李高天
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：杭州师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 三例眼部突变小鼠的培育、特征分析及一例小眼小鼠突变基因的染色体定位
- 本研究利用乙基亚硝基脲（ENU）诱变实验，经遗传学检测、临床诊断及病理学观察，最终获得了3种可稳定遗传的眼部异常小鼠;接着采用微卫星标记连锁分析的方法对一例小眼球小鼠进行了突变基因的染色体定位。具体工作如下：⑴利用ENU...
- 李高天
- 关键词：动物遗传染色体定位微卫星标记
- 文献传递
- Plcd1转基因小鼠的制备被引量：1
- 2013年
- 通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.
- 杨伟伟殷筱舒殷黎静张艳丽李高天刘桂杰俞利平顾美儿吴宝金
- 关键词：显微注射转基因小鼠
- 5种不同遗传背景绿色荧光蛋白(GFP)基因导入系小鼠的培育
- 2013年
- 通过反复回交——筛选目的基因的手段,将C57BL/6-Tg(UBC-GFP)30Scha/J转基因小鼠的绿色荧光蛋白基因(GFP)分别向BABL/C、CBA/J、DBA/2J、AKR/J、FVB/J等品系小鼠导入,得到了5种不同遗传背景且带有GFP基因的导入系小鼠.冰冻组织切片等方法显示GFP导入系小鼠的皮肤、肝、肾、心、肺等均有不同程度的绿色荧光蛋白表达,不同遗传背景对GFP的组织表达谱、血液生理指标及繁殖性能未见影响.本实验采用基因导入法培育了5种新的带有GFP导入系小鼠,这些不同遗传背景的基因导入系小鼠为移植生物学研究提供了材料.
- 吴培林俞利平尹洪萍杨伟伟顾美儿刘桂杰张艳丽李高天吴宝金
- 关键词：绿色荧光蛋白基因导入表达谱
- 三例眼部突变小鼠的培育及特征分析
- 2014年
- 目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G1代小鼠2782只,经筛查获得眼部突变表型小鼠65只,可稳定遗传小鼠3例,分别表现为:角膜混浊、小眼球和虹膜异常等特征。角膜混浊者其角膜症状严重程度差异较大,角膜病变部位明显增厚,部分伴有新生血管;小眼球者睑裂较小,甚至上下眼睑粘连,外观眼球不可见,病理学检查可见内有发育异常的小眼球;虹膜异常者可见瞳孔偏大,明显偏离中心位置,偏向位置不定,对光无反射,病理学观察可见虹膜晶状体粘连、虹膜缺损,严重者伴有视网膜异常等。结论本实验成功培育了3例眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供良好的材料。
- 杨伟伟金红颖吴晓玲周祥李高天刘桂杰顾美儿俞利平宋晓明吴宝金
- 关键词：眼部疾病小鼠模型诱变
- snthr-1Bao稀毛小鼠皮肤过度角化相关基因的研究
- 验室通过小鼠皮肤表达关键基因QPCR芯片的研制,运用QPCR芯片研究snthr-1Bao稀毛小鼠的分子病理过程,得到23个表达异常基因Cyp4f15、Itga1、Hgf、 Msx2、Cyp26c1、Wnt7a、hprt、...
- 顾小丽吴宝金李高天张艳丽杨伟伟顾美儿俞利平刘桂杰
- 关键词：差异表达基因信号通路分子病理
- Vill转基因小鼠的制备
- 2014年
- 目的通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变。结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料。
- 殷黎静杨伟伟殷筱舒顾小丽张艳丽李高天郑经纬吴宝金
- 关键词：显微注射转基因小鼠
