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徐志豪
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
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发文基金:
教育部“新世纪优秀人才支持计划”
江苏省自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
化学工程
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合作作者
孙志浩
江南大学生物工程学院工业生物技...
倪晔
江南大学生物工程学院工业生物技...
王骏超
江南大学生物工程学院工业生物技...
宿宇宁
江南大学生物工程学院工业生物技...
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年份
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2012
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不对称还原制备光学纯(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的双酶共表达重组菌的构建
被引量:2
2012年
克隆了来自于枯草芽孢杆菌的羰基还原酶基因IolS和葡萄糖脱氢酶基因GDH,采用Ni-NTA镍亲和层析柱对重组蛋白IolS进行纯化,并对纯酶进行了酶学性质研究.结果表明,该羰基还原酶的最适温度和pH值分别为30oC和6.0;在40oC以下具有较好的热稳定性;在pH5.57.0的偏酸性范围内能保持75%以上的酶活.采用三种策略构建了IolS和GDH的共表达重组质粒,结果发现,采用双启动子的重组质粒能够实现羰基还原酶IolS的高效表达,粗酶液中的IolS和GDH的比酶活均达到1.5U/mg.运用该重组菌对10g/L的OPBE进行不对称还原,反应15h后,底物转化率大于99%,产物(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的ee值达到99.5%.
宿宇宁
倪晔
王骏超
徐志豪
孙志浩
关键词:
羰基还原酶
葡萄糖脱氢酶
共表达
(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯
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