周旋
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：东北林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 东北林蛙皮肤抗菌肽基因在毕赤酵母中表达条件的优化被引量：1
- 2013年
- 目的:确定毕赤酵母表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST基因的最佳诱导表达条件。方法:本研究将PCR合成的dybowskin-1ST基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建pPIC9K-dybowskin-1ST诱导型表达载体。表达载体经线性化后转化巴斯德毕赤酵母GS115,应用BMMY培养基诱导表达。采用单一变量法及正交试验法,对甲醇诱导的浓度、时间和温度进行了优化,通过SDS-PAGE电泳分析和体外抑菌试验检测目的肽表达丰度。结果:最佳诱导条件:甲醇终浓度为0.5%、诱导时间为72 h、诱导温度为28℃,在此条件下表达产物SDS-PAGE电泳条带灰度值为117,抑菌环直径为28.16mm,可为规模化的抗菌肽表达提供参考数据。
- 崔绍鹏周旋朱熬肖向红张晶钰
- 关键词：抗菌肽毕赤酵母
- 虹彩病毒胁迫下东北林蛙NF-κB和I-κB的差异表达被引量：2
- 2013年
- 根据实验室高通量测序所得核转录因子κB(NF-κB)NF-κB1、NF-κB2和I-κBα部分序列,应用荧光定量PCR技术,检测虹彩病毒(Rana grylio virus,RGV)胁迫下NF-κB1、NF-κB2以及I-κBαmRNA在东北林蛙(Rana dybowskii)肝脏、脾脏、皮肤中的差异表达,并对表达差异进行统计学分析。结果显示:在东北林蛙不同组织中,NF-κB1和NF-κB2的表达水平有差异,NF-κB1表达量约是NF-κB2的2倍,且皮肤和脾脏中的表达量远高于肝脏。在虹彩病毒刺激初,2个基因在3个组织中表达量立即下调,受刺激0.5 h后2个亚基在3个组织中都有上调趋势;肝脏和皮肤中,在刺激后2 h(在肝脏中)和4 h(在皮肤中)快速上调至峰值;在脾脏中,2亚基上调趋势缓慢,分别在16 h(NF-κB2)和24 h(NF-κB1)达到峰值;2亚基表达至峰值后开始下调,并在8 h(在肝脏中)和12 h(在皮肤中)下调至初始水平,在脾脏中2亚基72 h以后才达到初始水平。I-κBα在受刺激初期也立即下调而后上调,上调至峰值的时间点与NF-κB基本相同。统计分析结果表明:各实验组基因表达量与对照组存在统计学差异(P<0.05)。
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- 关键词：东北林蛙虹彩病毒I-ΚB荧光定量PCR
- 东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的抗病毒活性分析被引量：3
- 2013年
- 【目的】检测重组东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的抗病毒活性。【方法】将实验分为预防组和治疗组,采用CPE观察法和MTT法检测dybowskin-1ST体外抗蛙虹彩病毒GRV的作用。【结果】预防组dybowskin-1ST对病毒的抑制作用不明显(P>0.05);治疗组200μg/ml的dybowskin-1ST对病毒有明显的抑制作用(P<0.05),随着浓度降低,100μg/ml和50μg/ml时对病毒抑制作用下降,浓度小于25μg/m1后,对病毒抑制作用不显著(P>0.05)。
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- 关键词：东北林蛙抗菌肽抗病毒活性
- RGV胁迫下东北林蛙组织中NF-kB及血液相关细胞因子表达变化
- 两栖类在长期进化过程中，形成了应对多种微生物侵袭的免疫防御体系。核转录因子κB(NF-κB)是参与机体先天免疫的一类重要模式分子。研究该分子在病原微生物胁迫下的动态表达及其相关细胞因子的表达变化对两栖类免疫学的研究具有重...
- 周旋
- 关键词：东北林蛙核转录因子ΚB细胞因子
- 文献传递
- RGV胁迫下东北林蛙组织中NF-κB及血液相关细胞因子表达变化
- 两栖类在长期进化过程中,形成了应对多种微生物侵袭的免疫防御体系。核转录因子κB (NF-κB)是参与机体先天免疫的一类重要模式分子。研究该分子在病原微生物胁迫下的动态表达及其相关细胞因子的表达变化对两栖类免疫学的研究具有...
- 周旋
- 关键词：东北林蛙细胞因子荧光定量PCR
- 文献传递
- 蛙虹彩病毒刺激下东北林蛙皮肤活性肽的表达变化
- 本研究以两栖类代表物种东北林蛙（Rana dybowskii）为试验对象,以蛙类易感病原微生物虹彩病毒（Rana grylio virus,RGV）为特异刺激原,经腹腔注射后收集其皮肤分泌物,SephadexG-50凝胶...
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- 关键词：东北林蛙虹彩病毒特异性表达
- 文献传递
- 东北林蛙重组抗菌肽dybowskin-1ST部分理化特性和生物学活性研究被引量：1
- 2016年
- 目的：对具有广谱抑菌活性的东北林蛙（Rana dybowskii）重组抗菌肽dybowskin-1ST进行热稳定性、酸碱稳定性、局部过敏反应（Arthus反应）及溶血活性分析,为进一步摸清重组肽的理化特性及其应用提供科学依据。方法：将重组抗菌肽dybowskin-1ST分别置于不同环境温度（25~100℃）及不同酸碱环境（pH2~pH12）中处理4 h,观察其对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）及大肠杆菌（Escherichia coli）的抑菌环直径,确定其稳定性;用不同浓度梯度的重组dybowskin-1ST进行溶血试验和局部过敏反应（Arthus反应）。结果：1.重组dybowskin-1ST在25~100℃温度及pH2~pH12环境下均有抑菌活性,其中,最适环境温度为25℃;重组dybowskin-1ST在pH3~pH7范围对Staphylococcus aureus抑菌活性较强（抑菌环直径为12.77~13.17 mm）,在pH3~pH8范围对Escherichia coli抑菌性较强（抑菌环直径为12.63~13.37 mm）。2.溶血试验结果显示,重组dybowskin-1ST对家兔红细胞的溶血率在0.14%~4.4%;小鼠Arthus氏试验观察其腹部皮下重组dybowskin-1ST注射部位红肿不明显,无出血、坏死等炎性反应。结论：实验结果显示重组dybowskin-1 ST具有较好稳定性、低溶血性及低致敏性,为其应用提供科学依据。
- 李玉刘琦王敬之柴龙会周旋肖向红
- 关键词：东北林蛙局部过敏反应溶血活性
