安立国
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 猪胃蛋白酶原A基因cDNA的克隆及其表达被引量：1
- 2006年
- 根据GenBank中发表的猪胃蛋白酶原A(pepsinogen)基因序列设计引物,采用RT-PCR技术,成功获得了猪胃蛋白酶原A基因,该基因全长1 240 bp,将该基因克隆到表达载体pPIC3.5K的EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点构建重组表达质粒,通过电转化方法将重组质粒转化毕赤酵母GS115,检测结果表明猪胃蛋白酶原A基因在毕赤酵母中得到了表达.
- 乔宪凤刘西梅安立国华文君周荆荣郑新民
- 关键词：克隆毕赤酵母
- 毕赤酵母表达猪胃蛋白酶的研究被引量：2
- 2008年
- 利用已有的猪胃蛋白酶原A cDNA,构建毕赤酵母pPIC3.5K-pA胞内表达载体.经纤维蛋白消化试验和干酪素琼脂平板法筛选,获得2株高表达的重组子,并研究了在不同pH、不同诱导时间、不同起始浓度和甲醇诱导浓度等条件下表达水平的高低.结果表明:在pH7、诱导72 h、起始诱导浓度为OD600为2、甲醇诱导浓度为1%时,重组胃蛋白酶活力最高,达到6.46 U/mL.
- 刘西梅安立国乔宪凤唐青海华文君
- 关键词：毕赤酵母
- 猪乙脑快速诊断方法的建立与应用被引量：2
- 2006年
- 根据乙脑病毒基因组3′末端保守区设计一对特异性引物,建立了乙脑病毒不同株的RT-PCR诊断技术。该技术可以从乙脑病毒WHe株、SA14-14-2株、P3株、SA14-14-2VS株接种的鼠脑组织中扩增出486bp的核酸片段,检出的灵敏度约为2pg。对20份临床样品的检测结果与小鼠脑内接种试验(MIT)的测定结果完全吻合,但RT-PCR诊断技术可在3h内直接对组织进行诊断,具有敏感、快速、稳定的优点。
- 唐青海乔宪凤安立国周荆荣郑新民刘西梅华文君何维明
- 关键词：乙脑病毒反转录聚合酶链式反应
- 育肥猪酒糟中毒的诊治
- 2006年
- 唐青海安立国
- 关键词：酒糟糟渣类饲料育肥猪剖检变化
- 猪胃蛋白酶原A在毕赤酵母中的表达
- 2008年
- 利用已有的猪胃蛋白酶原AcDNA,构建毕赤酵母pPIC3.5K-pA胞内表达载体.经纤维蛋白消化试验和干酪素琼脂平板法筛选,获得两株高表达的重组子,研究它们在不同pH值、不同诱导时间、不同起始浓度和不同甲醇诱导浓度等条件下表达水平的高低.结果表明:在pH值为7、诱导72h、起始诱导浓度的OD600为2、甲醇诱导浓度为1%时,重组胃蛋白酶活力最高,达到6.46U/mL.
- 刘西梅安立国乔宪凤唐青海华文君
- 关键词：毕赤酵母
- 日本脑炎病毒WHe株全长cDNA的长链RT-PCR法的扩增被引量：2
- 2007年
- 为深入探索日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)WHe株的致病机理,并为新型疫苗研发提供技术支持,采用长链RT-PCR技术对其基因组全长cDNA进行了扩增鉴定,并对含复杂二级结构的3′末端和5′末端非编码区扩增片段进行了测序分析。扩增结果表明,扩增出的JEV WHe株基因组全长cDNA分子近11 kb大小;非编码区测序分析表明,扩增产物为WHe株所特有。提示长链RT-PCR法可用于JEV WHe株基因组全长cD-NA的扩增。
- 唐青海乔宪凤马秋明何维明郑新民刘西梅安立国颜艳魏庆信
- 关键词：全长CDNA
- 猪胃蛋白酶原A基因的克隆、密码子优化及在毕赤酵母中表达的研究
- 天冬氨酸蛋白酶一般被称为酸性蛋白酶，在酸性条件下可催化水解蛋白质，是目前重要的工业用酶之一，被广泛的应用于饲料添加剂、酿酒、食品、皮革及医药等行业。胃蛋白酶属于天冬氨酸家族，是研究蛋白质结构与功能关系的重要模型。生产实践...
- 安立国
- 关键词：毕赤酵母基因克隆基因表达密码子优化饲料添加剂
- 文献传递
- 湖北白猪胃蛋白酶原A基因cDNA克隆与序列分析被引量：3
- 2007年
- 根据Genebank公布的J04601猪胃蛋白酶原A序列,进行了引物的设计和筛选,通过RT-PCR获得了湖北白猪的胃蛋白酶原A的cDNA序列全长,共1227bp(已提交Genebank,登录号EF108301),其具有一个长度为1158bp的读码框,编码385个氨基酸,其中包含15个氨基酸组成的信号肽,成熟的胃蛋白酶原A由370个氨基酸残基组成。与J04601比较,核苷酸和氨基酸相似性分别为99.3%和98.7%。经PredictProtein分析表明,核苷酸和氨基酸的改变没有造成蛋白质二级结构和功能的变化;并对胃蛋白酶原A基因密码子使用频率和mRNA的二级结构进行了分析,为其载体和宿主的选择以及基因的改造奠定了分子生物学基础。
- 安立国乔宪凤刘西梅唐青海华文君郑新民赵献军
- 关键词：湖北白猪基因克隆
