周志刚
- 作品数：11 被引量：82H指数：5
- 供职机构：广州医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：World Health Organization国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新生儿缺氧缺血性脑病血清CK、CKMB和LDH酶活性的变化与心肌损害的关系
- 2001年
- 目的 :探讨新生儿缺氧缺血性脑病 (EIE)患儿血清肌酸激酶 (CK)、肌酸激酶同功酶 (CK MB)和乳酸脱氢酶 (LDH)与心肌损害的关系。方法 :对 32例HIE患儿 (合并新生儿吸入性肺炎 )、2 0例单纯新生儿吸入性肺炎患儿及正常新生儿测定其血清中CK、CK MB和LDH酶的活性。结果 :HIE患儿血清中CK、CK MB、LDH酶的活性明显高于新生儿吸入性肺炎组及对照组 (P <0 .0 5 )。结论
- 周志刚林明辉
- 关键词：新生儿缺氧缺血性脑病心肌损害HIECK-MB
- 快速构建哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库被引量：5
- 2011年
- 目的快速构建哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法分离外周血淋巴细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)和全长Kappa型轻链(LCκ)基因库,分别插入载体pDGB-HC-TM,化学转化感受态大肠杆菌DH5α,构建抗体的轻、重链基因库,然后将其联合转染CHO细胞,流式细胞仪分析全长人源抗体在CHO细胞表面的表达。结果构建的非特异性IgG1-Kappa抗体基因库,重链库容量达2.6×105,轻链库容量达2.0×105,理论库容量高达5.2×1010。随机从重链库和轻链库各挑选10个克隆送测序,重链10个克隆的DNA序列分析显示8个含有正确的阅读框架,轻链10个克隆的DNA序列分析显示全部含有正确的阅读框架。流式细胞仪分析显示来自轻链库的10个克隆、重链库的8个克隆均可检测到抗体在CHO细胞表面的表达。用所构建的轻重链抗体库共转染CHO细胞,流式细胞仪分析可检测到抗体在细胞表面的表达,阳性细胞比例达到31.5%,说明所构建的抗体库能够在CHO细胞表面成功展示全长抗体。结论采用本研究建立的哺乳动物细胞展示技术,可在2周内成功构建库容量大且多样性好的全人源抗体基因库,用于高亲和力特异性抗体的筛选。
- 贺微李长征陈振瑞周烨谭万龙姜世勃周志刚刘叔文周辰
- 紫外线照射所致的DNA损伤对连接转化的影响被引量：11
- 2010年
- 目的探讨DNA经不同波长紫外线照射与经紫外线照射不同时间所致损伤对基因库构建中DNA连接转化效率的影响。方法经改造的质粒DNA使用SfiI酶切过夜,1%琼脂糖凝胶电泳分离,在不同波长不同时间紫外线照射的条件下回收目的片断,并进行目的片断的连接转化,计数菌落数,计算转化效率。结果经302nm波长紫外线照射后,其连接转化的菌落数极少(60个/ngDNA),365nm波长紫外线照射条件下回收的DNA仍可被有效连接转化。在365nm波长紫外线照射下,与未经照射进行比较,当照射时间在30min,其连接转化成功率低于50%,而照射5min、15min的连接转化成功率仍高于70%,可满足大部分分子生物学实验的需要。回收的DNA连接转化的最大效率可超过20000个菌落/1ngDNA。结论在构建大容量基因库回收目的片断时,应避免紫外线的照射;在需要时,应选择在365nm波长紫外线照射条件下进行,且照射时间应尽量缩短,以不超过15min为宜。
- 黄婉玲李长征陈振瑞贺微周烨周志刚刘叔文周辰
- 关键词：紫外线基因库
- 新生儿早期死亡的病理解剖分析及其与分娩因素的相关性被引量：2
- 2002年
- 目的通过新生儿早期死亡的病理解剖分析了解其死亡原因及和分娩相关的危险因素.方法取近15年(1987.1～2001.12)本院儿科87例死亡新生儿的病理解剖及临床资料进行分析.结果病理解剖发现新生儿早期死亡的主要病因依次为羊水/胎粪吸入、肺出血、颅内出血、肺淤血、吸入肺炎、肺透明膜病、呼吸窘迫综合征、感染性肺炎.疾患与性别无关,而与出生时胎龄、羊水情况,特别是Apga r评分有密切关系.结论为降低新生儿的死亡率,应做好围产期保健,提高分娩质量,预防窒息和早产.
- 周志刚郭芳
- 关键词：新生儿病理解剖分娩因素围产期保健
- 儿童传染性单核细胞增多症25例临床分析
- 2001年
- 目的 :详细了解传染性单核细胞增多症的临床表现 ,减少误诊率。方法 :对本院 2 5例传染性单核细胞增多症的临床表现进行分析。结果 :传染性单核细胞增多症临床表现既有相对集中 ,也有多样性。结论 :儿童传染性单核细胞增多症临床表现复杂多变 ,易漏诊、误诊 ,应引起临床医生注意。
- 周志刚郭颖仪
- 关键词：传染性单核细胞增多症儿童IM
- 广州地区急性呼吸道感染患者的病毒检出情况被引量：13
- 2011年
- 【目的】了解广州医学院第二附属医院急性呼吸道感染就诊人群病毒流行病学特征。【方法】采用多重RT-PCR法,对2006.9至2009.8广州医学院第二附属医院门诊急性呼吸道感染患者鼻咽拭子检测呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒A型(FluA)、流感病毒B型(FluB)、人偏肺病毒(HMPV)及腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)、冠状病毒(HCoV)8种病毒,分析其年份、季节及年龄分布特点。【结果】3年共收集1388例标本,病毒检出率40.634%,RSV毒检出率最高(17.8%),其检出率逐年下降(P=0.000);HMPV检出率于第2年升高(P=0.016),第3年下降(P=0.000)。RSV春季检出率高(P=0.009);HRV秋季检出率高(P=0.001);PIV春季检出率高(P=0.000),夏季(P=0.023)、冬季(P=0.048)检出率低;FluA夏季检出率高(P=0.000);HMPV春季(P=0.05)、秋季(P=0.01)检出率高。各季节不同病毒检出率有差异:春季,RSV(P=0.000)及HRV(P=0.004)检出率较高;夏季,HRV(P=0.000)及FluA(P=0.000)检出率较高;秋季,HRV(P=0.000)检出率较高;冬季,HRV(P=0.002)及RSV(P=0.000)检出率较高。各年龄段病毒分布有差异:RSV(P=0.004)、HRV(P=0.029)及HMPV(P=0.001)于<3岁组检出率较高;ADV(P=0.000)与Flu B(P=0.011)于3～<14岁组检出率较高;Flu A(P=0.011)于14～<40岁组检出率较高。【结论】病毒有季节流行趋势,RSV春季流行,FluA夏季流行,HRV则全年高发;病毒检出率与年龄有相关性,RSV、HRV及HMPV检出多见于婴幼儿,ADV与Flu B多见于3～<14岁人群,Flu A于14～<40岁组检出率较高。RSV检出率最高,并有年份强势流行趋势;且是各年龄组急性上呼吸道感染的主要病毒之一。
- 周志刚陈炫炜朱美华胡湘李晖
- 关键词：呼吸道感染病毒流行病学
- 急性呼吸道感染儿童呼吸道合胞病毒的流行病学特征被引量：10
- 2011年
- 目的了解急性呼吸道感染儿童呼吸道合胞病毒(RSV)的流行病学特征。方法采用多重RT-PCR法,对儿科门诊急性呼吸道感染儿童鼻咽提取物检测呼吸道合胞病毒,分析其一般情况、年份、月份、年龄段和性别分布特点。结果 3年期间共收集763例标本,RSV阳性率18.5%(141/763)。其中男451例,检出率为19.29%;女312例,检出率为17.31%,不同性别检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RSV检出率逐年降低(P<0.001)。2007年1月、3—6月、11月及2008年4月检出率显著升高(P<0.05);而2006年9—12月、2008年10—12月、2009年5及7月检出率则为0。婴幼儿检出率较其余儿童显著升高(P<0.05)。结论呼吸道合胞病毒流行跟月份、年份、年龄有关。
- 陈炫炜朱美华胡湘李晖周志刚
- 关键词：呼吸道感染呼吸道合胞病毒儿童流行病学
- 亚低温治疗新生兔缺氧缺血性脑损伤脑温监测的研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生兔头皮温度与颅内温度之间的关系。方法选择HIBD模型动物12只，作为探针动物。将探针动物置于亚低温治疗仪内，在降温过程中，监测从初始温度（35℃）开始降温达到不同颅内温度的时间和相应的头皮温度，并进行分析。结果颅内温度从35℃降至28℃所需的平均时间为37．5min，头颅温度与头皮温度呈良好的直线正相关关系（r=0．934，P〈0．05）。结论在一定的温度范围内，实验动物头皮温度与颅内温度有较强的直线正相关关系，可通过对头皮温度的测定，间接推断动物的颅内温度。
- 王志坚周晓光熊伟朱美华周志刚黄桂尧
- 关键词：脑温
- 系统性红斑狼疮儿童特异性全长抗体基因库的构建与分析被引量：3
- 2012年
- 目的构建系统性红斑狼疮(SLE)儿童个体特异性哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法采集SLE确诊患儿外周血,分离外周血淋巴细胞,提取外周血淋巴细胞总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因、构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库,将抗体基因库转染293T细胞,流式细胞仪分析抗体在293T细胞表面的表达。结果以0.8μg总RNA为模板,用6套引物成功扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,构建获得的重链基因库容量为9.4×104,轻链基因库容量为8.4×104。随机挑选的10个重链克隆有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,10个轻链克隆7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析挑选的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在293T细胞表面的表达,理论上抗体库中可表达的抗体多样性可以达到109。结论以0.8μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建SLE儿童特异性全长人抗体基因库,并在293T细胞表面成功展示SLE儿童个体抗体库中的全长抗体,为进一步研究SLE儿童自身抗体的特点及自身抗体在SLE发病机制中的作用及临床应用打下良好基础。
- 周志刚朱美华梁中锟陈振瑞贺微李长征谭万龙姜世勃刘叔文周烨周辰
- 关键词：系统性红斑狼疮儿童
- 急性呼吸道感染的病毒流行病学特点被引量：15
- 2010年
- 目的研究急性呼吸道感染的病毒流行病学特点。方法收集2006年9月-2009月8月广州医学院第二附属医院儿科门诊急性呼吸道感染儿童鼻拭子和咽拭子标本,采用多重反转录(RT)-PCR法检测其呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒A型(fluA)、流感病毒B型(fluB)、人偏肺病毒(HMPV)、腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)及冠状病毒(HCoV)8种病毒,分析其流行病学特征,包括季节、年份和年龄段分布特点。结果共收集763份标本,病毒检测阳性率为55.31%(422/763例)。其中RSV阳性率最高(18.5%),其感染率在春季显著增加(25.2%,2χ=11.147,P=0.001),且感染率逐年降低(2χ=17.593、28.215,Pa=0.000);HRV感染率居第二位(14.8%),其秋季感染率最高(2χ=6.349,P=0.012);fluA的感染率夏季最高,其近2 a感染率较高,特别是2007年9月-2008年8月(2χ=4.082,P=0.028)。HMPV感染率秋季最高(11.11%,2χ=6.666,P=0.010),夏季感染率低(3.42%,2χ=8.015,P=0.005)。fluB的感染率在婴幼儿感染率低[婴儿感染率1.61%,2χ(婴儿)=4.831,P=0.028;幼儿感染率6.22%,2χ(幼儿)=3.977,P=0.046],而在学龄期儿童感染率增高(17.01%,2χ=13.500,P=0.000)。结论广州儿童急性呼吸道感染中,RSV感染率最高,不同病毒的流行与季节有关联;fluB随年龄增大感染率增加。
- 周志刚陈炫炜胡湘李晖朱美华
- 关键词：呼吸道感染病毒流行病学儿童
