尤宝荣
- 作品数：50 被引量：182H指数：8
- 供职机构：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞周期蛋白D1在石英致人细胞恶性转化中的作用被引量：4
- 2004年
- 目的探讨细胞周期蛋白D1在石英致人胚肺成纤维细胞(HELF)恶性转化过程中所起的作用。方法采用基因重组与基因导入的方法将表达正义和反义细胞周期蛋白D1RNA的pXJ41细胞周期蛋白D1导入石英恶性转化HELF细胞中。采用原位杂交和免疫组化的方法检测细胞中细胞周期蛋白D1基因表达情况,分析细胞周期蛋白D1导入前后细胞生长速度、倍增时间、细胞周期分布、软琼脂克隆形成能力的改变。结果石英诱导HELF细胞恶性转化过程中细胞周期蛋白D1基因过表达,反义细胞周期蛋白D1RNA可抑制石英恶性转化细胞的生长增殖。与石英恶性转化细胞相比,反义pXJ41细胞周期蛋白D1转染细胞培养至第8天时,生长速率下降5869%,倍增时间从210h延长到314h,G1期细胞比例从451%增加到527%,S期细胞比例由403%下降到331%,克隆形成率显著下降,克隆明显变小。结论细胞周期蛋白D1的异常表达与石英恶性转化细胞有密切的关系,高水平表达的细胞周期蛋白D1对维持恶性转化细胞的恶性性状起重要的作用。
- 闫克夏刘秉慈史香林尤宝荣徐茗康宁赵超英
- 关键词：细胞周期蛋白D1石英细胞恶性转化原位杂交
- 汉防己甲素抑制矽肺胶原mRNA表达的研究被引量：28
- 1995年
- 在制备Ｐｒｏα＿１（Ⅰ）、Ｐｒｏα＿１（Ⅲ）胶原ｃＤＮＡ探针的基础上，采用斑点及原位分子杂交技术，观察汉防己甲素对矽肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的ｍＲＮＡ的影响。结果表明染尘２、４个月的矽肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ的含量比正常肺组织明显增加（Ｐ＜０．０５），经汉防己甲素治疗后增高的Ⅰ、Ⅲ型ｍＲＮＡ含量显著减少（Ｐ＜Ｏ．０５）。原位杂交显示，正常肺组织杂交颗粒主要分布于肺泡间隔的成纤维细胞中，而矽肺病变组织杂交颗粒分布于细胞性结节及增厚间质的成纤维细胞中。由此认为矽肺组织胶原积聚是由石英粉尘引起胶原基因的表达增强所致，汉防己甲素能直接或间接地抑制胶原基因的转录，从而减少病变组织中胶原蛋白的合成。
- 何玉先刘秉慈缪庆王海华尤宝荣
- 关键词：矽肺汉防己甲素MRNA基因表达
- 正反义细胞周期蛋白D1真核表达载体的构建与鉴定被引量：4
- 2003年
- 用基因导入和基因重组技术将外源基因细胞周期蛋白D1(cyclinD1)cDNA插入到真核表达载体pXJ41 neo上 ,并用电泳鉴定其结果。结果显示 :用HindIII酶切 ,出现 2 2 9bp、42 7bp及 75 5 4bp片段的重组体为正义pXJ41 cyclinD1真核表达载体 ;出现 42 7bp、1184bp及 65 99bp片段的重组体为反义pXJ41 cyclinD1真核表达载体 ,与理论分析结果相同。表明已成功重组和鉴定了正反义pXJ41 cyclinD1真核表达载体。
- 闫克夏刘秉慈徐茗尤宝荣康宁
- 关键词：真核表达载体基因重组技术反义技术肿瘤
- 染氟成骨细胞差异表达基因的cDNA克隆被引量：14
- 2003年
- 目的 探讨过量氟对成骨细胞基因表达的影响。方法 采用mRNA差异显示聚合酶链反应 (DD PCR)技术 ,对染氟 2周 (氟化钠 2 .0mmol/L)的成骨细胞与正常成骨细胞之间基因的差异表达进行比较分析。结果 在已克隆到的 6个差异表达的基因片段中 ,大鼠核糖体蛋白L5基因、大鼠Na+ K+ ATP酶 β3基因、大鼠细胞核定位信号蛋白质受体α2基因和大鼠高尔基体 p2 8基因在染氟成骨细胞中低表达 ,小鼠遍在蛋白缀合酶基因及我们发现的 1个新基因片段在染氟成骨细胞中表达上调。结论 成骨细胞染氟后基因表达发生改变 ,这些基因多与蛋白质的合成、转运及加工有关 ,提示过量氟可通过改变这些基因的表达而影响成骨细胞的蛋白质合成。另发现 1个与过量氟相关的新基因。
- 缪庆刘秉慈张绪超尤宝荣徐茗康宁
- 关键词：氟中毒成骨细胞基因表达CDNA克隆聚合酶链反应
- 联合用药对大鼠实验性矽肺的治疗研究被引量：1
- 1997年
- 为探讨不同或相同作用机制的抗矽肺药物联合用药对大鼠矽肺的治疗作用，选用克矽平与汉防己甲素、汉防己甲素与磷酸羟基喹哌、柠檬酸铝与磷酸羟基喹哌联合用药。除停药治疗组外，预防性治疗组和病后治疗组的疗效测定值综合分析证明，联合用药对大鼠矽肺的疗效明显优于单一用药，特别是“克＋汉”和“汉＋羟”两组疗效更为显著，为临床治疗矽肺提供了参考依据。
- 邢康吉邹昌淇李权贵杜庆成余兰曲雷尤宝荣刘秉慈
- 关键词：矽肺联合用药克矽平汉防己甲素
- 维生素C逆转苯并(a)芘致细胞周期改变的E2F通路被引量：1
- 2006年
- 目的探讨转录因子E2F1和E2F4在维生素c逆转苯并（a）芘引起人胚肺成纤维细胞（HELF）细胞周期改变中的作用，及其与细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、细胞周期蛋白依赖激酶4（CDK4）的上下游关系。方法接种细胞到培养瓶，待生长至70％一80％时，维生素c预处理细胞1h后，用苯并（a）芘刺激细胞24h，运用流式细胞术测定细胞周期时相分布，用免疫印迹法检测蛋白含节，用Gel-Pro 3．0软件对条带光强度进行分析，脂质体转染法建立稳定转染反义cyclin D1或反义CDK4的HELF系，应用反义技术证明通路的上下游关系。结果苯并（a）芘诱导HELF中cyclin D1、CDK4、E2F1和E2F4的蛋白表达升高，并伴随s期细胞百分率从（33．5±3．2）％上升至（41．1±0。2）％。维生素C可降低苯并（a）芘诱导的HELFS期细胞百分率至（33.2±0．6）％，并抑制苯并（a）芘诱导的HELF上述蛋白的表达。反义cyclin D1和反义CDK4均可抑制苯并（a）芘诱导的HELF上述蛋白的表达，反义cyclinD1可使苯并（a）芘诱导的HELFS期细胞百分率降低至（31．2±1．3）％。维生素C联合反义cyclinD1与单独反义cyclinD1相比，可进一步降低苯并（a）葩诱导的HELF上述蛋白的表达，且能够抑制苯并（a）芘诱导的HELF的s期细胞百分率，使其从（41．1±0．2）％下降为（34．0±0．3）％。维生素c联合反义CDK4可降低苯并（a）芘诱导的HELF的s期细胞百分率，使其从（41．1±0．2）％下降为（33．7±1．5）％，而且与单独反义CDK4相比，可进一步降低苯并（a）芘诱导的HELF的s期细胞百分率。结论维生素C可能通过cyclinD1-CDK4／E2F-1／4通路逆转苯并（a）芘引起的细胞周期改变。
- 高艾刘秉慈沈福海杜宏举黄传书贾效伟尤宝荣叶萌
- 关键词：抗坏血酸细胞周期蛋白D1
- 接触矽尘及电焊烟尘工人肺癌组织中p53基因的初步研究被引量：8
- 1997年
- 为了从分子水平揭示矽尘与肺癌的关系，采用免疫组化和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法对３６例矽尘相关肺癌和６例电焊烟尘相关肺癌的抑癌基因ｐ５３的突变进行了研究。样品为石蜡包埋的肺肿瘤组织块，平均保存１３．４年。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析显示，１８例病例中存在异常的电泳条带（２０处突变），占所测４２个样品的４２．９％，其中５０％的突变发生于第８外显子上（１０／２０）。以上发现有别于非职业性肺癌的基因突变谱。在非职业性肺癌中，第８外显子的突变频率介于１７．５％～２３．５％。尘肺相关肺癌基因突变的发生频率，在不同病理分类的肺癌中也与普通肺癌不同。在普通肺癌中，小细胞肺癌ｐ５３基因突变率最高（７０％），肺腺癌最低，为３３％。而本研究结果相反，肺腺癌最高，小细胞肺癌为最低，分别为５３．９％和３０．８％。免疫组织化学观察也显示了很高的ｐ５３突变体蛋白表达的发生率（４６．９％）。本研究仅做两例测序分析，意外地发现，探测到的两处点突变均发生于ｐ５３基因突变的非热点区，而且均发生于第１４４密码子上。基因突变谱的不同，显示矽尘、电焊烟尘中可能具有特异的致癌物和致癌机理。
- 刘秉慈周培宏缪庆缪庆尤宝荣王海华关砚生
- 关键词：基因P53矽肺电焊烟尘
- 石棉及矽尘相关肺癌p53基因突变与肿瘤病理学分类
- 1997年
- 王海华刘秉慈付德辰周培宏缪庆尤宝荣
- 关键词：肺癌矽尘P53基因病理
- 石棉诱导细胞凋亡改变的研究被引量：3
- 1999年
- 目的探讨石棉诱导的细胞凋亡及其相关基因ｂｃｌ２及ｂａｘ表达的改变。方法大鼠石棉染尘。收集石蜡包埋的石棉作业工人肺癌组织块。ＴＵＮＥＬ法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｍｅｄｉａｔｅｄｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，末端脱氧核糖核酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法）观察凋亡细胞分布及数量。生物素抗生物素蛋白ＤＣＳ（ａｖｉｄｉｎＤｃｅｌｓｏｒｔｅｒ）间接免疫荧光法观察ｂｃｌ２及ｂａｘ表达改变，琼脂糖凝胶电泳进行ＤＮＡ梯状电泳分析。结果大鼠染尘后４０天，细胞凋亡增强、ｂｃｌ２表达减少、ｂａｘ蛋白含量升高，可见ＤＮＡ特征性梯度电泳条带；大鼠染尘后７０天，细胞凋亡明显减弱。在石棉作业工人肺癌组织中未见明显细胞凋亡。结论石棉可诱导肺组织细胞凋亡发生改变，这种改变有时段性。凋亡相关基因表达也有相应变化。
- 刘秉慈黄筚辉许增禄徐健徐健王海华缪庆尤宝荣
- 关键词：细胞凋亡BCL-2BAX肺癌
- 胶原蛋白的天狼星红测定法被引量：1
- 1993年
- 介绍了灵敏的测定胶原蛋白的天狼星红法。该方法较传统的胶原蛋白的羟脯氨酸测定法简便省时,适用于胶原蛋白的定量分析。
- 刘秉慈黄英刘玉英刘薇尤宝荣李玉瑞
- 关键词：胶原矽肺纤维化
