尤征英
- 作品数：22 被引量：20H指数：3
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：安徽省科技攻关计划国家自然科学基金安徽省国际科技合作基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 利用家蚕同时合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的方法
- 本发明公开了一种利用家蚕同时合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的方法。具体是将能够合成、分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1和蛋白2的转基因家蚕品种杂交，育成杂交品种；另一方面进一步通过同蛾区阳性个体自交留种，选择出2个牵引丝...
- 钟伯雄尤征英叶露鹏钱秋杰
- 一种类转录激活子效应蛋白介导的高效转基因方法
- 本发明公开了一种类转录激活子效应蛋白介导的高效转基因方法。采用分子生物学技术构建包含类转录激活子效应蛋白DNA序列和piggyBac转座酶DNA序列的辅助质粒，在体外转录成mRNA；采用显微注射法将该辅助质粒的mRNA与...
- 钟伯雄叶露鹏钱秋杰尤征英车家倩张玉玉宋佳
- 文献传递
- 家蚕BmARM-like基因的克隆、表达与亚细胞定位研究
- 本项目的前期研究工作通过荧光差异显示技术，比较分析了家蚕(Bombyx mori)对BmNPV不同抗性品系基因表达的差异，获得了一个差异表达的片段。本研究通过在家蚕数据库中的比对，获得了该片段所在基因的完整ORF框，分析...
- 尤征英
- 关键词：亚细胞定位
- 文献传递
- 利用黑寡妇蜘蛛牵引丝基因培育超强度蚕丝家蚕新品种
- 蜘蛛牵引丝具有出色的机械性能，本研究采用家蚕丝腺生物反应器获得了黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白三种不同倍数重复单元的重组蛋白1 和一种重组蛋白2 的复合丝纤维，研究结果表明了重组蛋白1 的分子链越长，则复合丝纤维的机械性能越好，两...
- 钟伯雄尤征英叶露鹏钱秋杰叶小刚宋佳
- 家蚕丝腺生物反应器表达狂犬病病毒核蛋白被引量：3
- 2013年
- 【目的】采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统,尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白(RVNP)的技术体系,为生产基因工程疫苗奠定基础。【方法】通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列,采用家蚕丝胶蛋白基因(Ser1)启动子为特异性启动子,将RVNP构建到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体(pBA3EGFP)中,并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。【结果】G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个,蛾圈阳性率为59.09%。PCR实验证实RVNP已经整合到家蚕基因组中,Western blot分析表明RVNP蛋白可能附着于丝胶蛋白并随家蚕吐丝行为分泌到蚕茧中。【结论】获得了能够表达外源的RVNP蛋白的转基因家蚕品系,该系统有望成为高效、低廉、稳定地生产狂犬病基因工程疫苗的技术体系之一。
- 尤征英危浩阮系真叶露鹏王少华周继勇钟伯雄
- 关键词：狂犬病PIGGYBAC家蚕
- 家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析被引量：3
- 2011年
- 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。
- 杨莹王成林徐家萍尤征英凌琳周敬波
- 关键词：家蚕果蝇抗菌肽CECROPIN原核表达基因结构
- 家蚕对BmNPV抗病性与中肠消化酶活性的关系被引量：13
- 2009年
- 对6个现行家蚕品种中肠消化酶活性与家蚕对BmNPV病毒抗性比较与分析,以期寻找现行家蚕品种消化酶的活性与抗性的关系,为辅助家蚕育种及品种推广奠定基础。以DNS法测定不同品种海藻糖酶活性,以Fo-lion-酚法测定不同品种蛋白酶活性,以及以铜皂法测定脂肪酶活性,同时对不同品种家蚕4龄起蚕经口添加BmN-PV病毒进行抗性调查分析。结果表明,蛋白酶、脂肪酶酶活顺序为664×663较低,667×668相对较高,其他品种处于中间层次,对应抗性测定结果的相关分析表明,活性越强抗性越强,呈显著正相关关系;而海藻糖酶的活性与抗性的关系没有较好的相关性。因此,家蚕中肠消化液的蛋白酶、脂肪酶可能与家蚕对BmNPV病毒抗性有关。
- 刘震鲍先巡尤征英杨莹徐家萍
- 关键词：家蚕海藻糖酶核型多角体病毒抗病性
- 用标记基因预测外源基因表达量及筛选转基因生物的方法
- 本发明公开了一种用标记基因预测外源基因表达量及筛选转基因生物的方法。采用分子生物学技术构建包含有标记基因和外源基因两个相邻且转录方向相同的表达框的转基因表达质粒；采用显微注射法将转基因质粒与辅助质粒一起导入到生物的基因组...
- 钟伯雄叶露鹏钱秋杰张玉玉尤征英王少华车佳倩宋佳
- 文献传递
- 利用黑寡妇蜘蛛牵引丝基因培育超强度蚕丝家蚕新品种
- 蜘蛛牵引丝具有出色的机械性能,本研究采用家蚕丝腺生物反应器获得了黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白三种不同倍数重复单元的重组蛋白1和一种重组蛋白2的复合丝纤维,研究结果表明了重组蛋白1的分子链越长,则复合丝纤维的机械性能越好,两者为极...
- 钟伯雄尤征英叶露鹏钱秋杰叶小刚宋佳
- 文献传递
- 利用家蚕丝腺生物反应器合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的方法
- 本发明公开了一种利用家蚕丝腺生物反应器合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的方法。先构建家蚕合成分泌黑寡妇蜘蛛牵引丝蛋白1的载体pBac[3xP3-DsRed]-MaSp1质粒，再利用显微注射将质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内...
- 钟伯雄尤征英叶露鹏钱秋杰
