朱辉 作品数:7 被引量:8 H指数:2 供职机构: 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
鲫鱼视网膜谷氨酸受体和GABA受体在爪蟾卵母细胞中的表达 被引量:1 1996年 我们以两栖类卵母细胞为功能表达系统,通过注射鲫鱼(Carassiuscarassius)视网膜mRNA,利用电压箝及药物灌流手段,系统地研究了鲫鱼视网膜内氨基酸受体的类型和特征,结果如下:(1)Glu受体:KA可以诱发明显的去极化电流,而且Diazoxide能增强KA诱导的反应,这提示鲫鱼视网膜内某些Clu受体是AMPA选择性亚型(AMPA-preferringsubtype)。(2)CABA受体:GABA能诱发一个快速、光滑的内向电流,绝大部分对GABA的反应可被bicuculline所压抑,而GABA_B受体的激动剂baclofen则无任何作用,这提示,鲫鱼视网膜内大部分是GABA_A受体。 包永德 朱辉 朱幸关键词:爪蟾 谷氨酸 Γ氨基丁酸 鲫鱼脑氨基酸类神经递质受体在两栖类卵母细胞中的表达 被引量:1 1995年 两栖类卵母细胞表达系统经注射鲫鱼(Carassiuscarassius)脑mRNA后可表达多种神经递质受体和某些离子通道。本工作利用电压箝方法结合药理学手段对GABA受体和谷氨酸离子型受体作了较详细的研究。结果表明,由GABA诱发的电流反应中,约90%由GABAA受体介导,剩余约10%的成分对GABAA受体的专一性拮抗剂Bicuculline不敏感,而GABAB受体的专一性激动剂Baclofen不能引起电流反应,因此这部分受体特性与GABAC受体相似。表达的谷氨酸受体包括离子型受体和代谢型受体。离子型受体中除了少量NMDA受体,绝大部分属KA/AMPA受体亚型。在研究谷氨酸受体各种激动剂的相互作用时,发现NMDA能竞争性地压抑由KA诱发的电流,提示NMDA可能是KA/AMPA受体的弱拮抗剂。 朱辉 朱幸 包永德关键词:神经递质 两栖纲 卵母细胞 大鼠脑mRNA在爪蟾卵母细胞内表达的电压门控钙通道的电压箝研究 被引量:2 1993年 本工作用电压箝记录方法研究了爪蟾卵母细胞经注射大鼠脑mRNA后表达的电压门控钙通道。钙通道的特性由通过钙通道的钡离子流(I_(Ba))来描述。本研究采用的卵母细胞均取自被鉴定的爪蟾。这些爪蟾卵母细胞内源性I_(Ba)大多为零,或小于15nA。将从出生后10d的大鼠全脑中提取的mRNA微量注入这些卵母细胞。在注射mRNA后的5d内,I_(Ba)逐渐增大。在mRNA注射后第三天,由大鼠脑mRNA表达的电压依赖性I_(Ba)最大值一般超过100nA。作为对比,在注射从胚胎大鼠脑提取的mRNA的卵母细胞,几乎测不到电压依赖性I_(Ba)的表达。我们研究了由大鼠脑mRNA表达的I_(Ba)的电压依赖性激活及失活特性和I_(Ba)的药理。发现镧系金属离子(La^(+3),Nd^(+3),Sm^(+3),Eu^(+3),Gd^(+3),Dy^(+3),Er^(+3)在微摩尔浓度数量级即能有效抑制I_(Ba)。L-型钙通道配体nifedipine和Bay K 8644在浓度100μmmol/L时,抑制I_(Ba),而另一dihydropyridine类配体(±)-nimodipine在相同浓度却增加I_(Ba)。 姚永 朱辉 杨又山 包永德关键词:钙通道 卵母细胞 MRNA 中华大蟾蜍卵母细胞质膜的外向整流型钾离子通道 被引量:4 1992年 我们用电压箝方法研究了中华大蟾蜍卵母细胞的膜生理特性。发现卵母细胞膜去极化至-30mV及更偏正时,有一持续的外向电流出现,该电流与去极化程度约呈正比增加,当膜电位箝在20mV时其峰值达3.7±1.4μA。该电流被钾离子通道拮抗剂TEA和4-AP抑制,TEA半抑制浓度为2.6mmol/L。氯通道拮抗剂9-AC(2.5mmol/L)无抑制作用。无钙的或钙离子浓度增加三倍的胞外灌流液均对该电流无影响、该外向电流的逆转电位随胞外钾离子浓度的改变而变化。胞外钾离子浓度增加十倍,逆转电位约增加47.3mV,而胞外钠、钙或氯离子浓度的改变对逆转电位基本上无影响,因此该电流可被认为主要是电压依赖性钾离子流。取自冬眠蟾蜍的卵母细胞经孕酮诱发成熟后,电压依赖性钾离子流减小,仅为原来的1/20-1/30,而取自全年在高温饲养的蟾蜍的卵母细胞经孕酮处理后未见成熟,其电压依赖性钾离子流仅减小至原来的三分之一。 姚永 顾全保 朱辉 包永德 左嘉客关键词:钾通道 中华大蟾蜍 卵母细胞 反义寡核苷酸片段可抑制鲫鱼视网膜电压依赖性钾离子通道的表达 1996年 爪蟾卵母细胞经注射鲫鱼(Carassiuscarassius)视网膜总RNA后,可表达大量电压依赖性钾离子通道。在此基础上,我们进一步发现,一个特定序列的寡核着酸能专一地抑止该通道的表达。由于我们设计与合成的该片段与果蝇、小鼠中已克隆的钾通道中编码N端的一个多肽的mRNA完全互补,因此推测:鲫鱼视网膜中的K+通道基因这个区域与其它物种的K+通道有高度同源性,这为克隆该基因和研究它的功能提供了重要资料。 包永德 朱辉 朱幸关键词:鲫鱼 视网膜 反义寡核苷酸 钾离子通道 鸡视网膜谷氨酸受体和GABA受体在两栖类卵母细胞中的表达 被引量:3 1994年 本工作利用两栖类卵母细胞作为功能表达系统,对鸡视网膜中的谷氨酸受体和GABA受体的类型和基本性质进行了研究。在注射鸡视网膜mRNA的卵母细胞上,谷氨酸受体有明显的表达。L-Glu及其类似物KA,AMPA,QA都毫无例外地能诱导卵母细胞产生快速平滑的去极化电流,而NMDA,L-AP4,ACPD以及天冬氨酸不能诱导明显的电流反应。并且AMPA,QA对KA反应存在一定的抑制作用,提示AMPA,QA可能与KA作用于同一受体。抑制性氨基酸GABA的受体被证明大部分为GABAA亚型,但有小部分的GABA反应不能为荷包牡丹碱(bicuculline)所阻断。 朱幸 朱辉 包永德关键词:视网膜 谷氨酸 受体 两栖纲 卵母细胞 鸡视网膜甘氨酸受体、乙酰胆碱受体及离子通道在两栖类卵母细胞中的表达和初步研究 1994年 利用两栖类卵母细胞表达鸡视网膜mRNA,借助电压箝方法研究鸡视网膜中的神经递质受体和离子通道、结果表明,鸡视网膜中存在甘氨酸受体和N型的乙酰胆碱受体。但天冬氨酸和5-HT、多巴胺未能诱导电流反应。此外还检测到电压依赖性的离子流,主要为延迟整流型的外向钾电流和快速的内向钠电流。 朱幸 朱辉 包永德关键词:视网膜 受体 乙酰胆碱 两栖纲 卵母细胞