文会龙
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠胚胎脊髓源性神经干细胞的培养和分化被引量：4
- 2006年
- 目的 探讨大鼠脊髓源性胚胎神经干细胞体外分离培养增殖及分化，为进一步的实验研究提供基础。方法 取孕14～16d的SD大鼠胚胎脊髓在条件培养基中培养增殖传代分化，用神经干细胞特异性抗体-巢蛋白（Nestin）鉴定克隆细胞，用特异性的单克隆抗体鉴定克隆球诱导分化后的细胞。用Brdu免疫荧光对神经干细胞传代能力检测。结果 获得了大量能自我增殖并分化的神经干细胞，分化后主要产生神经元特异性微管相关蛋白染色阳性的神经元质纤维酸性蛋白阳性的星型胶质细胞和少突胶质细胞三种神经组织细胞。Brdu免疫荧光显示神经球中绝大多数细胞为Brdu阳性细胞，其细胞核中可见荧光标记物。结论 大鼠胚胎脊髓能分离、培养出神经干细胞，并能诱导分化为神经元、星型胶质细胞和少突胶细胞。
- 文会龙李少华汪洋
- 关键词：神经干细胞分化
- 直流电刺激对鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元凋亡相关基因表达的影响(英文)被引量：6
- 2004年
- 背景:周围神经损伤能致脊髓神经元的凋亡,严重影响神经修复后功能的恢复。电刺激能有效促进神经的再生,但对神经元凋亡的影响研究较少。目的:观察直流电场对鼠坐骨神经切断后脊髓运动神经元bcl-2,bcl-X/L,bax及c-jun表达的作用,探讨电刺激对预防细胞凋亡的机制。设计:采用随机对照实验研究。地点和对象:实验在上海同济大学附属铁路医院骨科完成,对象为雄性SD大鼠30只,6周龄,体质量180～220g。干预:将雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组15只大鼠。用10g/L硫喷妥钠(5mg/100g)腹腔麻醉后,在大鼠右侧臀肌间隙显露坐骨神经,距梨状肌下缘0.5cm处将坐骨神经切断,近端以5-0尼龙线作双重结扎,远端切除1cm后埋入股二头肌中,关闭切口。沿棘突后方正中切口,在T10～L3右侧椎板及棘突间钝性剥离骶棘肌,切除椎板,将电刺激器阳性盘状电极板置入T10椎板下硬膜囊之腹侧,阴性盘状电极板置入L3椎板上硬膜囊背侧,对照组置入无输出电流的刺激器,分批于术后1,4,7,14,28d取材。实验操作由同一组人员完成。主要观察指标:脊髓bcl-2,bcl-X/L,bax及c-jun的阳性运动神经元数。结果:坐骨神经切断后4,7,14d,电刺激组脊髓运动神经元bcl-2阳性数分别为(28.67±1.53),(34.67±1.53),(41.33±1.53)个;bcl-X/L阳性数分别为(23.00±4.36),
- 李少华侯铁胜顾昕陈正启李振华朱裕昌史永振张立国文会龙
- 关键词：直流电刺激坐骨神经切断脊髓运动神经元凋亡相关基因基因表达
- 腺病毒载体AD-BDNF-EGFP的构建和在神经干细胞中的表达
- 随着现代交通以及建筑的发展，脊髓损伤(spinal cord injury SCI)患者的数量与日俱增。外伤性的脊髓损伤危害严重，常导致截瘫。包括外科手术、药物治疗等在内，很多方法正在用于治疗脊髓损伤，恢复患肢功能。神经...
- 文会龙
- 关键词：神经干细胞BDNF腺病毒载体
- 文献传递
- 腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建和在神经干细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的研究腺病毒载体Ad-BDNF-EGFP的构建及其在神经干细胞(NSCs)中的表达。方法通过RT-PCR从大鼠海马中获得BDNF基因,通过基因克隆、HEK293包装,获得含增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体pAd-BDNF-EGFP,将其感染原代培养的神经干细胞,观察EGFP及BDNF2种基因的表达,镜下测定转染率,并检测RT-PCR产物,证实BDNF的存在。转染后的神经干细胞经G418筛选,抗性细胞传代扩增后获得成功转染BDNF基因的NSCs克隆。结果荧光显微镜下可见感染后的NSCs表达EGFP而发出绿色荧光;通过RT-PCR证明感染后的NSCs具有表达BDNF的能力;用ELISA鉴定细胞上清中分泌的BDNF,72h的含量达到最高值,为12.78ng/mL;证明通过构建病毒的感染可以使神经干细胞获得分泌BDNF的能力,且EGFP基因可作为神经干细胞移植研究中良好的示踪剂。结论腺病毒病毒介导EGFP基因及BDNF基因在大鼠胚胎神经干细胞中成功表达,为应用以神经干细胞直接作为基因靶细胞,介导基因治疗中枢神经系统疾病奠定了基础。
- 李少华文会龙顾昕汪洋吕立夏李艳娜那曼丽崔银江
- 关键词：神经干细胞脑源性神经营养因子腺病毒载体
- 电刺激对鼠坐骨神经横断后脊髓神经元凋亡的影响的实验研究
- 李少华侯铁胜陈正启史永振李振华文会龙顾昕
- 该项目采用切断鼠坐骨神经的模型，研究周围神经损伤引起脊髓神经原凋亡的变化规律及电刺激对神经原凋亡调控基因表达的影响。通过对脊髓神经原进行光镜、电镜的形态学观察，使用免疫组化技术检测脊髓神经原的Bax、Bcl-2、Bcl-...
- 关键词：
- 关键词：脊髓损伤电刺激细胞凋亡
- 组织移植(再植)血管痉挛危象的基础研究
- 李少华顾玉东李继峰陈正启文会龙
- 该项目通过建立延迟断蒂组织移植模型，研究延迟组织移植血管痉挛危象发生率减少的原因，并寻找最佳断蒂时间。该研究通过对局部NO和ET的研究，提出对术中出现顽固性血管痉挛的患者，在16`24小时后延迟断蒂移植，为顽固性血管痉挛...
- 关键词：
- 关键词：血管痉挛一氧化氮内皮素
