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DDX46基因慢病毒载体的构建及其在人膀胱癌细胞中的表达被引量：3: 2018年; 目的构建DDX46基因低表达慢病毒载体,并检测其在人膀胱癌细胞中的表达效果,为DDX46基因在人膀胱癌细胞中的研究奠定基础。方法应用实时荧光定量检测5637细胞和T24细胞中DDX46 m RNA表达水平,以寻找合适的细胞系进行实验。分别以DDX46基因序列和普适型阴性序列为模板,设计合成靶点序列,并合成寡核苷酸双链,定向克隆到慢病毒质粒GV115,合成重组质粒sh DDX46和sh RNA,分别称之为实验组和对照组。将不同重组质粒与pHelper 1.0和pHelper 2.0分别转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒后感染5637细胞和T24细胞。应用实时荧光PCR定量检测重组慢病毒感染5637细胞和T24细胞后DDX46 m RNA表达水平,判断其干扰效率。结果 5637细胞和T24细胞均高丰度表达DDX46m RNA,其结果(用ΔCt值表示)分别为(6.53±0.08)和(8.48±0.11);重组慢病毒感染膀胱癌细胞后,在5637细胞中,实验组DDX46 m RNA的表达水平(用ΔCt值表示)为(0.32±0.01),低于对照组(1.00±0.10),差异有统计学意义(P<0.05),其敲减效率为67.70%;在T24细胞中,实验组DDX46 m RNA的表达水平(用ΔCt值表示)为(0.11±0.01),低于对照组(1.00±0.03),差异有统计学意义(P<0.05),其敲减效率为89.00%。结论成功构建DDX46基因低表达慢病毒载体,为研究DDX46基因在膀胱癌细胞中的作用奠定了基础。; 刘熹张冲黄邓高曹卉高元慧张淑芳彭大为; 关键词：短发夹RNA 慢病毒载体人膀胱癌细胞

基于转录组测序的候选膀胱尿路上皮癌分子标记的识别: ：探讨基于Illumina平台的转录测序筛选出的膀胱癌的候选分子标记物在临床诊断中的可能应用价值. 方法：对中南大学湘雅医学院附属海口医院2011年至2013年31例膀胱尿路上皮癌和对应的正常组织,采用实时荧光定量...; 肖四方张应爱肖敬川曹卉张淑芳; 关键词：膀胱癌分子标记物

两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的比较: 2021年; 背景:干细胞是再生医学研究的热点,影响干细胞生物学特性的因素很多,其中供体年龄是重要的影响因素之一。目的:观察两种月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞生物学特性的变化,筛选最佳种子细胞来源。方法:以4月龄和12月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞为研究对象,分别选取第3代细胞和第10代细胞,观察细胞形态,绘制细胞增殖曲线,检测细胞表面抗原、细胞周期、细胞凋亡情况,然后进行成骨诱导分化茜素红染色和成脂诱导分化油红O染色以及细胞衰老β-半乳糖苷酶染色等。结果与结论:①4月龄和12月龄细胞均呈漩涡状贴壁生长,表面标志物CD29、CD44和CD90表达均为阳性,CD8a、CD45和HLA-DR表达均为阴性;②4月龄和12月龄第3代细胞增殖能力均较强;第10代细胞,与4月龄相比,12月龄G0/G1期百分比增高(P<0.001),早期凋亡增加(P<0.001),而S期和G2/M期百分比显著下降(P<0.001);③4月龄和12月龄第3代细胞的体外诱导分化能力无显著性差异;12月龄第10代细胞的钙化结节率和脂滴率与4月龄相比显著降低(P<0.001);④4月龄和12月龄第3代细胞β-半乳糖苷酶几乎不表达;12月龄第10代细胞β-半乳糖苷酶阳性细胞与4月龄相比显著增加(P<0.001),且细胞形态变得更加扁平和肥大、折光性弱;⑤结果表明,4月龄近交系五指山小型猪脂肪间充质干细胞具有更强的增殖和分化能力,且细胞衰老活性更低,提示4月龄更适合用于自体移植的种子细胞。; 高元慧向杨曹卉王顺兰郑琳麟何浩伟张应爱张淑芳黄邓高; 关键词：干细胞脂肪间充质干细胞年龄分化衰老

PRP对光老化人成纤维细胞作用及机制研究: 王薇曹卉王泉江肖敬川王丽范秀红; 在光老化的研究中，成纤维细胞(HDFs)是研究重点。富血小板血浆(PRP)为自体血经离心分离后的浓缩血浆，其含有大量生长因子。最新研究显示PRP对人光老化成纤维细胞有促再生、促分泌作用，但对其有效作用浓度存有争议，其作用...; 关键词：; 关键词：细胞增殖成纤维细胞富血小板血浆

骨髓间充质干细胞经肾动脉移植修复小鼠输尿管损伤的方法学研究被引量：2: 2014年; 目的:从方法学上研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)经肾动脉移植对小鼠输尿管损伤的修复作用,探讨经肾动脉移植BMSCs的有效性.方法:显微血管夹夹毕49只3～4周龄Balb/c小鼠的左侧输尿管,10 d后取出显微血管夹以解除左侧输尿管梗阻,然后将这些实验小鼠随机分为实验组(n=25)及对照组(n=24).实验组小鼠取出显微血管夹后立即经肾动脉移植荧光素酶标记的Balb/c小鼠BMSCs,对照组小鼠取出显微血管夹后随即关闭切口,不移植BMSCs.磁共振成像对实验小鼠进行扫描,通过测量不同时间点的实验小鼠的左肾盂容积,比较实验组与对照组小鼠左侧输尿管梗阻解除后的左输尿管复通率,评估BMSCs对输尿管损伤的修复作用.结果:实验小鼠左侧输尿管梗阻后的左肾盂容积明显大于梗阻前(P＜0.01);实验组与对照组小鼠左侧输尿管梗阻后10d的左肾盂容积差异无统计意义(P=0.693);实验组小鼠左侧输尿管梗阻解除后的左输尿管复通率较对照组小鼠明显增高(P=0.012).结论:BMSCs经肾动脉移植可促进小鼠输尿管损伤的修复.; 李东辉白志明李金东程庆郭子义邓湘东曹卉; 关键词：骨髓间充质干细胞单侧输尿管梗阻磁共振成像荧光素酶

膀胱癌转录水平基因变异分析及分子标记筛选: 张淑芳刘振湘谈顺毛山山张应爱曹卉李金东肖四方; 膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一。其病因复杂，发病机制仍不十分明确，并且其发生发展与基因的变异存在着密切的关系，但还有很多与膀胱癌相关的基因变异未被揭示。该项目采用新一代高通量测序技术，对2例膀胱癌患者的正常和癌...; 关键词：; 关键词：膀胱癌分子标记筛选基因变异

基于高通量测序技术的膀胱癌转录组分子标志物的初步筛选: 张淑芳刘振湘谈顺毛山山张应爱曹卉肖敬川肖四方; 膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，至今临床上仍缺乏判断其恶性程度指标。且对其研究仍处于对特定基因或特定通路表达水平或功能上；近日采用高通量测序技术进行转录组测序在肿瘤分子机制的研究中已广泛应用，但在膀胱癌转录组分子标...; 关键词：; 关键词：膀胱癌高通量测序

全基因组文库筛选膀胱癌吡柔比星耐药分子靶标的研究: 张淑芳曹卉王顺兰黄邓高高元慧文小红谈顺毛山山高鑫陈美张冲; 通过采用CRISPR/Cas9和生物信息学分析技术，从全基因组水平筛选了并验证膀胱癌吡柔比星耐药的关键基因CDCA8，通过在膀胱癌细胞系中敲除该基因并通过细胞功能学实验研究确定该基因是影响膀胱癌细胞系对吡柔比星耐药的关键...; 关键词：; 关键词：膀胱癌吡柔比星

木犀草素促进鼻咽癌细胞凋亡和自噬的机制被引量：5: 2022年; 目的:探讨木犀草素对鼻咽癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响及可能的分子机制。方法:四氮唑蓝盐化合物(MTS法)检测木犀草素对人鼻咽癌细胞CNE-1增殖的作用。流式细胞法检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞自噬小体,Western印迹检测木犀草素对CNE-1细胞凋亡抑制蛋白(Bcl-2)和自噬相关蛋白[自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3蛋白(LC3B)、泛素结合蛋白(p62)]表达的变化并检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白磷酸化水平,检测PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白。结果:木犀草素可抑制CNE-1细胞活力,呈浓度和时间依赖性(P<0.05),同时木犀草素与对照组相比凋亡率增加(P<0.05)。透射电镜结果显示,木犀草素干预CNE-1细胞后,随着药物浓度的增加,细胞内自噬体出现不同程度的增加。Western印迹法结果显示,与对照组比较,木犀草素处理组细胞Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2、p62、磷酸化磷脂酰肌醇(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素通过调节PI3K/Akt/mTOR级联反应,抑制CNE-1细胞生长,启动凋亡和自噬介导的细胞死亡。木犀草素可能成为未来治疗鼻咽癌的有效候选药物。; 王海茹曹卉谭湘敏龙绮; 关键词：木犀草素鼻咽癌细胞凋亡自噬 PI3K/AKT/MTOR

富血小板血浆联合米诺地尔酊治疗雄激素性脱发疗效观察被引量：1: 2023年; 目的:观察富血小板血浆(Platelet-richplasma,PRP)联合米诺地尔酊治疗雄激素性脱发(Androgenetic alopecia,AGA)的临床疗效及安全性。方法:将入选的60例患者按就诊顺序随机分为治疗组和观察组,每各30例。治疗组给予PRP头皮注射,每月1次,共计6次,同时联合米诺地尔酊外涂,2次/天,共治疗6个月;对照组仅给予米诺地尔酊外涂。比较治疗前、治疗3个月及6个月后医生视觉主观评分及皮肤镜下毛发密度,以评判临床疗效。结果:治疗后,医生视觉主观评估两组毛发密度及皮肤镜检测终毛密度和毛发密度均较治疗前有显著增加(P<0.05),并且随着疗程的延长疗效越好。治疗组治疗3个月、6个月后医生评分疗效均优于对照组(P<0.05)。治疗3个月、6个月后,治疗组终毛密度及毛发密度均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但毳毛密度两组比较差异无统计学意义。结论:PRP联合米诺地尔酊治疗AGA起效快、疗效强,对于单用米诺地尔疗效不显著或不耐受,以及无法口服用药者是一个有效的辅助治疗方法。; 王薇曹卉肖敬川陈子兰; 关键词：富血小板血浆米诺地尔酊雄激素性脱发疗效

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曹卉

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