枚吴琳张媛姚杨成碧萍张丹; 关键词：顺铂耐药卵巢癌细胞自噬

HBV宫内传播和HBV前S/S基因突变的关系的初步分析被引量：2: 2007年; 目的研究宫内传播中乙型肝炎病毒前S/S基因的突变,探讨宫内感染乙型肝炎病毒与HBV基因突变的关系。方法根据随访确定新生儿是否发生宫内感染,将HBsAg阳性母亲分为病例组和对照组,经PCR扩增HBV DNA,基因克隆、测序,分析前S/S基因的突变。结果共得到60株HBV病毒株序列,所有毒株均属于C基因亚型、adr亚型;16个位点的突变在宫内感染组母亲及其新生儿中没有或很少发生,在对照组母亲中发生率较高,其中nt2749、3086、309、676、684、3114、70、161、308、213、373、405位点突变在3组中的发生率差异有统计学意义。结论所有病毒株前S/S基因均存在突变,某些突变位点在非宫内感染组母亲中的发生率较高,HBV宫内感染的发生可能与某些位点基因是否发生突变或其所在的功能区是否发生变化有关。; 张治国苏海霞吴琳闫永平门可张景霞王安辉卢娟徐德忠; 关键词：点突变

靶向性甲基化酶真核表达载体pcDNA3.1-myc-3a的构建: 2010年; 目的:在pcDNA3.1真核表达载体中构建表达融合myc-6his标签的靶向性甲基化酶pcDNA3.1-myc-3a并进行鉴定。方法:以含有myc全长基因的pcDNA3.1-myc-Luc质粒为模板,通过PCR方法扩增获得myc(DBD),再以含有靶向性甲基化酶的pcDNA4.0-GBD-3a-myc-6his质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得融合有myc-6his标签序列的目的区段3a,然后将两者克隆入表达载体pcDNA3.1;以双酶切和PCR方法对构建的载体进行鉴定。结果:通过PCR方法获得了靶向性甲基化载体pcDNA3.1-myc-3a,并通过免疫印记方法验证了抗myc标签抗体可以特异性识别目的蛋白。结论:正确构建了靶向性甲基化酶pcDNA3.1-myc-3a的真核表达载体。; 吴琳张治国张健刘新平李福洋; 关键词：DNA甲基化酶靶向性

MSP58基因小干扰RNA对胶质瘤细胞系U251增殖的影响被引量：5: 2009年; 目的观察核微球蛋白58(MSP58)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对神经胶质瘤U251细胞的体外增殖的影响。方法体外化学合成针对MSP58基因的siRNA,脂质体法转染神经胶质瘤细胞系U251,荧光显微镜观察转染效率,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测MSP58基因的mRNA和蛋白表达水平,甲基噻唑基四唑法(MTT法)绘制细胞生长曲线,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期。结果MSP58基因的特异性siRNA转染U251细胞后,MSP58的mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞增殖受到明显抑制;流式细胞仪检测显示转染后的U251细胞G2/M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞略有减少,G1期细胞明显增加(P<0.01),G1期发生明显阻滞。结论MSP58基因的特异性siRNA可明显抑制神经胶质瘤细胞U251的增殖,并引起G1期细胞阻滞。; 王江林伟章翔张璟张健吴琳刘新平药立波; 关键词：SIRNA 神经胶质瘤

靶向性DNA甲基化酶在pET32a原核表达载体中的表达和鉴定: 2008年; 目的:在pET32a原核表达载体中表达融合myc-6his标签的靶向性甲基化酶B1-3a并进行鉴定。方法:以含有B1-3a基因的pcDNA4.0-B1-3a-myc-6his质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得融合有myc-6his标签序列的目的区段B1-3a,然后克隆入表达载体pET32a;以SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中在分子量43kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带,该条带可被6his标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构建了靶向性甲基化酶B1-3a的原核表达载体,靶向性甲基化酶能够在pET32a中成功表达。; 吴琳邢克飞张治国张健刘新平药立波李福洋; 关键词：DNA甲基化酶基因靶向性

Sp1基因RNA干扰载体的构建及鉴定被引量：2: 2008年; 目的:构建干扰载体pSilencer3.1-Sp1,并初步研究其对Sp1基因的干扰作用。方法:根据Sp1cDNA编码序列,设计并合成针对Sp1基因的特异性RNA干扰片段,并将其克隆入pSilencer3.1-H1neo干扰载体中,构建Sp1基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体pSilencer3.1-Sp1;分别将阴性对照载体pSilencer3.1与重组载体pSilencer3.1-Sp1经脂质体LipofectAMINE2000介导转染HeLa细胞,采用RT-PCR、Western blot方法分别检测Sp1基因的转录与表达水平。结果:构建了Sp1基因siRNA真核表达载体pSilencer3.1-Sp1,经酶切、测序鉴定证实克隆正确,并在mRNA水平和蛋白水平证实了载体的干扰效果。结论:特异性siRNA能明显抑制Sp1基因在HeLa细胞中的表达,为进一步研究Sp1的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。; 曲璇陈苏宁吴琳申亮亮林伟赵华栋刘新平张健; 关键词：RNA干扰小干扰RNA

靶向性DNA甲基化酶在毕赤酵母中的表达和鉴定被引量：1: 2007年; 目的:在毕赤酵母中表达融合Myc-His标签的靶向性甲基化酶B1-3a并进行鉴定。方法:以含有B1-3a基因的pcDNA4.0-myc/his质粒为模板,通过PCR扩增获得融合有myc/his标签序列的目的区段B1-3a基因,然后克隆入表达载体pPIC3.5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS-PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中可见与目的蛋白相对分子质量(50000)相符的条带,该条带可被Myc标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构建了靶向性甲基化酶B1-3a的酵母表达载体,靶向性甲基化酶能够在毕赤酵母中成功表达。; 邢克飞吴琳李燕刘新平药立波李福洋; 关键词：DNA甲基化酶靶向性毕赤酵母

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

吴琳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

吴琳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈