左振华
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 草鱼(Ctenopharyngodon idellus)IAP基因克隆、表达及酵母双杂交系统cDNA文库构建
- 细胞凋亡(Apoptosis)是指在基因控制下的细胞自主的有序性的死亡,亦称为程序性细胞死亡(programme cell death,PCD)。lAP为近年来发现的新一类细胞内凋亡抑制蛋白,在许多物种中广泛存在,是细胞...
- 左振华
- 关键词:草鱼细胞凋亡抑制蛋白定量PCR酵母双杂交
- 文献传递
- 草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因cDNA的克隆与表达分析被引量:2
- 2009年
- 利用快速扩增cDNA末端(rapid amplification cDNA end,RACE)技术获得草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因全长cDNA序列为2093bp,含有1个1944bp的开放阅读框,5′非编码区长25bp,3′非编码区长124bp,可编码647个氨基酸.生物信息学分析表明,在IAP的N端无氨基酸残基组成的信号肽;与斑马鱼的同源性最好,其次是斑猫鲿;在系统进化上,与斑马鱼、斑猫鲿共聚为1支.用半定量RT-PCR分析正常及细菌诱导下草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因在不同组织中的表达分布,正常情况下,凋亡抑制蛋白基因在所取的7种组织中均有表达,其中脑、肠和肾表达最高,肝和心脏次之,鳃和肌肉最低,但差异不显著;用嗜水气单胞菌人工感染24h后,所有组织中的IAPmRNA水平平均降低约26%,以肝脏和肌肉降低较为明显,在感染48h后,所有组织中的IAPmRNA水平平均升高约4%,其中心脏、肝脏和鳃分别升高8%、16%、19%,这表明草鱼细胞凋亡抑制蛋白可能参与了机体对嗜水气单胞菌感染的免疫应答.
- 左振华唐建州张钊唐春华陈韬张东裔
- 关键词:草鱼凋亡抑制蛋白快速扩增CDNA末端
- 草鱼CRP基因全长cDNA的克隆及其表达分析被引量:3
- 2009年
- 利用草鱼C-反应蛋白(CRP)的EST序列(CK233056)设计引物,采用快速扩增cDNA末端(SMART-RACE)的方法克隆CRP基因的5′末端,获得1个约520bp的cDNA片段.将该片段与EST拼接,得到CRP基因全长cDNA,长度为889bp,含有1个672bp的开放阅读框,两侧分别有74bp和143bp的5′和3′非翻译区域(open reading frame,ORF),CRP基因编码224个氨基酸残基,N端含有15个氨基酸残基的信号肽.利用RT-PCR半定量法对健康及被嗜水产气单胞菌人工感染的草鱼的心脏、脑、前肠、肾脏、肝胰脏、肌肉、脾等组织CRP的mRNA表达水平进行检测,结果表明,CRP基因在7种组织中均有表达,表达水平差异不明显.在人工感染24h后,各组织中CRP的mRNA水平平均升高5倍左右,与哺乳动物和一些鱼类在炎症反应中血清CRP水平升高一致,而人工感染48h后,除心脏和肌肉组织中有显著降低外,其他组织没有明显变化,仍维持较高水平.
- 唐春华杨丹左振华黄小西陈韬张东裔
- 关键词:C-反应蛋白RACERT-PCR组织特异性表达草鱼
- 草鱼α1-抗胰蛋白酶基因cDNA全长克隆与表达分析被引量:3
- 2008年
- 采用RACE技术获得α1-抗胰蛋白酶基因cDNA全长序列为1 469 bp,开放阅读框为1 329 bp,可编码442个氨基酸。5′非编码区长19 bp,3′非编码区长121 bp。核苷酸序列分析表明,在N端可能存在一个由1~21位氨基酸残基组成的信号肽;与斑马鱼的同源性最好,其次是虹鳟;在系统进化上,与在斑马鱼、虹鳟共聚为一个大支。用半定量RT-PCR分析正常及细菌诱导下草鱼α1-抗胰蛋白酶基因在不同组织中的表达分布。结果显示:正常情况下,草鱼α1-抗胰蛋白酶在肝脏表达最丰富,在脾脏、前肾、前肠、中肠、后肠和也有少量表达;细菌诱导下,肝脏中表达最强,前肾、脾脏、肠道中表达均明显提高,心脏和后肾中也出现较高表达。提示α1-抗胰蛋白酶可能参与了机体对嗜水气单胞菌感染的免疫应答。
- 杨子荣彭宽杨丹唐春华左振华徐波陈韬
- 关键词:草鱼Α1-抗胰蛋白酶快速扩增CDNA末端