杨苗
- 作品数:8 被引量:64H指数:3
- 供职机构:四川农业大学更多>>
- 发文基金:四川省重点科学建设项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 基于鸭疫里默氏杆菌16SrRNA PCR检测方法的建立和应用
- 根据GenBank中鸭疫里默氏杆菌(RA)16SrRNA基因序列设计特异性引物,建立了基于16SrRNA鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法。以建立的PCR方法对RA、大肠杆菌、沙门氏菌、鸭源金黄色葡萄球菌、两双歧杆菌、短乳酸杆...
- 杨苗程安春汪铭书仲崇岳段泽朱德康
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌基因序列分子流行病学
- 文献传递
- Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立被引量:40
- 2007年
- 根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHVⅠ)RNA聚合酶基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了1对引物,建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440bp的条带,而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒(H5N2亚型)、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌(5:A)的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30pg的DHV工核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHv-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot—ELISA检测结果的阳性检出率均为100%,对脾、肺、脑病料的检出率显著(P≤0.01)高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot—ELSA对1987~2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100%(19/19)、36.84%(7/19)和57.98%(11/19),对2000-2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100%(48/48)、56.25%(27/48)和75.00%(36/48)。结果表明,建立的RT—PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。
- 程安春汪铭书信洪一陈海军杨苗郭宇飞朱德康贾仁勇袁桂萍陈孝跃
- 鸭病毒性肝炎的病原分离和鉴定被引量:6
- 2007年
- 从间接免疫荧光检测呈DVH阳性的病死鸭肝脏分离到3株(CD、HB、XC)病毒,电镜下病毒颗粒呈圆形、无囊膜,直径30~40nm,对氯仿、pH3.0、50℃,60min的处理不敏感,分离毒连续传代3次,全部鸭胚在24~60h死亡,胚体呈弥散性充血、出血,其致死鸭胚的能力能够被Ⅰ型DHV高免血清中和。分离毒人工感染1日龄雏鸭后出现与自然病例相同的临床症状和病理变化,并能重新分离到相同病毒。间接免疫组化检测自然病例和人工感染雏鸭的肝、脾、肾等均呈现DVH阳性。结果表明分离到的3株病毒均为Ⅰ型DHV,为有效预防DVH提供了有用的实验数据。
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- 关键词:鸭病毒性肝炎病原
- 基于16SrRNA鸭疫里默氏杆菌PCR方法建立和应用
- 根据GenBank中鸭疫里默氏杆菌(RA)16SrRNA基因序列设计特异性引物,建立了基于16SrRNA鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法.建立的PCR方法对鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、鸭源金黄色葡萄球菌、两双歧杆菌、...
- 杨苗程安春汪铭书仲崇岳段泽朱德康
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌PCR方法GENBANK
- 文献传递
- 基于16SrRNA鸭疫里默氏杆菌PCR方法建立和应用
- 根据GenBank中鸭疫里默氏杆菌(RA)16SrRNA基因序列设计特异性引物,建立了基于 16SrRNA鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法。建立的PCR方法对鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、鸭源金黄色葡萄球菌、两双歧杆菌...
- 杨苗程安春汪铭书仲崇岳段泽朱德康
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌PCR
- 文献传递
- 实时荧光定量RT-PCR检测1型鸭病毒性肝炎方法的建立和应用
- 本文围绕检测1型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-1)的一步法荧光定量反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction,rRT-PCR)诊断...
- 杨苗
- 关键词:排毒规律流行病学荧光定量RT-PCR
- 文献传递
- 基于鸭疫里默氏杆菌16SrRNAPCR检测方法的建立和应用
- 根据 GenBank 中鸭疫里默氏杆菌(RA)16SrRNA 基因序列设计特异性引物,建立了基于 16SrRNA 鸭疫里默氏杆菌 PCR 检测方法.以建立的 PCR 方法对 RA、大肠杆菌、沙门氏菌、鸭源金黄色葡萄球菌、...
- 杨苗程安春汪铭书仲崇岳段泽朱德康
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌PCR
- 文献传递
- 基于鸭疫里默氏杆菌16SrRNA PCR检测方法的建立和应用被引量:20
- 2007年
- 根据GenBank中鸭疫里默氏杆菌(RA)16SrRNA基因序列设计特异性引物,建立了基于鸭疫里默氏杆菌16SrRNA PCR检测方法。以建立的PCR方法对RA、大肠杆菌、沙门氏菌、鸭源金黄色葡萄球菌、两双歧杆菌、短乳酸杆菌、屎肠球菌和短小芽孢杆菌进行检测,结果只有RA DNA能扩增出844 bp的特异条带,其他细菌的DNA不能扩增出任何条带;从凝胶中回收DNA条带,测序结果与GenBank中RA相应序列完全一致。对不同稀释度的RADNA样品进行扩增,PCR对RA DNA最小检出量为22 pg,最少检出RA 80 CFU/mL。以该PCR方法对可疑为RA的临床病料和菌株进行检测和鉴定,结果与细菌分离鉴定吻合率为100%。表明本研究所建立的基于RA 16SrRNAPCR方法具有快速、灵敏、特异的优点,可用于RA感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定。
- 杨苗程安春汪铭书仲崇岳段泽朱德康
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌PCR