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李素霞

作品数：102 被引量：160H指数：7
供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家高技术研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 60篇期刊文章
  • 34篇会议论文
  • 6篇专利
  • 1篇学位论文

领域

  • 53篇生物学
  • 31篇医药卫生
  • 16篇化学工程
  • 5篇轻工技术与工...
  • 2篇农业科学
  • 1篇天文地球
  • 1篇历史地理
  • 1篇理学

主题

  • 19篇蛋白
  • 17篇羧肽酶
  • 17篇纯化
  • 14篇稳定性
  • 12篇蛋白酶
  • 12篇活性
  • 11篇胰蛋白酶
  • 11篇细胞
  • 10篇氧化物歧化酶
  • 10篇歧化酶
  • 9篇复性
  • 8篇羧肽酶B
  • 8篇基因
  • 8篇发酵
  • 8篇杆菌
  • 7篇肽酶
  • 7篇酵母
  • 7篇超氧化物
  • 7篇超氧化物歧化...
  • 6篇重组羧肽酶B

机构

  • 100篇华东理工大学
  • 10篇上海雅心生物...
  • 6篇中国科学院上...
  • 3篇沈阳师范大学
  • 2篇山东大学
  • 2篇天狮集团有限...
  • 2篇浙江日升昌药...
  • 1篇南京医科大学
  • 1篇上海中医药大...
  • 1篇上海市计划生...
  • 1篇天津商业大学
  • 1篇上海市质量监...

作者

  • 101篇李素霞
  • 46篇袁勤生
  • 19篇范立强
  • 19篇赵健
  • 9篇许建和
  • 6篇夏文超
  • 6篇王尊生
  • 5篇张育坚
  • 5篇顾宇翔
  • 5篇辛爱洁
  • 4篇傅文彬
  • 4篇张晓彦
  • 3篇宋聿文
  • 3篇葛宇
  • 3篇龚毅
  • 3篇吴倩
  • 3篇陈车生
  • 3篇吴梧桐
  • 3篇林康
  • 3篇潘江

传媒

  • 22篇食品与药品
  • 8篇中国生化药物...
  • 6篇华东理工大学...
  • 4篇药物生物技术
  • 3篇中国生物制品...
  • 3篇中国药学杂志
  • 3篇生物工程学报
  • 3篇2004年全...
  • 2篇日用化学工业
  • 2篇中国生物工程...
  • 2篇中国药学会学...
  • 2篇2014年中...
  • 1篇分子科学学报
  • 1篇药物分析杂志
  • 1篇食品与发酵工...
  • 1篇微生物学通报
  • 1篇中国医药工业...
  • 1篇生命的化学
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇2002全国...

年份

  • 1篇2025
  • 1篇2022
  • 2篇2021
  • 1篇2020
  • 1篇2018
  • 5篇2017
  • 2篇2015
  • 8篇2014
  • 2篇2013
  • 3篇2012
  • 8篇2011
  • 8篇2010
  • 10篇2009
  • 9篇2008
  • 6篇2007
  • 13篇2006
  • 2篇2005
  • 10篇2004
  • 3篇2003
  • 6篇2002
共 102 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
对SDS稳定的V8(V125T)蛋白酶突变体的高效表达及性质研究被引量：1
2017年
谷氨酰内切酶能特异性切割谷氨酸、天冬氨酸残基羧基端结合的肽键。将含有V8蛋白酶突变体(V125T)基因的表达质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3),在50L发酵罐中发酵,融合蛋白为可溶性表达,可得菌湿重50g/L,相对蛋白表达量为33%。融合蛋白采用GST亲和纯化、肠激酶激活、DEAE-FF阴离子交换层析,得到纯的V8(V125T)突变体,经纯化后可获得0.998mg蛋白/g菌(湿重),比活为13.47 U/mg pro.纯化过程的酶活回收率达到了97.9%。对纯酶进行酶学性质分析,以Z-Phe-Leu-Glu-p NA作为底物测得V8(V125T)蛋白酶的Km为0.339mmol/L,Vmax为16.642μmol/min。其最适pH为8.0,在pH4.0~10.0之间较稳定;最适反应温度在45℃,12h内在4~35℃有很好的温度稳定性;25℃条件下1mmol/L的金属离子对酶具有不同程度的影响,其中Fe^(3+)的抑制作用最强;2mol/L尿素及1mmol/L EDTA对酶活性无影响,在0.1%SDS中保存12h、在0.5%SDS中4h和在1%SDS中1h,活性均能维持90%以上,在0.5%,0.1%SDS保存12h,仍能保持80%和64%的活性,与未突变的重组V8蛋白酶相比,该突变体对SDS的耐受性得到极大提高。
程可利刘晓李素霞
关键词：突变体酶学性质
钝顶螺旋藻Fe-SOD的纯化及性质被引量：8
2003年
从螺旋藻中分离纯化的Fe-SOD平均比活为4576U/mg,总活力回收率50%,纯度达电泳纯。SDS-PAGE测定纯化的Fe-SOD亚基相对分子质量为21ku,每分子亚基含0.7个Fe原子;在Tris-盐酸缓冲液中的最适pH为8.2、最适温度为25°C;在紫外区279nm有最大光吸收,酶的pH稳定范围为6～11,65°C以上迅速失活,该酶对H2O2敏感,在5mmol/LH2O2中迅速失活,而在φ=0.1的乙腈和5mmol/L叠氮化钠中稳定。
夏文超李素霞范立强袁勤生
关键词：FE-SOD钝顶螺旋藻纯化稳定性金属酶
二硫键Cys139-Cys206影响人胰蛋白酶的稳定性被引量：3
2020年
胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割精氨酸及赖氨酸C端肽键。重组人源阳离子胰蛋白酶(recombinant human cationic trypsin:rht1)的稳定性明显高于重组人源阴离子胰蛋白酶(recombinant human anionic trypsin:rht2)。比较ht1和ht2的氨基酸序列和三维结构,二者的氨基酸序列同源性为95%,rht1比rht2多1对二硫键Cys139-Cys206。为解释该二硫键对其稳定性的作用,构建rht1的Cys139-Cys206二硫键缺失突变体rht1-dC139S-C206S和rht2的增加该对二硫键的突变体rht2-S139C-S206C。进行了重组表达和纯化,并测定rht1、rht2及两个突变体的酶学性质,对比其稳定性。结果发现,与野生型rht1、rht2相比,突变体的酶学动力学参数km和kcat值与最适pH均未有较大差异。但在pH3~12条件下的稳定性,rht1-dC139S-C206S比rht1低46.6%;rht2-S139C-S206C比rht2高30.3%。对比其热稳定性,40℃保温4 h,rht1残余活性为92.4%,而rht1-dC139S-C206S降为60%。60℃保温4 h,rht2-S139C-S206C残余活性为83.3%,而rht2完全失活。表明了该二硫键Cys139-Cys206对人胰蛋白酶稳定性的重要性。进一步进行结构模拟和分析,解释了该对二硫键对稳定性影响的机制。
王之可马强李强刘晓李素霞
关键词：二硫键稳定性突变体
黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶新基因lipB的克隆和表达被引量：2
2011年
目的克隆黏质沙雷菌ECU1010脂肪酶基因lipB于大肠杆菌中表达后研究其酶学性质。方法 PCR克隆脂肪酶基因,与质粒pET-28a（＋）连接后转化至大肠杆菌BL21（DE3）。硫酸铵沉淀法纯化表达产物,研究酶的稳定性等酶学性质。结果成功克隆了S.marcescens ECU1010中脂肪酶基因lipB（GenBank：HM440338）,在E.coli中高效表达。LipB最适反应温度40℃,最适pH 8.5。该酶能在pH 5-7条件下保持稳定,Ca2＋有促进酶活性的作用。LipB对不同有机溶剂的耐受性与黏质沙雷菌脂肪酶LipA有明显差异。结论 lipB基因克隆丰富了脂肪酶基因资源,分析LipB的酶学性质表明,此酶在食品工业和手性药物的拆分等领域有广阔的应用前景。
吴娇娇李素霞赵健范立强许建和
关键词：黏质沙雷菌脂肪酶克隆
前导肽对于羧肽酶B折叠的作用研究（英文）
＜正＞羧肽酶B可特异性切割蛋白质或多肽C末端的碱性氨基酸,如精氨酸、赖氨酸和组氨酸,是重组胰岛素、降钙素等的生产过程中的重要的工业用酶。目前,商业的羧肽酶B均为从猪胰腺提取,含有其它蛋白酶杂质,且价格昂贵。所以,对于重组...
李素霞杨梓安宇宋聿文赵健范立强袁勤生
关键词：REFOLDING
文献传递
黄杆菌肝素酶Ⅱ的克隆及表达
目的获得高表达黄杆菌肝素酶Ⅱ工程菌。方法本文用一对特异性引物通过PCR从黄杆菌（Flavobacterium heparinum）基因组DNA中扩增出黄杆菌肝素酶Ⅱ（HpaII）基因,经测序验证后插入到含T7启动子的质粒...
傅文彬赵健宋聿文范立强李素霞袁勤生
关键词：克隆表达酶活性包涵体复性
文献传递
重组活性羧肽酶B的克隆表达及复性研究
羧肽酶B(carboxypeptidaseB,CPB,EC3.4.17.2)是一种含锌的胰外肽酶,特异的水解肽链C端的碱性氨基酸:精氨酸,赖氨酸或鸟氨酸,CPB含307个氨基酸,分子质量35ku。 本文研究，天...
李素霞张育坚夏文超龚毅袁勤生
关键词：羧肽酶B克隆表达
文献传递
美白活性原料的筛选及其特性研究被引量：5
2009年
对绿茶、葡萄籽和巴西大樱桃等20种植物提取物对酪氨酸酶的抑制作用以及其抗氧化能力(清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的能力)进行了研究。实验结果表明,20种样品均表现出不同程度的酪氨酸酶抑制作用和抗氧化能力,其中绿茶、巴西大樱桃和葡萄籽提取物表现出极强的酪氨酸酶活性抑制率,且抑制活性远高于熊果苷;同时这3种植物提取物也表现出显著的清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的能力,具有应用于美白化妆品的潜力。
王鹏王勇刚李素霞韩福森吴巧玲王素英
关键词：化妆品添加剂植物提取物酪氨酸酶抗氧化能力
蛹虫草菌丝体超氧化物歧化酶的制备被引量：7
2006年
目的 从蛹虫草（Cordyceps militaris）菌丝体中制备Cu，Zn-超氧化物歧化酶。方法 超声破碎、硫酸铵沉淀、离子交换。结果 10g湿菌丝体，最佳超声破碎功率400W，超声时间15min。粗酶液经55％-95％硫酸铵沉淀，DEAE-FF阴离子交换柱，CM-52阳离子交换柱纯化，酶蛋白收率22．4％，比活达到13592．1U·mg（蛋白）^-1，纯化倍数214．1倍。SDS-PAGE电泳分析呈现均一条带。紫外最大吸收峰为266nm。该酶对KCN和H2O2敏感。氨基酸组成和其他来源Cu，Zn-SOD相似。结论 本制备工艺切实可行，能获得理想的电泳纯蛋白。
王尊生何卓晶李素霞袁勤生
关键词：蛹虫草CU
重组猪胰蛋白酶单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
2025年
目的制备重组猪胰蛋白酶(recombinant porcine trypsin,RPT)单克隆抗体,并鉴定其生物学特性,以期为后续RPT检测产品的研发奠定基础。方法采用PCR法扩增PT基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建原核表达质粒pET-28a(+)-RPT,进行菌落PCR及测序鉴定。将原核表达质粒转化感受态E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达及Ni-NTA亲和层析纯化获得RPT。通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经RPT免疫的BALB/c小鼠脾细胞进行融合,筛选出稳定分泌特异性RPT单克隆抗体的杂交瘤细胞,注入小鼠腹腔,制备腹水,ELISA法筛选阳性单克隆抗体,并进行效价、亚型、抗原结合特性及抗体特异性鉴定。结果经菌落PCR及测序鉴定,原核表达质粒pET-28a(+)-RPT构建正确。RPT相对分子质量约为24000,主要以可溶形式存在于上清中,纯化后纯度达90%以上。筛选获得2株阳性单克隆抗体,分别为RPT-4A5C5和RPT-4D6D11,效价均>1∶1280000;均为IgG1亚型,抗体轻链均为Kappa链;均可与RPT及天然PT发生特异性反应,与重组羧肽酶B蛋白(recombinant carboxypeptidase B,RCPB)、重组肠激酶蛋白(recombinant enterokinase,REK)、精子蛋白10(sperm protein 10,SP10)及牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)无明显交叉反应。结论经原核系统表达了RPT,并通过杂交瘤技术制备了高效价、高特异性的RPT单克隆抗体。
张婷婷刘晓安少朋徐轸王鹏李素霞
关键词：原核表达基因重组单克隆抗体生物学特征
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