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MIP—2γ/GM—CSF融合蛋白的构建、表达与生物学功能研究: γ型巨噬细胞炎性蛋白—2(MIP—2γ)是第二军医大学免疫研究所从人树突状细胞(DC)cDNA文库中独立克隆到的一个新型不含ELR基序CXC类趋化因子。本所前期研究工作表明MIP—2γ不仅对树突状细胞、中性粒细胞等造血与...; 张意陈国友于益芝蒋应明黄欣施群英曹雪涛; 文献传递

重组人干细胞因子的原核表达载体、工程菌及制备方法: 本发明涉及高效表达重组人干细胞因子(rhSCF)的表达载体、工程菌及制备方法。本发明还提供了通过优选的培养基成分及优化发酵参数，建立了工程菌高密度发酵方法。还提供了通过包涵体变性、蛋白复性、色谱分离制备高纯度重组人干细胞...; 陈国友蒋应明黄欣张意卢琳施群英曹雪涛; 文献传递

基因工程人β干扰素的原核表达及纯化研究被引量：7: 2001年; 目的 :摸索一种适合于中试生产的点突变重组人 β干扰素 ( 17Ser IFN β)发酵与纯化工艺。方法 :研究不同培养基和热诱导时间对17Ser IFN β表达的影响 ;观察pH、蛋白浓度和层析条件对17Ser IFN β纯化的影响。结果 :17Ser IFN β工程菌在含甘油、酪蛋白水解物及微量元素的M9培养基中 ,17Ser IFN β表达量明显增加。灰度扫描显示热诱导 4h后的表达量最高 ,目的蛋白可达菌体总蛋白的 2 0 %以上。17Ser IFN β可以相对特异性地被仲丁醇抽提至有机相中 ,纯度达 80 % ,经S2 0 0凝胶过滤柱层析后纯度达 90 % ,用G2 5柱转换缓冲液 ,使缓冲液pH值 >8,同时去除缓冲液中的还原剂DTT ,将复性后的样品用C4反相柱层析进行精制 ,最终获得纯度 >98%和比活性 >3× 10 7U/mg的17Ser IFN β制品。结论 :成功地建立了注射用新型重组人 β 干扰素的中试生产工艺 ,为随后进行的临床前研究及临床试验打下基础。; 陈国友蒋应明张意黄欣厉永建施群英王全兴张明徽何龙曹雪涛; 关键词：Β-干扰素蛋白纯化原核表达基因工程

基因工程人干细胞因子原核表达、纯化及生物学活性研究被引量：2: 2002年; 目的：探索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子（recombinant human stem cell factor,rhSCF）的发酵表达与纯化工艺。方法：研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响；探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响。结果：rhSCF工程菌在含甘油、酪蛋白水解物、酵母浸出粉、胰蛋白胨及微量元素的培养基中表达量最高。灰度扫描显示热诱导后2h开始表达，6h表达量最高，目的蛋白约可达菌体总蛋白30％。高表达蛋白经复性后，可用酸沉淀作粗分离纯化，随后用阳离子交换层析分离，纯度达80％，经反相层析去除二聚体后，最后用DEAE柱浓缩后并经S200转换缓冲液，最终获得纯度＞95％和经活性＞6×10^5U/mg的rhSCF制品。结论：成功地建立了注射用rhSCF的中试生产工艺，为随后进行的临床前研究及临床试验奠定基础。; 陈国友厉永建蒋应明张意黄欣姜波施群英卢琳陆君燕; 关键词：基因工程干细胞因子蛋白纯化生物学活性

重组人干细胞因子的原核表达载体、工程菌及制备方法: 本发明涉及高效表达重组人干细胞因子(rhSCF)的表达载体、工程菌及制备方法。本发明还提供了通过优选的培养基成分及优化发酵参数，建立了工程菌高密度发酵方法。还提供了通过包涵体变性、蛋白复性、色谱分离制备高纯度重组人干细胞...; 陈国友蒋应明黄欣张意卢琳施群英曹雪涛; 文献传递

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施群英