李秀萍
- 作品数：117 被引量：175H指数：5
- 供职机构：青海大学畜牧兽医科学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家绒毛用羊产业技术体系建设专项青海省省校合作项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 牦牛源牛肠道病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
- 2025年
- 为了快速、准确地检测牦牛源牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV),试验根据GenBank中牦牛源BEV-NH2株3D基因序列(登录号为PP746571)设计可用于检测青海牦牛源BEV的实时荧光定量PCR特异性引物,通过构建标准质粒和绘制标准曲线建立牦牛源BEV实时荧光定量PCR检测方法,对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,并分别应用该方法及普通RT-PCR方法对青海省海北地区6个牦牛繁育基地的286份腹泻牦牛粪便样品进行检测,计算两种方法的符合率。结果表明:建立的牦牛源BEV实时荧光定量PCR检测方法扩增产物的熔解曲线单一,Tm值在85.6~85.8℃之间,无引物二聚体和非特异性扩增;质粒浓度在3×10^(2)~3×10^(8)copies/μL范围内时标准曲线的线性关系良好,Ct值在10.88~29.63之间,回归方程为y=-3.16x+38.01,R^(2)=0.9964;仅可检测到牦牛源BEV-NH2株,检测不到牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)MY01株、牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)MY20株和牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BcoV)QL21株;对牦牛源BEV的最低检测限为3×10^(2)copies/μL;当模板浓度为3×10^(2)copies/μL、3×10^(3)copies/μL和3×10^(7)copies/μL时,Ct值的变异系数分别为1.28%、1.74%和0.15%,均在1.80%以下。286份牦牛粪便样品中,采用建立的实时荧光定量PCR检测方法检出BEV阳性样品182份,阳性率为63.64%;采用普通RT-PCR方法检出BEV阳性样品114份,阳性率为39.86%;两种方法的符合率为76.22%。说明本研究建立的牦牛源BEV实时荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可用于牦牛腹泻临床样本的BEV检测。
- 林伟山韩元马豆豆李春花童生林李秀萍李秀萍王光华
- 关键词：牦牛3D基因实时荧光定量PCR
- 青海省玉树州称多县绵羊流产类疾病血清学检测被引量：1
- 2015年
- 应用虎红平板凝集试验(Rose-Bengal Plate Agglutination Test,RBPT)和间接血凝试验(Indirect Hemagglutination Assay,IHA),对采自青海省玉树州称多县部分乡镇的204份绵羊血清样品进行了布鲁氏菌、衣原体、弓形虫和绵羊肺炎支原体的血清学抗体检测。结果:在所有被检血清样品中,未检出布病、衣原体阳性血清;检出弓形虫阳性血清5份,阳性率2.45%;检出绵羊肺炎支原体阳性血清1份,阳性率为0.49%。此外,对于抗体阳性的血清采用PCR方法进行抗原检测,结果表明称多地区绵羊中存在弓形虫和绵羊肺炎支原体感染。
- 蔡旺陈林李秀萍王光华马利青
- 关键词：绵羊布鲁氏菌衣原体弓形虫传染性胸膜肺炎
- 青海省河南县欧拉型藏羊流产类疾病血清学检测被引量：2
- 2015年
- 应用虎红平板凝集试验(Rose-Bengal Plate Agglutination Test,RBPT)、衣原体、弓形虫和绵羊肺炎支原体间接血凝试验(Indirect Hemagglutination Assay,IHA),对采自青海省河南县部分乡的200份欧拉型藏羊血清样品进行了布鲁氏菌、衣原体、弓形虫和绵羊肺炎支原体的血清学抗体检测。结果:在所有被检血清样品中检测出弓形虫抗体阳性血清数12份,阳性率为6.0%;绵羊肺炎支原体血清抗体阳性数为1份,阳性率为0.5%,未检出布鲁氏菌和衣原体抗体阳性血清。此外,对于抗体阳性的血清采用PCR方法进行了抗原检测,结果表明青海省河南县地区欧拉型藏羊中存在弓形虫和绵羊肺炎支原体感染。
- 王晓燕李秀萍才让南杰王戈平王光华马利青
- 关键词：布鲁氏菌衣原体弓形虫传染性胸膜肺炎
- 羊传染性脓疱诊断方法的建立被引量：1
- 2012年
- 利用MDBK细胞从青海某养殖户发病羊唇部痂皮中分离获得一株病毒,通过临床症状、PCR检测以及组织病理学观察等方法对该株病毒进行了鉴定,证实分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf Virus,ORFV),命名为ORFV-QHMH01。参照GenBank中ORFV F1L基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物,对ORFV-QHMH01株F1L基因进行了克隆、测序,并推导出其氨基酸序列。序列分析表明,分离株F1L基因片段长987bp,编码328个氨基酸,与AF097215、AY040081、AY040082、AY040083、AY040084、AY040085、FJ808075、HM133903、HQ221964、JQ271535株的核苷酸序列同源性分别为:96.7%,95.6%,96.1%,96.2%,97.5%,97.2%,96.5%,48.6%,95.3%,98.3%。系统发育进化树结果表明,ORFV-QHMH01分离株与参考毒株JQ271535和AY040084的亲缘关系较近,这表明不同地区分离株的F1L基因具有较好的保守性。
- 王光华陆艳王戈平蔡其刚李秀萍叶成玉马利青
- 关键词：羊传染性脓疱病毒
- 自然青贮玉米饲料开窖后微生物菌群的动态变化被引量：3
- 2019年
- 本试验对青海省乐都区自然青贮玉米开窖后饲料中的微生物进行了检测,本试验是从开窖开始至当年青贮玉米饲料饲喂结束共计285d。检测结果表明:青贮玉米饲料在开窖后的100d内pH值≤4.01,在100～255d pH值≤4.53,255～285d上升幅度较快达到4.92;在开窖后的第30d(8.67×10~5个·g^(-1))乳酸菌的数量最多,之后随着贮存时间的延长乳酸菌数量呈波浪式的波动,总体呈减少的趋势;酵母菌和霉菌的数量在开窖后的第255d(8.17×10~6个·g^(-1))最高,随着贮存时间的延长呈增加的趋势;好氧细菌的数量在开窖后的第285d(1.44×10~7个·g^(-1))最高,随着贮存时间的延长也是呈增加的趋势。
- 胡勇茹巧红李秀萍董泽生简莹娜王光华王戈平蔡其刚马利青
- 关键词：开窖微生物菌群
- 青海省海南州引进种牛布鲁氏菌、衣原体和弓形虫等病血清学检测被引量：4
- 2012年
- 应用布鲁氏菌病虎红平板凝集试验、衣原体和弓形虫IHA试验,对青海省海南州某核心种牛群引进的40只种公牛,进行了布鲁氏菌、衣原体和弓形虫等病的特异性血清抗体检测。结果:检出布氏杆菌阳性血清1份,阳性率2.50%:检出衣原体阳性血清6份,阳性率为15.00%;弓形虫阳性血清2份,阳性率为5.00%。结果表明引进的种牛中存在不同程度的布鲁氏菌病、衣原体及弓形虫病。而该三种病均可通过垂直传播。所以,对种牛引进因加强检疫及管理等措施。防止种牛感染造成的疫病传播。
- 措毛加李秀萍
- 关键词：种牛布鲁氏菌衣原体弓形虫
- 青海省海晏县犬粪样中贾第鞭毛虫的检测
- 2013年
- 从青海省海晏县采集10只牧羊犬粪样用于贾第鞭毛虫检测。所有样品经饱和盐水浓缩法和蔗糖密度梯度离心等方法处理后采用光学显微镜、免疫荧光试验(IF)和套式PCR方法进行检测。结果显示,其中1个样品为阳性(10%),PCR扩增片段长度为274bp,命名为QHGC201101株。测序结果与肠贾第鞭毛虫3VR株(HQ616609)核糖体小亚基RNA的同源性为100%,表明分离的虫种为肠贾第鞭毛虫,属于人兽共患型病原。
- 王光华蔡其刚王戈平陆艳李秀萍叶成玉牛小迎马利青Panagiotis Karanis
- 关键词：贾第鞭毛虫RRNA套式PCR
- 青海省三角城种羊场弓形虫病的调查研究被引量：2
- 2016年
- 青海省三角城种羊场是青海细毛羊的原种场,在育种和繁殖方面起到了示范作用。为此,采集羊场一大队一小队的半细毛羊血清100份,进行弓形虫的血清学抗体检测,对于抗体阳性的血清采用PCR方法进行抗原检测,检测结果为阳性血清3份,阳性率为3%,这说明三角城羊场的半细毛羊中存在弓形虫的感染。
- 李秀萍李光梅简莹娜裴全帮李沛龙马利青
- 关键词：半细毛羊弓形虫血清学PCR
- 引起羔羊摇摆病病因的诊断与分析被引量：2
- 2011年
- 通过对青海省湟中县某羔羊群中发生摇摆病的发病情况、临床症状、病理变化、分离培养、重金属盐及微量元素的检测和治疗性诊断的初步分析,初步认为引起湟中县某羔羊群中发生摇摆病的病因为铜缺乏症。
- 王戈平陆艳叶成玉蔡其刚李秀萍王光华牛小迎马利青
- 关键词：羔羊病因铜缺乏症
- 不同处理方法对黄花棘豆中苦马豆素的影响被引量：3
- 2018年
- 本试验采用15种不同方法处理黄花棘豆,检测了不同处理后各组苦马豆素的含量;用处理后的样品进行小鼠饲喂试验,对部分小鼠进行了血清中α-甘露糖苷酶的测定;发现有4种处理方法对苦马豆素具有明显的降解作用,与之对应的小鼠血清中的α-甘露糖苷酶与其它组之间差异显著(P<0.05)。
- 苏忠超李秀萍王戈平蔡其刚王光华马利青
- 关键词：黄花棘豆苦马豆素
