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官文俊

作品数：6 被引量：28H指数：3
供职机构：中山大学生命科学学院基因工程教育部重点实验室更多>>
发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 3篇活性
  • 2篇肿瘤
  • 2篇酵母
  • 2篇枯草杆菌
  • 2篇基因
  • 2篇基因表达
  • 2篇毕节酵母
  • 1篇蛋白
  • 1篇短肽
  • 1篇血管
  • 1篇血管生成
  • 1篇抑素
  • 1篇英文
  • 1篇生物活性
  • 1篇生物活性测定
  • 1篇噬菌体
  • 1篇噬菌体展示
  • 1篇受体
  • 1篇片段
  • 1篇启动子

机构

  • 6篇中山大学
  • 1篇华南热带作物...

作者

  • 6篇官文俊
  • 5篇张添元
  • 5篇罗进贤
  • 3篇李瑞芳
  • 2篇甘菁菁
  • 2篇顾取良
  • 1篇吴江雪
  • 1篇王芳宇
  • 1篇陈守才
  • 1篇肖凡
  • 1篇贺国安
  • 1篇张爱联

传媒

  • 2篇中山大学学报...
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇Journa...
  • 1篇河南工业大学...

年份

  • 1篇2006
  • 3篇2005
  • 2篇2004
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
用GAP启动子在毕节酵母中组成型表达人血管抑制素(英文)被引量：16
2004年
为探索用GAP启动子 (PGAP)取代AOX1启动子 (PAOX1) ,在毕节酵母 (P .pastoris)中组成型表达外源蛋白的可能性 ,应用PCR方法从P .pastoris染色体中扩增了GAP启动子 ,以其取代诱导型表达载体 pPIC9K上的PAOX1,构建了组成型表达载体 pGAP9K。将人血管抑制素 (AS)基因重组于pGAP9K的多克隆位点 ,获得含AS基因的重组质粒 pGAP9K AS。转化P .pastorisGS115 ,对获得的高拷贝转化子P .pastorisGS115 (pGAP9K AS)进行组成型表达 ,同时以诱导型转化子P .pastorisGS115 (pPIC9K AS)作为对照。SDS PAGE结果显示 :组成型转化子于培养 4d后AS的表达水平已达到高峰 ,分泌量为 5 8mg/L ;而诱导型转化子诱导 4d后表达的AS仅是组成型表达的 70 % ,诱导 6d后达到高峰 ,表达量也只是组成型表达系统表达高峰时 (4d)的 86 %。CAM分析和抗癌实验结果显示 :P .pastorisGS115 (pGAP9K AS)和P .pastorisGS115 (pPIC9K AS)表达的AS均具有抑制血管生成和C5 7BL/ 6J实验小鼠的B16黑色素瘤的生长 ,其平均瘤重抑制率分别达到 90 6 1%和 90 5 4 %。以上结果表明 ,以GAP启动子构建的组成型表达系统具有发酵时间较短、表达水平较高、不用甲醇诱导、操作系统比较简单等优点 ,PGAP可以取代PAOX1在P .pastoris中表达AS及其他外源蛋白。
张爱联罗进贤张添元陈守才官文俊
关键词：组成型表达毕节酵母GAP启动子抗血管生成抗肿瘤
利用枯草杆菌整合表达嗜铬粒蛋白抗真菌片段被引量：6
2004年
为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini＿Tn10内,利用mini＿Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ)。DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上。SDS＿PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外。孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9mm和8mm。
李瑞芳罗进贤张添元贺国安吴江雪官文俊
关键词：基因表达枯草杆菌抗真菌活性
枯草杆菌工程菌高密度发酵抗真菌肽的纯化与活性分析被引量：2
2006年
用30 L发酵罐研究了抗真菌肽枯草杆菌工程菌B.subtilisDB1342(pSC18 66)的高密度发酵工艺.通过补料和蔗糖诱导24 h后,工程菌DB1342(pSC18 66)生物量的A600值达到53,目的蛋白分泌量为25 mg/L.发酵液经硫酸铵沉淀浓缩后,过DEAE-Sephadex A 25离子交换柱和Sephadex G 75分子筛层析进行纯化,产物纯度达到90%以上.抑制真菌实验结果显示:纯化产物能抑制白假丝酵母、镰刀菌和链格孢霉菌的生长.
李瑞芳罗进贤张添元顾取良官文俊甘菁菁
关键词：抗真菌肽枯草杆菌高密度发酵纯化
钙网蛋白N50在毕节酵母中的表达、初步纯化及生物活性测定
本文对钙网蛋白N50在毕节酵母中的表达、初步纯化及生物活性测定进行了研究。文章以实验室保存的pET-N58为模板应用PCR技术扩增了CRTN区编码122-171位氨基酸的DNA片段，克隆至酵母表达载体pPIC9K中，获得...
官文俊
关键词：癌细胞钙网蛋白生物活性
文献传递
趋化因子受体CCR5亲合短肽的筛选被引量：4
2005年
趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12肽库筛选与CCR5特异结合的多肽;经过四轮筛选后,挑选20个阳性噬菌体克隆进行测序,从中得到11个含有AFDWTFVPSLIL序列的小分子肽.含该序列的噬菌体能与抗人CCR5单抗(2D7)竞争性结合CCR5,且合成肽AFDWTFVPSLIL对趋化因子RANTES与CHO/CCR5的结合具有明显的抑制作用,初步证明该小肽与CCR5具有特异性结合作用.
王芳宇张添元罗进贤李瑞芳甘菁菁官文俊肖凡
关键词：噬菌体展示CHO细胞
人tumstatin基因的克隆、表达和抗体制备被引量：1
2005年
应用PCR技术从人胎肺cDNA文库中扩增tumstatin基因编码序列,克隆至pET_3c载体构建非融合表达的重组质粒pET_3c_tum,并在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中获得高效表达。表达蛋白经SDS_聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS_PAGE)分离、切胶回收后免疫新西兰大白兔,获得ELISA效价高达1∶1000的特异性兔抗人tumstatin抗血清。
顾取良罗进贤张添元官文俊
关键词：基因表达抗血清
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