周宏专
- 作品数：44 被引量：87H指数：5
- 供职机构：北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：北京市农林科学院青年基金北京市科技计划项目北京市农林科学院科技创新能力建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 基因芯片和ELISA检测临床样品中禽白血病的比较研究
- 2016年
- 为了鉴定实验室建立的禽白血病基因芯片检测方法与商品化ELISA方法的符合情况,试验从北京市某种鸡场挑选疑似禽白血病的蛋鸡13只,分别采集蛋清、血清、全血及泄殖腔棉拭子样品,利用基因芯片方法和商品化ELISA试剂盒进行检测比较。结果表明:基因芯片方法检测全血和泄殖腔棉拭子的阳性率均为69.23%;ELISA试剂盒检测蛋清和泄殖腔棉拭子样品中p27抗原的阳性率为23.08%。说明利用基因芯片方法检测全血和泄殖腔棉拭子样品的阳性检出率较高。
- 朱瑞豪苏霞周宏专赵坤杨兵
- 关键词：禽白血病病毒基因芯片符合率
- 环状芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的产酶条件及粗酶性质研究被引量：6
- 2006年
- 为确定环状芽孢杆菌WXY-100的最佳摇瓶培养工艺，采用了L9（3^4）正交试验对培养基成分以及培养条件进行了优化。结果表明，最佳培养基成分为：酵母抽提物20g／L，魔芋粉20g／L，（NH4）2SO4 2g／L，KH2PO4 1g／L，MgSO4·7H2O 1g／L。最佳培养条件为：种龄8～12h，接种量为6％，装液量为25mL，pH7．5，培养温度40℃，培养时间25h。该酶在pH4～8和60℃以下稳定，作用最适条件是pH5．0和60℃，Cu2^＋和Co^2＋对酶有较显著的激活作用，而Hg^2＋对酶有强烈的抑制作用。
- 杨新建徐福洲王金洛周宏专
- 关键词：Β-甘露聚糖酶环状芽孢杆菌产酶条件
- VP3基因突变鸡传染性贫血病毒的构建
- 2012年
- 以含CAV标准毒CuX-1株VP3突变体的pTCAVM阳性质粒为基础,通过重叠PCR在基因组位点nt682、nt808、nt829处进行定点突变,构建pTCAVM1、pTCAVM2、pTCAVM3突变体;在此基础上,对上述3个位点进行组合定点突变,构建成功pTCAVMa、pTCAVMb、pTCAVMc突变体;此外,成功构建克隆出3个位点均发生突变的pTCAVMd突变体。所有的突变体都保证VP3定点突变位点的碱基变化,同时不引起VP2蛋白的氨基酸残基序列发生变化,保证了突变体和原始病毒抗原性的一致;将得到的突变体转染易感细胞MSB1,获得具有复制特性的病毒,将病毒接种1日龄的SPF雏鸡,发现病毒可以在鸡体内复制,并引起CAV感染的病理学变化。本研究成功获得了多株感染性克隆毒株,为研究CAV病毒致病性以及开发鸡贫血弱毒活疫苗奠定了坚实的基础。
- 杨兵苏霞孙丹丹周宏专夏永恒陈小玲徐福洲王金洛杨汉春
- 关键词：感染性克隆
- 空肠弯曲菌cjaA基因在乳酸乳球菌中分泌性表达及口服免疫研究
- 为降低鸡肠道中空肠弯曲菌的定植水平,本试验将空肠弯曲菌的膜转运蛋白cjaA基因、usp45基因分泌信号肽以及大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)编码基因通过串联的方式插入食品级乳酸乳球菌表达载体,构建分泌性表达系统,将...
- 王传文周宏专郭芳芳陈玉霞杨兵苏霞朱瑞良徐福洲
- 关键词：空肠弯曲菌乳酸乳球菌分泌性表达口服免疫
- 犬细小病毒研究进展被引量：8
- 2019年
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)是犬急性胃肠炎的主要致病因子之一,典型的临床症状包括呕吐、发热和腹泻,通常6周龄~6月龄的幼犬更易感染。20世纪70年代后期出现CPV-2后目前已在世界范围内流行。病原学研究显示CPV基因组替代率与RNA病毒相似,基因组中多个位点出现了新的变异,与病毒致病机制密切相关,引起了科研人员的广泛关注。在检测方面目前开展了多重聚合酶链反应(multiple PCR),聚合酶链式扩增阻碍突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS-PCR),隔热式恒温PCR(insulated isothermal PCR,iiPCR),高分辨率熔解曲线PCR(high-resolution melting PCR,PCR-HRM),横向流动试纸条技术(immunocapture-loop mediated isothermal amplification-lateral flow dipstick,IC-LAMP-LFD),聚合酶螺旋反应(polymerase spiral reaction,PSR),重组聚合酶扩增方法(recombinase polymerise amplification,RPA),Luminex液态悬浮芯片系统(Luminex xTAG)和免疫层析(immunochromatography,IC)等方法,在防控方面开展了核酸疫苗、重组亚单位苗、病毒样颗粒等新型疫苗以及治疗性药物研究。论文对CPV的流行病学、病原学、检测方法及防控措施等进行了综述。
- 周宏专苏霞徐福洲杨兵
- 关键词：犬细小病毒流行病学致病机理疫苗
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxⅡC-/apxⅠA+、ureC-/apxⅢ+减毒双突变菌株的构建及特性研究
- 胸膜肺炎放线杆菌(APP)是引起猪传染性胸膜肺炎的呼吸道病原细菌,其中Apx毒素和尿素酶(Urease)均是其主要的毒力因子,且Apx毒素又是其主要的免疫原性蛋白。为构建APP减毒突变菌株,本试验首先利用仅表达ApxⅡ毒...
- 崔国林郭芳芳陈小玲杨兵周宏专苏霞徐福洲
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌APX毒素尿素酶突变
- 2种鸡免疫抑制性疾病LAMP检测方法的建立被引量：8
- 2009年
- 本文借助环介导等温扩增技术(LAMP),建立了两种常见鸡免疫抑制病的(鸡传染性贫血病、J亚群白血病)的快速检测方法。采用简易法提取DNA模板,设计特异性LAMP引物,成功扩增出梯形条带,并且对反应体系进行优化,以及特异性试验和灵敏度试验。结果表明LAMP的灵敏度可达10个拷贝,比PCR灵敏度高10倍;且具有特异性,对其他相关鸡病病原检测结果均为阴性。用建立的LAMP方法对临床样品进行检测,同时与PCR方法比较,结果表明LAMP结果基本与PCR相符,但检测的阳性率要比PCR高。操作简便,无需昂贵设备,适用于临床快速诊断。
- 夏永恒杨兵张杰袁蕾磊孙继国周宏专苏霞
- 关键词：鸡传染性贫血病毒J亚群白血病
- 犬细小病毒感染F81细胞microRNA荧光定量PCR内参基因的筛选被引量：3
- 2023年
- 犬细小病毒(canine parvovirus, CPV)是犬急性胃肠炎的主要病原之一,对犬类的健康造成极大危害。MicroRNA(miRNA)是小的、非编码的RNA,在转录后水平调节基因表达。荧光定量PCR(RT-qPCR)是评估miRNA表达水平最常用的方法,而合适的参考基因在RT-qPCR数据归一化中起着至关重要的作用。本研究在分析F81细胞空白对照组和感染CPV组小RNA高通量测序结果基础上,结合参考文献,在CPV感染后12 h和24 h,通过poly(A)延伸RT-qPCR定量方法检测候选内参基因小RNA的表达情况,并使用GeNorm、NormFinder和BestKeeper算法评估这些候选小RNA的稳定性。结果选取了5种高通量测序中表达相对稳定的miRNAs(dno-miR-186-5p、pha-miR-152、dno-miR-374a-5p、tch-miR-26a-2-5p和oga-miR-26b)和常用作参考基因的小核RNA U6(RNU6-1)、核仁小RNA(small nucleolar RNA)SNORD95以及SNORD96a,经过扩增分析及对高通量测序中差异表达的dno-miR-7-5p的定量验证发现,这些候选小RNA均具有较好的稳定性。其中pha-miR-152在检测样品中稳定性最好,可在CPV感染F81细胞中作为RT-qPCR法定量miRNA表达及数据均一化的合适参考基因。筛选出的pha-miR-152有助于研究miRNAs在CPV感染过程中的定量表达分析,为进一步研究F81细胞中miRNA调控CPV感染复制的分子机制研究提供可靠手段,也为其他相关物种miRNA定量研究中内参基因的选择提供参考。
- 周宏专苏霞林路路齐颀张进徐福洲杨兵
- 关键词：犬细小病毒MICRORNA内参基因
- 携带PRRS病毒ORF5基因胸膜肺炎放线杆菌载体的构建及特性鉴定
- 胸膜肺炎放线杆菌(APP)是引起猪传染性胸膜肺炎的呼吸道病原细菌;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)可引起一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的烈性传染病。这两种病原均为当前公认的危害现代养猪业的重大传染性病原。本...
- 周宏专
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌猪繁殖呼吸综合征病毒同源重组
- 文献传递
- 环状芽孢杆菌WXY-100发酵产物对肉鸡体重均匀度的影响
- 2007年
- 本试验选用300只体重均匀且健康的1日龄AA肉鸡,随机均分为3组,即对照组和试验Ⅰ组、试验Ⅱ组,各组均饲喂玉米-豆粕型基础日粮,以检验环状芽孢杆菌WXY-100发酵产品与和美酵素在功能上的相似性。试验期为49d,观察添加物对肉鸡体重均匀度及其他方面的影响。结果表明,试验Ⅰ组对肉鸡体重均匀度的改进率最高达到26.52%,试验Ⅱ组最高达到17.44%,同时,发酵产物在降低料肉比以及死亡率方面也有一定的作用。
- 杨新建周宏专徐福州王金洛
- 关键词：环状芽孢杆菌Β-甘露聚糖酶体重均匀度
