徐焕宾
- 作品数:24 被引量:90H指数:5
- 供职机构:复旦大学上海医学院免疫学系更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 可用于短肽基因免疫的真核表达载体的构建及应用被引量:3
- 2005年
- 目的: 构建可高效表达表位短肽的基因免疫载体, 并研究其在表位为基础的基因免疫中的免疫效应。方法:将基因表达调控序列插入pUC19载体中, 加入KOZAK增强序列、基因克隆位点及转录起始和终止码, 构建可表达短肽的表达载体, 进一步将表位基因克隆到构建的真核载体中,并研究其在体外的表达和体内基因免疫特性。结果: 成功地构建了高效表达短肽的真核表达载体, 并能在小鼠体内诱导表位特异性的免疫应答。结论: 本实验中构建的含PEC的载体以表位为基础的DNA疫苗研究提供了新的设计策略和工具。
- 徐焕宾徐薇储以微王缨张瑞华熊思东
- 关键词:表位基因免疫
- CXCL16在小鼠免疫性肝损伤中的作用
- 徐焕宾
- 关键词:趋化因子趋化粘附
- 集聚蛋白在淋巴细胞活化中的作用
- 2005年
- 目的研究在神经突触形成中发挥重要作用的集聚蛋白(agrin)是否在淋巴细胞中表达并影响淋巴细胞的活化和免疫突触的形成。方法应用RT-PCR检测集聚蛋白在静止和活化淋巴细胞中的表达,并应用实时定量PCR检测分析集聚蛋白的表达量与淋巴细胞活化之间的关系;用抗集聚蛋白抗体观察其对淋巴细胞增殖和免疫突触形成的影响;应用共聚焦显微镜观察集聚蛋白是否参与免疫突触的形成。结果RT-PCR结果显示集聚蛋白在静止和活化的淋巴细胞中均有表达,且经过实时定量PCR分析发现,集聚蛋白的表达和淋巴细胞的活化密切相关;当集聚蛋白被阻断后淋巴细胞的增殖被显著抑制;经共聚焦显微镜观察发现,集聚蛋白在活化的淋巴细胞中以帽化结构形式存在,且和CD3分子共定位,抗集聚蛋白抗体可以明显减少这种帽化结构的形成。结论在神经突触中发挥重要作用的集聚蛋白同样存在于淋巴细胞,可能通过影响淋巴细胞的免疫突触的形成参与淋巴细胞的活化。
- 张进平苏丽萍乔宾徐焕宾张瑞华储以微王缨熊思东
- 关键词:淋巴细胞活化免疫突触RT-PCR检测淋巴细胞增殖活化淋巴细胞微镜观察
- CVB3感染通过MCP-1介导病毒性心肌炎小鼠单个核细胞迁移被引量:2
- 2005年
- 目的:研究B3型柯萨奇病毒(CVB3)感染与病毒性心肌炎(VMC)炎症细胞迁移的关系及机制。方法:采用差异贴壁法分离小鼠心肌细胞;趋化试验分析心肌细胞培养上清对VMC小鼠外周血单个核细胞(PMNC)的趋化性;实时定量RT PCR分析心肌细胞MCP 1的表达。结果:( 1)CVB3感染心肌细胞培养上清对VMC小鼠PMNC的趋化性明显增强。( 2 )CVB3感染2小时后MCP 1的表达开始升高,至6小时达到高峰,8小时下降;随着CVB3感染量的增加,MCP 1的表达明显升高。( 3)2 5 μg/ml抗MCP 1抗体处理后,CVB3感染心肌细胞培养上清对VMC小鼠PMNC的趋化性下降5 4 % (P <0 0 1) ;5 μg/ml抗MCP 1抗体处理后,趋化性下降的幅度与2 5 μg/ml抗MCP 1抗体处理的相比未见明显差异(P >0 0 5 )。结论:CVB3感染通过MCP 1介导VMC小鼠单个核细胞迁移。
- 沈燕陈瑞珍储以微徐焕宾熊思东
- 关键词:CVB3MCP-1心肌细胞趋化作用
- 新发现的CXCL16趋化因子及其受体被引量:26
- 2003年
- 一种新的免疫系统分子———由入侵部位的防御性免疫细胞产生的趋化因子CXCL16。这是迄今为止所发现的第二种可以膜结合方式合成的趋化因子。它属于CXC家族 ,同时具有CC家族和CX3C家族 (如Fractalkine)趋化因子的特征 ,它包含跨膜区和粘蛋白 (mucin)样结构 ,以膜结合型和分泌型两种形式存在 ,主要表达于APC表面。其受体为BONZO/CXCR6 /STRL33/TYMSR的“孤儿受体” ,该受体也是SIV/HIV的辅助受体 ,主要表达于Th1细胞、NK细胞和激活的CD8+ T细胞。CXCL16 /BONZO可能在效应T细胞的迁移、APC和CD8T细胞的相互作用。
- 徐焕宾熊思东
- 关键词:受体CXCR6APC胸腺细胞CTL
- CXCL16抗体可阻断BCG和LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤被引量:8
- 2005年
- 目的 研究CXCL1 6抗体体内阻断对小鼠免疫性肝损伤的影响。方法 克隆、表达和纯化小鼠趋化因子CXCL1 6活性蛋白 ,免疫动物制备特异性抗体。抗体体内注射免疫性肝损伤模型小鼠 ,观察CXCL1 6抗体对肝脏损伤、ALT水平及小鼠生存率的影响。结果 获得了高纯度的活性CXCL1 6重组蛋白及其特异性抗体 ,特异性抗体阻断明显改善肝脏的病理损伤 ,降低血清中ALT水平、延长模型组小鼠的存活时间。结论 获得了具有趋化活性的CXCL1 6蛋白和特异性抗体 ,CXCL1 6抗体对卡介苗和脂多糖诱导的小鼠肝损伤具有显著保护作用。
- 徐焕宾龚燕萍储以微蒋正刚熊思东
- 关键词:CXCL16免疫性肝损伤LPS诱导阻断BCG趋化活性
- 一种质粒及其构建方法和在艾滋病毒载量测定上的应用
- 一种质粒及其构建方法和在艾滋病毒载量测定上的应用,属艾滋病防治领域。该质粒是一种含有人艾滋病毒核心抗原基因,以大肠杆菌JM109为载体菌的pSPgag737/JM109 CGMCC NO.0486。构建方法是将HIV-1...
- 贲昆龙夏雪山徐焕宾冯汉平
- 文献传递
- CXCR4在肺癌转移中的作用及其机制研究被引量:21
- 2005年
- 目的探讨CXCR4在肺癌转移中的作用及其机制。方法将CXCR4不同表达水平的肺癌细胞(95C、95C pC、95C X4、95D、95D pC、95D ASX4)接种于裸鼠皮下并分析其转移能力。分别通过趋化侵袭实验、明胶酶谱法、黏附实验、RT PCR法检测CXCR4/SDF1对肺癌细胞迁移、基质金属蛋白酶(MMP2)活性、黏附能力、生长相关癌基因α(GROα)表达的调控;通过流式细胞术和共聚焦显微镜观察肺癌细胞内纤维肌动蛋白的合成和聚合情况;Western印迹分析CXCR4/SDF1对ERK1/2磷酸化的影响。结果CXCR4不同表达水平的肺癌细胞在裸鼠体内具有不同的转移能力,95D ASX4组有2/5的小鼠发生了转移,其肺转移结节的数目明显少于95D、95D pC组(P=0.044)。CXCR4特异配体SDF1α可以诱导肺癌细胞的迁移和细胞骨架蛋白纤维肌动蛋白的合成和聚合;SDF1α促进肺癌细胞MMP2活性、黏附能力和GROα表达的增加;CXCR4中和抗体可以在一定程度上抑制这些作用。SDF1α可以诱导ERK1/2的磷酸化。结论肺癌转移在一定程度上依赖于CXCR4/SDF1的相互作用,他们通过调控肺癌细胞的运动性、MMP活性、黏附能力及GROα的表达参与肺癌的转移。
- 苏丽萍张进平徐焕宾陈晋王缨储以微熊思东
- 关键词:CXCR4肺癌转移细胞骨架蛋白明胶酶谱法相关癌基因微镜观察
- 趋化因子及其受体在连接天然免疫与获得性免疫中的作用被引量:1
- 2003年
- 病原侵入组织引起天然免疫中巨噬细胞 (M)分泌趋化因子 ,趋化因子 /趋化因子受体的表达与非成熟树突状细胞 (DC)的迁移、成熟、归巢以及获得性免疫应答密切相关。整个过程涉及许多趋化因子和趋化因子受体的表达变化 ,正是这种表达变化的精细调节启动了免疫细胞的定向迁移、归巢和游走 ,搭起天然免疫和获得性免疫的桥梁。
- 徐焕宾王缨熊思东
- 关键词:趋化因子趋化因子受体树突状细胞天然免疫获得性免疫
- B细胞表位基因疫苗诱导特异性免疫应答及特性研究被引量:5
- 2005年
- 为研究特异性B细胞表位短肽为基础的DNA疫苗的免疫应答特性,将鸭乙肝病毒Pre-S中的P127-138B细胞表位基因克隆到含多肽表达盒(peptideexpressioncassette,PEC)的载体中,体外转染C2C12肌肉细胞,用DOT-EIA检测表位短肽的表达,进一步分别免疫不同品系的BALB/c和C57BL/6小鼠,比较MHC限制性对免疫应答的影响。结果表明,重组pECk-b1b2载体可在体外瞬时高效表达,并保持原有的免疫活性;体内基因免疫能诱导针对表位短肽的特异性抗体;不同品系小鼠抗体产生动力学相似,但抗体滴度差异显著。这些结果提示,以B细胞表位为基础的基因免疫可诱导特异性免疫应答,为DNA疫苗的分子设计提供了新的思路和应用前景。
- 徐焕宾徐薇王缨储以微张瑞华熊思东
- 关键词:抗原表位基因疫苗免疫应答